大肠杆菌DNA损伤修复基因recA、recB、ruvC的实时定量PCR分析

大肠杆菌重组酶RecA能够结合单链DNA,介导链交联,使停滞的复制叉回退。RecB参与形成RecBCD复合体,RecBCD处理DNA产生3’-overhang结构,此结构是RecA介导的同源重组(Homologous Recombination,HR)所必需的。RuvC参与形成RuvABC复合体,RuvABC处理Holliday junction(Hj)结构,进而通过同源重组途径完成DNA损伤修复。本研究表明甲基磺酸甲酯(Methyl Methanesulfonate,MMS)对细胞生长、克隆形成能力及细胞形态有明显影响。实时定量PCR分析发现MMS引起recA上调,recB和ruvC下调。recA在MMS处理后6小时达到最高,之后回落,说明需要大量的RecA处理受损的DNA。recB和ruvC下调后随着时间推移有所恢复,说明细胞正在逐步完成DNA损伤的修复。细胞可能通过同源重组修复受损的DNA。