北方汉族缺血性脑卒中人群ABCB1基因rs1045642多态性与氯吡格雷抵抗的相关性研究

目的探讨中国北方汉族缺血性脑卒中人群ABCB1基因rs1045642多态性与氯吡格雷抵抗(CR)之间可能存在的关系。方法选取110例急性缺血性脑卒中患者,入院后口服氯吡格雷(75 mg/d),于首日给药前及服用药物7 d时分别采集静脉血(2m L),测定血小板聚集率。CR定义为2次血小板聚集率的变化值不超过10%。所有患者根据结果被分为CR组和非CR(NCR)组。提取基因组DNA后用PCR扩增目的基因并用RFLP法测定SNP。结果 ABCB1基因rs1045642位点TT基因型频率CR组与NCR组比较明显升高(P=0.003)。相比于携带C等位基因,携带T等位基因频率在CR组明显高于NCR组(P=0.001)。结论北方汉族缺血性脑卒中患者中,ABCB1基因在SNP位点rs1045642的多态性可能是CR发生的一个独立危险因素,T等位基因可能是CR发生的风险基因。

不同年龄段汉族缺血性脑卒中患者ABCB1基因rs1045642多态性与发生氯吡格雷抵抗的相关性分析

目的探究ABCBI基因rs1045642多态性与不同年龄段汉族缺血性脑卒中患者发生氯吡格雷抵抗(CR)的相关性。方法选取2015年3月至2017年6月来中国医科大学附属第一医院收治的缺血性脑卒中且发生CR患者62例作为CR组,按照就诊时间、年龄和性别匹配62例非CR缺血性脑卒中患者作为非CR组。采集2组患者免疫学和血清学相关危险因素进行Logistic回归分析,检测不同年龄段ABCBI基因rs1045642基因型和等位基因频率情况,分析不同基因型与血清炎性因子表达的相关性。结果多元Logistic回归结果显示,白细胞介素1(IL-1,比值比=3.35,95%置信区间:2.65～4.31)、肿瘤坏死因子α(TNF-α,比值比=1.56,95%置信区间:0.38～4.36)和高敏C反应蛋白(hs-CRP,比值比=3.42,95%置信区间:1.21～7.74)是缺血性脑卒中患者发生CR的独立危险因素(均P<0.05)。CR组和非CR组ABCBI基因单核苷酸多态位点rs1045642同时存在C/C、C/T、T/T三种基因型,其中CR组T/T基因型频率明显高于非CR组(41.94%比11.29%),且CR组T等位基因频率明显高于非CR组(54.84%比33.06%),差异均有统计学意义(均P<0.01)。对年龄进行分层可知,CR组中≥60岁患者的T/T基因型频率明显高于<60岁患者(54.55%比27.59%),且等位基因中C减少,T增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CR组。T/T基因型患者血清IL-1(r=0.541,P=0.032)、TNF-α(r=0.699,P=0.014)和hs-CRP(r=0.921,P<0.001)均明显高于C/C基因型和C/T基因型者,且均与年龄呈正相关。结论老年缺血性脑卒中患者ABCB1基因rs1045642的T/T基因型携带者更容易发生CR,且T/T基因型缺血性脑卒中患者血清IL-1、TNF-α和hs-CRP的升高可能是发生CR的免疫学机制。

焦磷酸测序法检测ABCB1基因rs1045642多态性的研究

目的采用焦磷酸测序技术,建立适用于临床的ABCB1基因C3435T(rs1045642)多态性检测方法。方法选择首都医科大学附属天坛医院长期随访或住院治疗的癫痫患者50名,提取血液基因组DNA,针对ABCB1基因rs1045642位点设计PCR扩增引物和焦磷酸测序引物。用生物素标记的引物进行PCR扩增,PCR产物纯化并变性为单链后,用Qiagen PyroMark Q24焦磷酸测序仪进行测序和结果分析,采用Sanger一代测序技术对焦磷酸测序结果进行验证。结果根据出峰的碱基和峰高来判断rs1045642位点的基因型,检测结果与Sanger测序比对,结果基本一致。50例样品中,TC型23例,占46%;CC型16例,占32%;TT型11例,占22%。结论本研究建立的焦磷酸测序检测ABCB1基因rs1045642多态性的方法操作简单、快速、准确,是目前理想的应用于临床的检测方法。