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题名鲁氏耶尔森菌qPCR快速检测方法的建立和应用
被引量:1
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作者
张枭
李绍戊
王荻
曹永生
卢彤岩
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机构
中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
南京农业大学无锡渔业学院
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出处
《中国水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期1254-1260,共7页
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基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目(HSY201503)
新疆维吾尔自治区区域协同创新专项(2016E02052)
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文摘
鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)是导致虹鳟(Oncorhynchus mykiss)肠炎红嘴病的病原。本研究以鲁氏耶尔森菌毒力因子rup A基因为靶标设计1对特异性引物,以含有rup A基因部分序列的重组质粒为标准品构建标准曲线,优化建立检测鲁氏耶尔森菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,并对腹腔注射鲁氏耶尔森菌菌悬液的虹鳟肝、肾、脾、血液样品进行检测。结果显示,设计的引物具有良好的种间特异性,标准曲线线性方程为y=–3.3766x+40.012(R^2=0.9958);最低检测限为57 copy/μL,较常规PCR的灵敏度高出约100倍。应用检测结果表明,本方法可准确检测被鲁氏耶尔森菌感染的虹鳟样品。研究表明,所建立的qPCR方法具有特异、灵敏、快速、定量的优点,可用于快速诊断虹鳟肠炎红嘴病早期病症及定量检测鲁氏耶尔森菌。
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关键词
鲁氏耶尔森菌
rupa基因
实时荧光定量PCR
肠炎红嘴病
鲑科
虹鳟
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Keywords
Yersinia ruckeri
rupa gene
real-time quantitative PCR
enteric redmouth diseases
Salmonidae
Oncorhynchus mykiss
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分类号
S94
[农业科学—水产养殖]
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