吸入暴露途径下纳米塑料在SD大鼠体内的富集特征研究

为探讨吸入暴露纳米级塑料在生物体呼吸系统以外组织上的富集特征,以100 nm聚苯乙烯微球对SD大鼠进行2 h短期吸入暴露,使用热裂解-气相色谱质谱法测定大鼠肝脏、肾脏、心脏以及脑组织上的聚苯乙烯浓度。结果显示:暴露组大鼠肾脏、心脏和肝脏中的浓度[(0.416±0.143)、(0.633±0.278)和(0.617±0.179)g/g]显著高于对照组大鼠[(0.249±0.020)、(0.070±0.096)和(0.101±0.140)g/g],差异具有统计学意义(P<0.05),但各组织间的相关性不显著(P>0.05);2组大鼠脑组织均未检出聚苯乙烯。研究表明,100 nm聚苯乙烯微球吸入暴露2 h后,可通过肺泡进入血液循环,进而在大鼠肝脏、肾脏、心脏中形成沉积。通过探讨纳米级塑料在生物体内的累积特征,为深入开展吸入纳米塑料对人体的健康影响研究提供数据支撑。

基于液质联用法测定嘧啶核苷类化合物GY005在SD大鼠体内的药代动力学实验研究

建立LC-MS/MS法测定嘧啶核苷类化合物GY005在大鼠血浆中的浓度,并应用于大鼠体内的药代动力学研究。以特非那定为内标,经乙腈-甲醇沉淀蛋白后,采用ACE 5 C4 column(50 mm×2.1 mm,2.5μm)色谱柱,以0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相,进行梯度洗脱分离,流速0.7 mL·min^(-1),进样量10μL;采用电喷雾离子源(ESI),正离子扫描方式,MRM扫描,分别以m/z 445.15→270.10和m/z 472.40→436.40作为化合物GY005和内标(特非那定)的质谱检测条件。大鼠灌服2 mg·kg^(-1)化合物GY005后,不同时间点取样测定其血浆浓度,计算药代动力学参数。雌雄SD大鼠单次静脉注射2 mg·kg^(-1)的受试品后,化合物GY005在雄性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(228±44)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.30±0.01)h,清除率(CL)为(149±29)mL·min^(-1)·kg^(-1)。化合物GY005在雌性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(215±158)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.32±0.03)h,清除率(CL)为(226±162)mL·min^(-1)·kg^(-1)。雌雄间暴露水平相当,没有显著性差异。这个方法具有简便、灵敏、快捷,适用于化合物GY005的药代动力学研究。

肾虚血瘀型SD大鼠膝骨关节炎模型的建立与验证

背景:肾虚血瘀证候作为膝骨关节炎常见中医证候,又是膝骨关节炎的基本病机,二者之间有着重要联系。但肾虚血瘀证候如何促进膝关节软骨损伤及其潜在机制并不明确,还需进一步研究。目的:探讨肾虚血瘀证候对SD大鼠膝骨关节炎进程的影响。方法:将16只SD大鼠随机分为模型观察组和对照组,每组8只。模型观察组采用卵巢摘除方法建立肾虚模型,2个月后采用改良HULTH手术进行膝骨关节炎造模,HULTH手术后1周皮下注射盐酸肾上腺素进行血瘀造模;对照组给予卵巢摘除假手术,改良HULTH手术,皮下注射生理盐水。HULTH手术后第5周,检测血液流变学、凝血四项、三碘甲状腺原氨酸、四碘甲状腺原氨酸及雌二醇水平;同时,拍摄膝关节X射线片,进行膝关节苏木精-伊红染色、番红-固绿染色和免疫组化染色。结果与结论:①与对照组相比,模型观察组全血黏度低切、中切、高切和血浆黏度显著升高,凝血四项中纤维蛋白原水平显著升高,凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间显著下降;三碘甲状腺原氨酸、四碘甲状腺原氨酸及雌二醇水平均显著下降;②影像学结果显示模型观察组大鼠膝关节间隙狭窄程度更严重且表面欠光滑,出现高密度影;③苏木精-伊红染色和番红-固绿染色表明,模型观察组大鼠软骨损伤更严重,并且OARSI评分和Mankin评分明显高于对照组;④免疫组化染色结果显示,相较于对照组,模型观察组大鼠软骨外基质Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖蛋白表达显著下降,炎症因子基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5蛋白表达显著升高。结果表明,该研究成功建立了SD大鼠肾虚血瘀型膝骨关节炎模型;肾虚血瘀证候通过促进炎症因子表达进一步加重软骨外基质裂解和软骨退变,促进大鼠膝骨关节炎进程。

N-亚硝基布美他尼SD大鼠体内致突变性风险研究

目的评价布美他尼杂质N-亚硝基布美他尼的体内致突变风险和肝细胞DNA损伤风险。方法SD大鼠随机分为6组,分别为:溶媒对照组(溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),N-亚硝胺布美他尼100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组,阳性对照组1[N-乙基-N-亚硝基脲(ENU),40 mg·kg^(-1)]、阳性对照组2[甲磺酸乙酯(EMS),200 mg·kg^(-1)]。2个阳性对照组均为每组6只动物,其余每组12只动物。大鼠连续14 d经口灌胃给予受试物N-亚硝胺布美他尼。首次给药后约14 d和约28 d后采集外周血用于Pig-a基因突变率检测,末次给药后约3 h取肝细胞开展彗星试验。结果试验期间给予N-亚硝基布美他尼未导致异常临床症状和动物体重及摄食量改变。100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物肝细胞平均tail%DNA值(平均数/中位数)分别为2.90±0.38/2.34±0.46、3.58±0.27/2.87±0.51、3.45±0.59/2.21±1.44,与溶媒对照组相应数值相比未见差异,且无明显剂量效应相关性。首次给药后14 d,100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物平均RBC^(CD59-)和RET^(CD59-)百万分之发生率(RBC^(CD59-)百万分之发生率/RET^(CD59-)百万分之发生率)分别为2.9±1.6/1.2±0.8、2.8±2.4/1.3±1.5、2.4±1.0/1.3±1.5;首次给药后28 d,100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物RBC^(CD59-)百万分之发生率/RET^(CD59-)百万分之发生率分别为5.1±1.5/2.2±0.6、4.3±1.5/3.5±3.6、4.8±2.4/2.5±2.7。上述数值与相同时间点溶媒对照组相比均未见差异,且经统计学分析未见剂量效应相关性。结论连续经口给予N-亚硝基布美他尼14 d,SD大鼠的最大耐受量高于1000 mg·kg^(-1),未检出外周血基因突变风险和肝细胞DNA损伤风险。研究数据可为药品中遗传毒性杂质的合理监管和含N-亚硝基杂质药物的安全使用提供数据支持。

不同周龄和性别的SPF级SD大鼠血液生理生化指标的测定与比较分析

目的探讨分析不同周龄和性别的SPF级SD大鼠血液生理生化指标。方法研究对象为SPF级SD大鼠80只,并随机将其分为4、12、24、48周龄4个实验组,每组内雌雄比例为1:1,所有SD大鼠均应用XFA6030型动物血液细胞分析仪对其血液生理指标展开分析,应用Beckman Coulter AU5800全自动生化分析仪对其血液生化指标展开分析。结果与12、24、48周龄SD大鼠相比较,4周龄的SD大鼠在WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、PCT、BA#、BA%几方面具有较大差异,P<0.05,且各项指标达到峰值的时间均为24周,在雌雄的性别差异中,4周龄SD大鼠BA%具有差异;12、24周龄SD大鼠WBC、RBC具有差异;24周龄SD大鼠BA%具有差异;48周龄SD大鼠MCH、PCT具有差异,且所有差异P值均<0.05;与12、24、48周龄SD大鼠相比较,4周龄的SD大鼠在AST、CHOL、TP、GLU、CRE、ALT、ALP、BUN、TG几方面具有较大差异,P<0.05,在雌雄的性别差异中,4周龄SD大鼠CRE、ALP见具有差异;12周龄SD大鼠AST、CHOL、BUN具有差异;12周龄以及24周龄SD大鼠ALP具有差异,且所有差异P值均<0.05。结论在性别相同但周龄不同的SD大鼠中,其血液生理生化指标存在统计学差异,同样的,在同周龄但不同性别的SD大鼠中亦存在差异。

SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法

目的:探索有效的SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法。方法:取21只雄性SD大鼠、21只雄性SD小鼠制作创伤模型,在不同愈合时间取创面新生皮肤组织制作石蜡切片,对石蜡切片制作过程中的关键步骤进行控制,包括固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、复水、染色、脱水、封藏等。比较不同愈合时间皮肤组织石蜡切片的差异。结果:实验制得组织切片染色均匀,细胞排列紧密,无裂缝,细胞核染色清晰,呈暗红色,成纤维细胞、毛囊、毛细血管和肌肉组织结构均清晰可见。随着愈合时间的延长,皮肤表皮层增厚,毛囊越来越多且分化程度提高,成纤维细胞数量增加。结论:该制备方法可以有效保证石蜡切片的质量并判定皮肤愈合程度。

HPLC-MS/MS法考察水黄皮素在SD大鼠体内的药代动力学特征

目的:建立大鼠血浆中水黄皮素的定量分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法:通过灌胃给予SD大鼠水黄皮素(10 mg·kg^(-1)),血浆样品经蛋白沉淀法处理后进行HPLC-MS/MS定量分析,以五味子醇甲为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)(50 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,流速0.3 mL·min^(-1),梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)扫描,水黄皮素[M+H]^(+)m/z 293.1→277.0,五味子醇甲[M+H]^(+)m/z433.2→384.2;使用DAS软件计算相关药代动力学参数。结果:在1.5625~1600 ng·mL^(-1)浓度范围内,水黄皮素线性关系良好(r=0.9997),定量下限为1.5625 ng·mL^(-1),精密度RSD和准确度RE均小于20%;低、中、高质控样品精密度RSD和准确度RE均小于15%,提取回收率在91.70%~100.28%,基质效应在88.35%~97.55%,稳定性RSD均小于15%。水黄皮素在雌性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.95 h、1214.85 ng·mL^(-1)和11920.43 ng·mL^(-1)·h;在雄性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.19 h、1221.57 ng·mL^(-1)和9983.40 ng·mL^(-1)·h。结论:所建方法符合生物样品定量分析的基本要求,可用于水黄皮素在大鼠血浆中的含量测定及其药代动力学评价;水黄皮素在雌性SD大鼠体内的生物利用度更高。

养血祛风止痛颗粒SD大鼠长期毒性检测及安全性评价

目的:观察SD大鼠长期口服养血祛风止痛颗粒的毒性试验反应并进行药物安全性评估。方法:选取80只SPF级健康大鼠,雄雌比例为1∶1,随机分为养血祛风止痛颗粒高、中、低剂量组和空白对照组,各20只,养血祛风止痛颗粒高、中、低剂量组分别给予3.6、1.8、0.9 g生药/mL浓度的1.5 mL/100 g BW体积灌胃,空白对照组给予1.5 mL/100 g BW等量去离子水灌胃,各组持续灌胃给药105 d。于给药第105 d时各组大鼠眼静脉丛取血2~3 mL后,当日采用“断颈法”全部处死并进行病理系统解剖,测定心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、脑、子宫、卵巢、睾丸等实质性器官脏体比,对采集血样进行血液学、血清生化学指标测定。结果:养血祛风止痛颗粒灌胃105 d内,各组未见中枢神经系统、呼吸系统、胃肠系统、活动度、皮毛等状态改变,各组均未观察到摄食异常事件。较干预前,养血祛风止痛颗粒灌胃105 d后各组大鼠体重显著上升,差异具有统计学意义(P<0.05);各组体重无显著统计学差异(P>0.05)。干预第105天,高、中、低剂量组和空白对照组间凝血时间、红细胞计数、血小板计数、白细胞计数、血红蛋白含量、网织红细胞计数、平均血小板体积、血小板压积、血小板分布宽度、红细胞分布宽度等血液学指标无显著差异(P>0.05)。血糖、丙氨酸氨基转换酶、天门冬氨酸转换酶、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、总胆红素、总胆固醇、白蛋白、总蛋白、肌酸激酶、γ-谷氨酰基转移酶、甘油三酯等血液生化指标无显著差异(P>0.05)。各组间心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺、胸腺、脑、子宫和卵巢、睾丸脏器比差异无明显统计学意义(P>0.05)。结论:养血祛风止痛颗粒连续给药105 d时无毒反应剂量为3.6 g生药/mL,即临床最高剂量50倍,具备较大临床应用潜力。

SPF级雄性SD大鼠回肠与结肠菌群结构比较分析

目的使用高通量测序技术分析SPF级雄性SD大鼠回肠与结肠菌群结构与丰度。方法收集30只SPF级雄性SD大鼠的回肠及结肠腔内容物,提取内容物中细菌总DNA并进行PCR扩增。使用Ilumina NovaSeq测序平台对样本中细菌16S rRNA的V3-V4区进行测序。然后基于有效数据在门、属水平上分析肠道菌群的物种结构和丰度,采用QIIME软件(扩增子)分析工具分析回肠和结肠菌群的多样性及差异,同时应用Tax4Fun程序预测回肠及结肠菌群的优势基因富集通路。结果在门水平上,雄性SD大鼠回肠内微生物优势菌群主要是厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria),占比超过98%;结肠内微生物优势菌群主要是厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),占比超过95%。在属水平上,回肠以乳酸杆菌属(Lactobacillus)和另枝菌属(Alistipes)为主要优势菌群,结肠以乳酸杆菌属(Lactobacillus)及罗姆布茨菌属(Romboutsia)为优势菌群。在菌群多样性方面,结肠菌群的α多样性包括丰富度指数(Chao1指数)及多样性指数(香农指数Shannon index)都显著高于回肠(P<0.01),其菌群物种的组成结构差异性比回肠小;回肠菌群结构差异性显著的主要是厚壁菌门(Firmicutes)、罗姆布茨菌属(Romboutsia)和消化链球菌科(Peptostreptococcaceae),而结肠菌群结构差异性显著的是拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟杆菌纲(Bacteroidia)和拟杆菌目(Bacteroidales)。在菌群功能方面,回肠菌群优势基因显著富集于类脂物代谢、多酮代谢、膜运输、生物降解等通路,而结肠菌群优势基因显著富集于甘聚糖生物合成代谢、能量代谢、辅助因子和维生素及其他产物的生物合成等通路。结论SPF级雄性SD大鼠回肠与结肠菌群在结构与丰度上存在显著差异,结肠菌群的丰富度及多样性高于回肠。

阿司匹林对SD大鼠的致畸作用

目的总结汇总我实验室2015年以来使用阿司匹林作为致畸试验阳性对照药的结果,供开展此类实验的同行们参考。方法将受孕的雌鼠随机分为阴性对照组、阿司匹林组,每组50只。受孕第6~15天灌胃给予阿司匹林280 mg/kg体重,1次/d,共10 d。受孕第20天处死孕鼠,剖腹检查受孕情况和胚胎发育情况,记录子宫连胎重、着床数、黄体数、活胎数、吸收胎数、死胎数。对胎仔进行外观检查,逐一记录胎仔体重、性别、身长、尾长。检查胎仔外观后,每窝的1/2胎仔用95%的乙醇固定,茜素红染色后进行骨骼检查,另1/2胎仔用Bouins液固定后进行内脏检查。结果与阴性对照组相比,阿司匹林组受孕大鼠GD12、GD15、GD20体重减轻,流产率增加,子宫连胎重减轻、活胎率减少、窝均活胎数减少、吸收胎率增加,胎盘重量减轻、胎仔体重减轻、胎仔身长和尾长短小,外观畸形、骨骼畸形、内脏畸形的发生率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在本实验条件下,280 mg/kg体重的阿司匹林对SD大鼠有明显的致畸性。

健心胶囊干预SD大鼠房颤模型的Src激酶、TNF-α水平变化的研究

研究健心胶囊干预SD大鼠房颤模型的Src激酶、TNF-α水平变化。方法 于2021年7月-2021年12月期间采用6-8周SPF级雄性SD大鼠进行研究,分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。结果 在干预后,低、中、高剂量组大鼠TNF-α明显降低,用药剂量越多TNF-α水平越低(P<0.05);在干预后,低、中、高剂量组大鼠Src激酶明显降低,用药剂量越多Src激酶水平越低(P<0.05)。结论 通过使用健心胶囊能够有效改善SD大鼠Src激酶、TNF-α水平,对房颤的临床治疗具有十分重要的指导作用。

菊苣复合物30 d喂养实验对SD大鼠生理状况的影响

目的:分析了解在30 d喂养实验中使用菊苣复合物对SD大鼠进行喂养并观察SD大鼠的生理状况变化。方法:选取60只体型相似的SD大鼠进行为期30 d的喂养实验,将60只大鼠每30只分为一组,雌雄各半,分为观察组和对照组。观察组采用菊苣复合物对大鼠进行喂养,对照组则采用传统喂养方式对大鼠进行喂养,观察并记录菊苣复合物对大鼠生理状况的影响。结果:在30 d动物喂养期间,菊苣复合物未引起大鼠的生理、生化功能器官以及组织形态、整体健康状况等身体的各项指标的异常变化,各项检查结果对照组传统鼠粮与菊苣复合物喂养相比较,差异均无统计学意义。结论:30 d大鼠喂养实验后,对比喂养前前后以及观察组的数据分析食用菊苣复合物对大鼠的各项生理指标有明显的改善,所以菊苣复合物喂养SD大鼠对其的生理指标有益。

食叶草营养成分分析及对SD大鼠尿酸的影响

以河北产食叶草为研究对象,系统分析食叶草中矿物质、多糖、粗纤维、蛋白质、氨基酸、多酚和黄酮的含量,及对高尿酸SD大鼠尿酸水平干预的效果。结果显示,食叶草干物质中蛋白质(32.5%)、多糖(11.00 mg/g)、多酚(5.11 mg/g)、黄酮(18.30 mg/g)、钾、钙、镁等营养物质含量丰富,氨基酸含量丰富且模式优良。食叶草高蛋白属性并未加重高尿酸模型大鼠尿酸水平。

低氧复合丙泊酚通过铁死亡对未成熟SD大鼠海马神经元的影响

目的探讨低氧复合丙泊酚通过铁死亡对未成熟SD大鼠海马神经元的影响。方法将168只新生7 d龄SD大鼠(雌雄各半)按随机数表法分为6组[n=28,体质量(15.59±1.13)g]:脂肪乳氧气组(CO)、脂肪乳空气组(CA)、脂肪乳低氧组(CH)、丙泊酚氧气组(PO)、丙泊酚空气组(PA)、丙泊酚低氧组(PH)。丙泊酚组腹腔注射丙泊酚50 mg/kg、脂肪乳组腹腔注射脂肪乳剂5 mL/kg,1次/d,连续7 d。每次注射完毕后分别放入氧浓度为50%、21%、18%的暖箱(38℃),待翻正反射恢复后,即放回常氧环境中由母鼠继续喂养。观察并监测未成熟SD大鼠丙泊酚麻醉后呼吸频率(RR)和血氧饱和度(SpO_(2));透射电镜观察海马神经元内线粒体形态改变;生化法检测海马组织中Fe^(2+)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测海马组织中转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)的蛋白表达。结果RR和SpO_(2)监测结果显示:与相应的脂肪乳组比较,PO组仅RR降低(P<0.01),而PA组、PH组RR和SpO_(2)均降低(P<0.01)。透射电镜显示:PA组、PH组海马神经元内线粒体普遍肿胀,线粒体嵴溶解、消失。生化法检测结果显示:与相应的脂肪乳组比较,PO组、PA组、PH组Fe^(2+)含量、MDA水平均升高(P<0.01);与PO组比较,PA组、PH组Fe^(2+)含量、MDA水平均升高(P<0.05)。Western blot检测结果显示:与相应的脂肪乳组比较,PO组、PA组、PH组TFRC表达上调(P<0.05);与PO组比较,PA组、PH组的TFRC表达上调(P<0.05)。结论低氧因素增加丙泊酚对未成熟SD大鼠海马神经元的损伤,其机制与海马组织铁死亡相关。

自发矮小症雌性SD大鼠不孕的机制初探

目的 探讨自发矮小症雌性SD大鼠(short stature rat,SSR)不孕的原因及其致病机理研究。方法 以成年野生型SD雌性大鼠和SSR雌性大鼠为研究对象,采用阴道涂片法观察动情周期变化;采用同期发情超数排卵方法比较促排卵效果;测定卵巢、子宫重量及体重、卵巢、子宫指数;测定血清中AMH、E2、FSH、LH、FSH/LH含量;对卵巢组织进行转录组学测序以分析基因表达差异。结果 SSR雌性大鼠动情周期无异常,SSR雌性大鼠体重显著低于野生型,其卵巢指数和子宫指数显著高于野生型。排卵结果显示,野生型SD大鼠平均排卵数量显著高于SSR雌性不孕大鼠(P<0.001);野生型SD大鼠血清AMH(P<0.01)、E2(P<0.05)水平显著高于SSR雌性不孕大鼠,血清FSH(P<0.01)、LH(P<0.01)及FSH/LH(P<0.05)水平显著低于SSR雌性不孕大鼠,PROG则不显著;转录组测序获得250个差异表达基因,其中有190个上调基因、60个下调基因。GO和KEGG分析结果显示,差异表达基因主要富集在IL-17信号通路(IL-17 signaling pathway)、p53信号通路(p53 signaling pathway)和细胞因子-细胞因子受体相互作用(cytokine-cytokine receptor interaction)等。利用CytoHubba插件的MCC、MNC、EPC和Degree计算法分别筛选前10的重要节点,取交集最后得到9个Hub基因,分别为Cxcl1、Cxcl2、IL1a、IL1b、Cd80、Mmp13、Mmp8、Fgf3、Ptgs2。结论 SSR雌性大鼠不孕可能与卵巢储备功能下降和卵巢低反应有关,同时筛选出Cxcl1、Cxcl2、IL1a、IL1b、Cd80、Mmp13、Mmp8、Fgf3和Ptgs2与不孕相关,为进一步探究不孕机制奠定理论基础。

椒目油对SD大鼠灌胃给药的急性毒性研究

目的探讨大鼠灌胃椒目油可能出现的急性毒性反应,为后续应用研究提供安全性参考。方法将SD大鼠随机分为溶剂对照组(n=9)、最低剂量组(n=9)、低剂量组(n=9)、中剂量组(n=9)、高剂量组(n=10)、最高剂量组(n=10),溶剂对照组灌胃玉米油,各剂量组椒目油灌胃剂量依次为0.8134、1.6268、3.2535、6.5070、13.0140 g/kg,一次性灌胃给药,观察并记录给药后14 d内的毒性反应、体质量和摄食量变化情况。观察期结束后,对仍存活动物进行血液生理指标、血清生化指标、脏器系数及脏器组织病理学检查。结果椒目油灌胃14 d后无大鼠死亡,各组大鼠体质量无明显变化(P>0.05)。与溶剂对照组比较,高剂量组14 d进食量增加(P<0.05);最低剂量组、中剂量组、最高剂量组中性粒细胞百分比(neutrophil percentage,NEUT%)水平下降、淋巴细胞百分比(lymphocytes percentage,LYMPH%)水平上升(P<0.05);最低剂量组、低剂量组、中剂量组肌酐(creatinine,CREA)水平下降(P<0.01),左肾系数、右肾系数上升(P<0.05);中剂量组、最高剂量组淋巴细胞绝对值(lymphocyte,LYMP)水平上升(P<0.05);最低剂量组心脏系数下降(P<0.05);高剂量组CREA水平下降、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)水平上升(P<0.05);高剂量组、最高剂量组左肾系数上升(P<0.05);最高剂量组中性粒细胞绝对值(neutrophil,NEUT)水平下降(P<0.05)。与最低剂量组相比,低剂量组NEUT%水平上升、LYMPH%水平下降(P<0.05),心脏系数上升(P<0.05);中剂量组、高剂量组FPG水平上升(P<0.05);高剂量组右肾系数下降(P<0.05);最高剂量组心脏系数上升(P<0.05)。与低剂量组相比,中剂量组NEUT%水平下降、LYMPH%水平上升(P<0.05)、FPG水平上升(P<0.05);高剂量组FPG水平上升、左肾系数下降(P<0.05);最高剂量组NEUT%、NEUT水平下降(P<0.05),LYMPH%水平上升(P<0.05)。与高剂量组相比,最高剂量组NEUT%及NEUT水平下降、LYMPH%水平上升(P<0.05)。HE染色结果显示,溶剂对照组和各剂量组肝脏、脾脏、肾脏、胃未见明显病变。结论单次给予15 mL/kg椒目油灌胃未引起大鼠急性毒性反应,安全性较高,提示椒目油具有开发为生物制剂的潜在价值。

MNU诱导SD大鼠下焦湿热证尿血(膀胱癌)模型研究

目的 探讨N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱导SD大鼠下焦湿热证尿血——膀胱癌(BC)模型的造模过程和成模率。方法 通过膀胱灌注MNU的方法在造模前、造模中、造模后共计6个时间点进行分批次样品采集,并对膀胱组织进行HE染色以了解膀胱原位癌的形成及发展过程。结果 实验过程顺利,在操作过程中大鼠未出现明显尿路损伤现象。通过本造模手法模型组大鼠膀胱内有明显的上皮增生、破损及大面积肿瘤形成和尿血现象。结论 MNU可以成功诱导SD大鼠下焦湿热证尿血模型(膀胱癌),且成模明显,死亡率低,实验数据可为膀胱癌模型的建立、改良和应用提供一定的参考。

SPF级SD大鼠血液学及血清生化学指标参考区间的建立

实验动物血液学及血清生化学指标是评判实验动物是否健康的客观且灵敏的指标。在对保健食品、药品安全性评价中,血液学和血清生化学指标测定是必不可少的一项检测内容,但由于血液学和血清生化学指标易受动物品种、品系、年龄、来源、饲养环境、人员操作、检测仪器、检测试剂等多种因素的影响,各实验室有必要建立起自己的血液学和血清生化学参考区间,并以此作为本单位的参考依据。本试验以SPF级SD大鼠作为研究对象,对正常饲养30 d的SD大鼠血液学和血清生化学指标进行检测,并对检测结果进行统计学分析,得出其参考值区间。结果发现,雌雄SD大鼠血液学各项指标无性别差异;部分血清生化学指标存在明显的性别差异,雄性大鼠血清生化学指标ALP、Cre、Glu检测结果极显著高于雌性大鼠(P<0.01),Urea、TP、ALB、Na检测结果极显著低于雌性大鼠(P<0.01)。由此可见,SD大鼠血清生化学指标受性别因素影响较大,建议长期毒性试验中,雌雄SD大鼠血清生化学检测结果有必要分开进行统计分析。

清洁级SD大鼠标准生物学指标的建立

目的:建立清洁级SD大鼠的正常生理、生化指标。方法:分别选取6、12、18、30周龄的清洁级SD大鼠,雌雄各20只。测量动物的生长曲线、体重回归方程、脏器系数和血常规和血清生化等指标。结果:雄性动物的体重增长趋势比雌性动物高;随着年龄增长,脏器系数逐渐减低。大小肠长度随年龄增长增加,每百克体重大、小肠长度随年龄增大降低。

Mtb诱导的SD大鼠佐剂性关节炎模型的建立及评价

目的建立一种实验性SD大鼠佐剂性关节炎模型,为类风湿关节炎的研究提供一种简单、实用、可靠的动物模型。方法采用热杀死结核分枝杆菌H37Ra(Mtb)与矿物油混匀,一次性经尾根部皮下注射,诱导SD大鼠实验性类风湿关节炎的发生。在实验周期内,定期检测实验动物体重、血常规,并进行关节炎临床评分、足趾容积测定,以流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群变化;以ELASA方法测定血清TNF-α,关节组织中IL-1、IL-6和内皮生长因子(VEGF)水平;同时检测SD大鼠后腿踝关节软骨及滑膜的病理变化,以X-光检查验证模型骨侵蚀程度,通过多项综合指标评价该模型的可靠性。结果SD大鼠经Mtb免疫14d后,大鼠体重明显减轻,外周血白细胞、血小板及单核细胞数明显升高,T淋巴细胞亚群CD4/CD8比值增高。从免疫Mtb10d开始,模型组动物足趾和踝关节出现炎症信号,14～16d达到高峰。免疫28d后,大鼠外周血TNF-α水平升高,关节滑膜组织中IL-1和IL-6及VEGF水平上调。显微镜下病理检测结果显示,模型大鼠关节滑膜增生,淋巴细胞浸润,关节软骨增生。结论由Mtb诱导的SD大鼠关节炎模型与临床RA特征相近,具有模型复制成功率高、操作简单、经济实用等特点,可广泛用于抗类风湿关节炎药物的筛选及实验研究中。