人vW因子A3区基因在大肠杆菌中表达及其生物学活性的研究

血管性血友病因子 (vWF)是介导血小板粘附到细胞外基质的桥梁 ,在血栓形成过程中发挥重要作用 ,可通过阻断vWF与细胞外基质的结合而阻断血小板的粘附。本研究目的是研究一种抗血栓形成的新疗法。应用RT PCR方法从人脐带内皮细胞中克隆vWFA3区基因并在大肠杆菌中表达 ;应用胶原结合试验及竞争抑制实验分析rvWF A3蛋白的生物学活性。结果表明 :表达的重组蛋白量占菌体总蛋白的 4 6 % ,包涵体经过变性、纯化和复性 ,获得重组蛋白 (rvWF A3) ;rvWF A3具有很好的胶原结合活性 ,且能竞争性抑制野生型vWF与胶原结合。结论 :大肠杆菌中高效表达的rvWF A3具有良好的生物学功能 ,可作为阻断剂用于干预vWF介导的血小板黏附过程 。