LPS诱发sAPP-α转基因鼠神经细胞损伤机制的初步探讨

目的:探讨微生物感染所造成的损伤是否与小儿孤独症的发病相关。方法:我们使用C57BL/6为背景的sAPP-α转基因小鼠和同源对照小鼠,给予低剂量(50μg)的LPS腹腔注射,于不同时间点12、24、48、72、96、120小时以及14周处死小鼠,收集相应的样本,进行不同时间点外周血细胞计数、72小时ELISA方法检测大脑内炎症因子表达水平以及14周大脑免疫细胞化学等检测。结果:实验结果表明,与同源对照小鼠比较,sAPP-α转基因幼鼠在低剂量的LPS作用下,表现为体重减轻,12、24、48、72小时外周血红细胞数和HCT降低、14周大脑海马区存在着广泛的损伤修复区,但外周血血小板计数并无明显改变。对损伤区进行进一步Nissl染色,表明损伤区为不同于任何神经细胞的一种活细胞,推测为出血损伤后的纤维细胞修复。结论:小儿孤独症患者体内高表达sAPP-α是小儿感染后引起神经系统损伤的重要因素,源于高表达于血小板上sAPP-α导致组织出血。

谷氨酸对皮质与海马脑片sAPP释放促进作用的差异

目的 观察谷氨酸对皮质与海马脑片可溶性淀粉样前体蛋白 (sAPP)释放促进作用的差异。方法 ♂SD大鼠断头取皮质与海马后于 0～ 4℃Krebs-Ringer液中快速振动切片 ,切片于 37℃预孵育后置含 5 0 μmol·L-1 的谷氨酸或不含谷氨酸Krebs-Ringer液 (对照 )中孵育后于 1 5 0 0 0g离心取上清 ,应用二辛可宁酸法测定上清总蛋白含量 ;释放入孵育液中的sAPP以West ernblot方法测定。结果 5 0 μmol·L-1 的谷氨酸作用于皮质与海马脑片后 ,其释放的sAPP均在 97～ 1 1 6KD之间 ,sAPP含量都非常低。而皮质中sAPP含量相对较高 ,且 5 0 μmol·L-1 的谷氨酸对于其影响较影响海马大。结论 5 0 μmol·L-1

SAPP提铀螯合树脂的耐氯性能测试

研究了苯乙烯-二乙烯苯骨架氨基磷酸酯功能基树脂(SAPP)对铀吸附性能、耐氯性能、对钙和铁离子的耐受性能以及淋洗性能,并对树脂功能基与铀的作用机制进行了分析。研究表明:当铀溶液中ρ(Cl^-)为25.0g/L时,每克干树脂对铀的吸附容量>140mg;树脂对钙离子也表现出了较好的耐受性;在ρ(Fe^(3+))为1.0g/L时,每克干树脂对铀的吸附容量>50 mg。此外,动态吸附试验证实该树脂对铀的吸附速率较快;可采用60g/L NaHCO_3+20g/L Na_2CO_3组成的混合淋洗剂对吸附饱和的SAPP树脂进行淋洗。

淀粉样前体蛋白裂解片段sAPPβ、Aβ和AICD对SH-SY5Y细胞氧化损伤和线粒体膜电位的影响

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的一个主要的病理特征表现为神经细胞表面大量地呈现β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein, Aβ)。淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)是与AD病理密切相关的膜蛋白,它经β-裂解途径剪切后生成s APPβ、Aβ和AICD片段。Aβ能引发细胞内质网氧化应激、线粒体功能障碍等,但s APPβ和AICD片段对细胞的影响还有待进一步的研究。本实验采用慢病毒介导质粒转染技术,分别构建了稳定过表达s APPβ、Aβ和AICD片段的SH-SY5Y细胞系,并分析了其细胞活力、细胞膜损伤、胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平和线粒体膜电位去极化程度。结果表明, Aβ或AICD片段可在一定程度上导致细胞活力下降、细胞膜受损、胞内ROS水平升高和线粒体膜电位发生去极化,从而对细胞产生氧化损伤作用。

如何借助SAPPS推动新产品研发项目计划管理

文章主要论述研发技术中心在实施SAPPS的过程中,把研发中心现有的以职能为刚性的管理转化为以流程为刚性的管理,并在这种转化中把公司的管理水平提高一个档次,同时实现项目进度更有效的控制。

红花黄酮对孵育海马脑片分泌型淀粉样前体蛋白释放的影响

目的 应用海马脑薄片孵育模型 ,考察红花黄酮对于孵育海马脑片分泌型淀粉样前体蛋白 (sAPP)释放的影响。方法 通过应用红花黄酮孵育海马脑薄片 ,应用WesternBlot技术 ,使用特异性的针对sAPP氨基末端的单克隆抗体 2 2C11检测释放到孵育液中的sAPP。结果 红花黄酮 (浓度为 1.0× 10 -9～ 1.0× 10 3 μmol·L-1)对sAPP的作用则表现出明确的双向性 ,小剂量增加其释放 ,而较大剂量又抑制其释放。结论 红花黄酮对sAPP的作用显示明确的双向性 ,值得进一步研究。

基于STEP的零件加工工艺计划模型

为了满足ＣＩＭＳ环境下工艺设计系统与其它系统集成的需要，建立标准工艺计划模型具有十分重要的意义。本文描述了一个基于ＳＴＥＰ的零件加工工艺计划模型，介绍了建立这一模型的关键技术，给出了参照ＳＴＥＰ建立工艺计划模型的方法。

SCG10通过促进淀粉样前体蛋白APP转运到细胞表面增加其α型加工

淀粉样前体蛋白(APP)的β切割所产生的Aβ阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)致病因子。APP的加工方式与特定的亚细胞区域相关,并受到多个与转运相关的因子的影响。我们实验结果显示SCG10直接与APP的胞内结构域KFFEQ基序相结合促进APP的α型加工过程。敲低SCG10导致α型加工产物s APPα和CTFα的减少,从而增加了Aβ1-40和Aβ1-42的量。增加SCG10的表达量,可以促进APP从高尔基体运往细胞表面,减少β切割,降低Aβ的量。在APPswe/PS1d E9转基因小鼠海马中增加SCG10的表达量能够减少该部位Aβ积累和淀粉样斑块形成。综上所述,这些结果表明SCG10在预防和治疗AD中有潜在的作用。

大豆蛋白-多糖干热制备复合物及其反应机理研究 (Ⅰ)共价复合物的制备及生成机理探讨

通过干热反应制备大豆蛋白-多糖共价复合物,并结合聚丙烯酰胺凝胶电泳验证了大分子复合物的共价结合。对于蛋白与多糖生成共价复合物的Maillard反应路线进行了分析,阐明对于蛋白与多糖在相对温和的反应条件下得到的主要是Maillard反应步骤中的第二步,属于Amadori产物中的一类,并采用红外光谱分析了产物分子结构特征。

MTGase聚合大豆蛋白及其改性机理.(II)MTGase聚合改性大豆蛋白研究

研究了微生物转谷氨酰胺酶 (MTGase)聚合作用对大豆酸沉蛋白 (SAPP)的溶解性能、乳化及起泡性能、凝胶性以及持水性能等功能特性的影响。结果显示 :1)显著地提高了SAPP对pH的稳定性 ,MTGase催化SAPP(1% )聚合 4h可获得较好的pH稳定性 ,然而降低了SAPP的溶解性能 (除等电点附近有点增加之外 ) ;2 )降低了SAPP的乳化能力 ,然而其乳化稳定性稍有增加 ;3)对SAPP的起泡能力影响不大 ,然而可显著地改善泡沫稳定性 ,SAPP经MTGase聚合 2h的样品泡沫稳定性最佳 ;4 )显著地提高SAPP的凝胶性能 ;5 )DSC分析结果表明 ,MTGase显著地提高SAPP的热变性温度 ,或者显著地改善SAPP的水化性能。

大豆蛋白-多糖干热制备复合物及其反应机理研究(Ⅱ)功能性质的改善

对SAPP与葡聚糖(DEX)复合物的乳化活性以及乳化稳定性等功能性质进行系统研究。结果表明,干热反应产物在pH3.0以及pH10.0时保持好的乳化活性;并且在高温、高盐条件下乳化活性变化很小。对反应产物进行差示扫描(DSC)分析,进一步证实蛋白已经与多糖结合反应生成新的化合物,该产物热稳定性很高,比原有蛋白的变性温度提高了几乎两倍。

大豆蛋白与多糖的干热反应研究

对干热反应制备大豆蛋白(SAPP)-多糖共价复合物的各种影响因素进行分析,得出在60℃、79%相对湿度(RH)条件下干热反应5d所得产物的功能特性改善最明显;并结合紫外光谱分析了反应前后蛋白及其复合物分子结构特征。

MTGase聚合大豆蛋白及其改性机理(III) MTGase聚合改性大豆蛋白机理

采用紫外光谱 (UV -spectrum)、荧光光谱 (fluorescencespectrum)以及红外光谱 (FT -IRspectrum)分析了SAPP以及其MTGase -聚合物的结构特征。紫外光谱结果显示MTGase催化SAPP导致它的多肽链的侧链结构发生了变化 ,Tyr和Trp残基的吸收峰红移说明其Cα原子的构型从非平面型转变为平面型 ,而荧光光谱显示MTGase催化导致SAPP的疏水区域暴露出来 ,而且还经历一个空间结构重排的过程 ,而红外光谱显示这种聚合作用还导致多肽链的二级结构发生较大的变化 ,即一部分的 β -折叠二级结构转变为以α -螺旋或无规卷曲。从蛋白质分子结构的角度 ,探讨了MTGase聚合SAPP的改性机理 ,指出其机理在于MTGase聚合导致了SAPP的空间结构发生了变化的缘故。

利用Maillard反应制备大豆蛋白葡聚糖共价复合物

研究了大豆酸沉蛋白和葡聚糖共价键合制备反应及其产物乳化性能的变化.在干热条件下,两种大分子通过Maillard反应进行共价键合并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳验证了大分子复合物的存在.结果表明:产物具有比大豆酸沉蛋白更高的对油/水乳状液的乳化能力,复合物在pH3.0和pH10.0时均能保持较好的乳化活性,并且在高温、高盐条件下乳化活性变化很小.

液相体系制备大豆酸沉蛋白-葡聚糖共价复合物及其反应机制(Ⅰ)共价复合物的制备

作为一项新的有效的制备方法,对液相体系中发生Maillard反应的的各种影响因素进行系统研究,结果表明,80%乙醇体系中,反应体浓度为60%、50℃时反应6h以及95%乙醇体系中,反应体浓度为60%、60℃时反应24h条件下得到的产物表现出了优越的乳化活性。并采用SDS-PAGE技术证实蛋白与多糖之间发生共价结合反应。

液相体系制备大豆酸沉蛋白-葡聚糖共价复合物及其反应机制(Ⅲ)功能性质的改善

对SAPP与葡聚糖(DEX)复合物的乳化活性以及乳化稳定性等功能性质进行系统研究。结果表明,液相体系反应产物在酸性条件下和100℃处理3min时乳化活性指数(EAI)降低,中性和强碱性条件下表现为优越的乳化活性和乳化稳定性。无论是干热5d或者液相体系反应,SAPP-葡聚糖共价复合物在所有pH范围内都能达到很好的溶解性能,并对80%乙醇体系反应前后的Maillard反应产物进行差示扫描(DSC)分析,进一步证实蛋白已经与多糖结合反应生成新的化合物,该产物热稳定性很高。

液相体系制备大豆酸沉蛋白-葡聚糖共价复合物及其反应机制(Ⅱ)反应机制的理论分析

采用凝胶过滤色谱和红外光谱(FT-IR)分析了反应前后蛋白与多糖Maillard反应产物分子结构特征,证实反应后SAPP与葡聚糖产生了共价结合;并通过凝胶渗透色谱(GPC)技术对干热反应后所得共价复合物的分子量分布进行分析,结果表明液相体系所得蛋白-多糖共价复合物与干热法所得产物的数均分子量和重均分子量非常相近。

谷氨酸增加大鼠海马脑片可溶性淀粉样前体蛋白的释放

目的 观察兴奋性神经递质谷氨酸对于可溶性淀粉样前体蛋白 (sAPP)释放的影响。方法 雄性SD大鼠断头取海马后 ,于 0～ 4℃Krebs-Ringer液中快速振动切片 ,37℃预孵育后 ,置含谷氨酸或不含谷氨酸Krebs -Ringer液 (对照 )中孵育 ,于 150 0 0g离心 ,取上清 ,用二辛可宁酸法测定总蛋白含量。以Westernblot法测定 ,释放入孵育液中的sAPP。结果 正常孵育的海马脑片能够分泌基础量的sAPP ,谷氨酸刺激能够导致海马脑片释放sAPP增加 ,但没导致新蛋白的产生。结论 谷氨酸在10 -15～ 10 -3 mol·L-1浓度范围内 。

原花青素对淀粉样蛋白Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞毒性的影响

目的:探讨原花青素对淀粉样蛋白片段Aβ_(25-35)染毒的SH-SY5Y细胞存活、氧化应激及其分泌淀粉样蛋白Aβ_(1-42)和可溶性淀粉样蛋白sAPPα水平的影响。方法:分别以不同浓度(0.1、0.5、1.0、5.0μg/m L)原花青素和不同浓度(0.1、1.0、10.0、20.0μmol/L)的Aβ_(25-35)作用SH-SY5Y细胞24 h后用MTT法检测细胞活力,进一步以1.0μmol/L Aβ_(25-35)染毒细胞,建立细胞损伤模型,不同浓度(0.1、0.5、1.0、5.0μg/m L)原花青素干预24 h,用MTT法检测细胞活力,ELISA法检测细胞分泌Aβ_(1-42)水平及s APPα水平,TBA法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,WST-8法测定细胞内总超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果:与对照组相比,不同浓度原花青素作用24 h后,细胞存活率差异均无统计学意义(P均>0.05),而不同浓度Aβ_(25-35)均使SH-SY5Y细胞活力降低(P<0.01),其中1.0μmol/L Aβ_(25-35)对细胞活力的抑制作用最强(P<0.01)。以1.0μmol/L Aβ_(25-35)染毒细胞,Aβ_(1-42)分泌水平升高(P<0.01),s APPα水平降低(P<0.01),细胞内MDA含量升高(P<0.01),总SOD活力降低(P<0.01)。与1.0μmol/L Aβ_(25-35)染毒组比较,0.1、0.5、1.0、5.0μg/m L原花青素干预可提高各组细胞活力(P<0.05),降低Aβ_(1-42)分泌水平(P<0.01);0.5、1.0、5.0μg/m L原花青素干预可提高细胞分泌s APPα水平(P<0.05),降低细胞内MDA含量(P<0.05),增强总SOD活力(P<0.05)。结论:原花青素可减轻Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞Aβ负荷,并减轻细胞氧化损伤。

功能锻炼联合益塞普治疗强直性脊柱炎的临床疗效分析

目的:分析与探讨功能锻炼联合益塞普对强直性脊柱炎的治疗效果。方法:选取强直性脊柱炎患者40例,对其使用益塞普进行治疗,2次/周,25 mg/次,12周后改为1次/周,每次剂量不变,再使用4周后改为1次/周,12.5 mg/次,继续治疗4周后,改为1次/2周,12.5 mg/次,继续治疗4周,在治疗的过程中指导患者进行功能恢复锻炼。结果:使用脊椎痛觉量表评价患者的症状改善情况,40例患者通过24周的治疗后,其总体症状改善、晨僵时间、C-反应蛋白、红细胞沉降率等均有较大改善。结论:功能锻炼联合益塞普治疗强直性脊柱炎效果好,能够明显改善患者的临床症状与相关实验学指标,值得在临床上进行推广与应用。