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人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
邱妍妍
毛亮
+2 位作者
谭晓秋
曾晓荣
杨艳
《泸州医学院学报》
2011年第2期111-115,共5页
目的:建立实时荧光定量PCR检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平的检测方法,并构建相应质粒标准品,为进一步研究基因功能奠定基础。方法:提取人肠系膜动脉组织总RNA,采用RT-PCR方法获取sGCα、sGCβ、GAPDH基因片段,与pMD-18...
目的:建立实时荧光定量PCR检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平的检测方法,并构建相应质粒标准品,为进一步研究基因功能奠定基础。方法:提取人肠系膜动脉组织总RNA,采用RT-PCR方法获取sGCα、sGCβ、GAPDH基因片段,与pMD-18T vector连接,并转化到大肠杆菌DH5α细胞,通过PCR和测序鉴定重组质粒。提取含目的基因的质粒作为标准品,采用SYBR GreenⅠ法检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达和构建标准曲线。结果:人肠系膜动脉平滑肌存在sGCα和sGCβ基因表达,质粒标准品经过PCR鉴定并测序,与数据库公布的序列完全一致,标准曲线线性关系好,相关系数R2>0.99。结论:建立了稳定的定量检测方法,并成功用于检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达,构建质粒标准品能用于后续实验。
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关键词
sgcα基因
sgc
β
基因
人肠系膜动脉平滑肌
实时荧光定量PCR
下载PDF
职称材料
题名
人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
邱妍妍
毛亮
谭晓秋
曾晓荣
杨艳
机构
泸州医学院医学电生理省部共建教育部重点实验室
出处
《泸州医学院学报》
2011年第2期111-115,共5页
基金
国家自然科学基金(30670763)资助课题
文摘
目的:建立实时荧光定量PCR检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平的检测方法,并构建相应质粒标准品,为进一步研究基因功能奠定基础。方法:提取人肠系膜动脉组织总RNA,采用RT-PCR方法获取sGCα、sGCβ、GAPDH基因片段,与pMD-18T vector连接,并转化到大肠杆菌DH5α细胞,通过PCR和测序鉴定重组质粒。提取含目的基因的质粒作为标准品,采用SYBR GreenⅠ法检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达和构建标准曲线。结果:人肠系膜动脉平滑肌存在sGCα和sGCβ基因表达,质粒标准品经过PCR鉴定并测序,与数据库公布的序列完全一致,标准曲线线性关系好,相关系数R2>0.99。结论:建立了稳定的定量检测方法,并成功用于检测人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达,构建质粒标准品能用于后续实验。
关键词
sgcα基因
sgc
β
基因
人肠系膜动脉平滑肌
实时荧光定量PCR
Keywords
sgcα
sgc
β
Human mesenteric artery smooth muscle
Real-Time Quantitative PCR
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人肠系膜动脉平滑肌sGCα和sGCβ基因表达水平检测方法的建立
邱妍妍
毛亮
谭晓秋
曾晓荣
杨艳
《泸州医学院学报》
2011
2
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职称材料
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