人血清去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)H2亚基(sH2a)酶联免疫检测法的建立及临床应用

目的探讨肝损伤患者血清中去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)的H2亚基(sH2a)水平和肝损伤进程的相关性。方法纳入苏州九龙医院210例血清样本,其中70例肝损伤组患者,包括肝硬化、病毒性肝炎、脂肪肝,同时纳入140例对照组样本,包括高脂、溶血、黄疸、自身免疫性疾病、健康人。检测上述人群血清sH2a蛋白水平,对ELISA结果和临床诊断结果进行统计学分析。结果①140例对照组和70例肝损伤组的血清样本sH2a蛋白水平分别为105.92±53.41 ng/ml和69.25±27.45 ng/ml,差异有统计学显著性意义(F=14.375,t=5.397,P=0.000)。②sH2a蛋白水平诊断肝损伤的敏感度为68.57%(95%CI:56.37%～79.15%),特异度为82.86%(95%CI:75.58%～88.70%),总符合率为78.10%(95%CI:71.88%～83.49%),KAPPA系数:0.510 6(95%CI:0.387 7～0.633 6)。结论血清sH2a ELISA检测试剂盒的符合率达到临床预期要求,可以作为新的血清标志物达到辅助诊断肝损伤相关疾病的效果。

外周血可溶性sH2a在早期诊断肝纤维化程度中的价值

目的 研究血清肝纤维化标志物sH2a用于诊断慢性肝病患者早期肝纤维化的临床诊断价值及意义.方法 收集67例行肝穿刺活检的慢性乙型肝炎、脂肪性肝病或两者合并患者作为研究对象,通过sH2a试剂盒检测外周血中可溶性sH2a的含量,与实验室指标及肝组织病理纤维化程度进行比较,并绘制特征曲线（ROC）,计算曲线下面积（AUC）,分析其敏感性和特异性以评估该血清标志物对早期肝纤维化的诊断价值.结果 患者血清sH2a水平与肝脏纤维化程度呈负相关,且无纤维化（S0期）、早期纤维化（S1-S2期）和中晚期纤维化（S3-S4期）3组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）.预测有无纤维化发生时,最佳诊断阈值为0.79,敏感性和特异性分别为63％、80％,AUC为0.772;评估有无明显纤维化发生时,当sH2a为0.77时,AUC为0.806,诊断灵敏度为85.7％,特异性为72.7％.结论 运用sH2a评估患者肝脏纤维化程度,可有效诊断患者肝脏早期纤维化,在区分有无明显纤维化上诊断价值更高,为临床诊断及治疗提供可靠依据.

SH2B3基因在髓系肿瘤中的突变位点及频率分析

目的:分析SH2B接头蛋白3(SH2B3)基因在髓系肿瘤中的突变位点及频率。方法:回顾性分析2017年11月至2022年11月首都医科大学宣武医院血液内科髓系肿瘤相关基因靶向DNA测序结果,筛选出携带SH2B3基因突变的患者,收集患者人口学资料及临床资料,分析SH2B3基因突变类型、突变位点、发生频率、共突变基因以及与疾病间的关系。结果:测序结果来自1005例患者,有19例患者检测到SH2B3基因突变,其中错义突变18例(94.74%),无义突变1例(5.26%),10例患者同时伴发其他突变(52.63%),突变等位基因频率(VAF)分布于0.03-0.66;发生频率最高的突变为p.Ile568Thr(5/19,26.32%),平均VAF为0.49,涉及1例MDS/MPN-RS(伴SF3B1突变)、1例MDS-U(伴SF3B1突变)、1例再生障碍性贫血伴PNH克隆(伴PIGA和KMT2A突变)、2例MDS-MLD(其中1例伴SETBP1突变);其余突变包括2例p.Ala567Thr(10.53%),p.Arg566Trp、p.Glu533Lys、p.Met437Arg、p.Arg425Cys、p.Glu314Lys、p.Arg308*、p.Gln294Glu、p.Arg282Gln、p.Arg175Gln、p.Gly86Cys、p.His55Asn和p.Gln54Pro各1例。结论:SH2B3基因在髓系肿瘤中突变位点分布较广,重现性低,其中p.Ile568Thr突变发生率较高,常与其他疾病特征性突变共存。

SHP2表达变化对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织中Akt表达的影响

目的 探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)过表达及低表达对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织中蛋白激酶B(Akt)的影响。方法选取160只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、AdGFP组、Ad-SHP2组和Ad-shRNA/SHP2组,每组32只。采用腹腔注射CCl4法构建大鼠肝纤维化模型,经大鼠尾静脉分别将表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP、表达野生型SHP2及GFP的腺病毒Ad-SHP2、表达GFP并携带靶向SHP2的短发夹RNA(shRNA)的腺病毒Ad-shRNA/SHP2注入大鼠体内。各组分别于造模第2、4、6、8周随机选取8只大鼠,留取肝组织标本。采用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肝组织中SHP2、Akt的mRNA表达水平,采用蛋白质印迹法检测各组大鼠肝组织中SHP2、Akt及磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白表达水平,采用H-E染色法观察各组大鼠肝组织的病理变化,采用Masson三色染色法观察各组大鼠肝组织的胶原沉积情况。结果 靶向SHP2的shRNA及外源性野生型SHP2基因成功导入肝纤维化大鼠体内,并使大鼠肝组织中SHP2呈低表达或过表达。与模型组及Ad-GFP组比较,Ad-SHP2组大鼠的肝纤维化程度加重,而Ad-shRNA/SHP2组大鼠的肝纤维化程度则减轻。在同一造模时间点(第2、4、6、8周)对各组大鼠肝组织中Akt的m RNA和蛋白表达水平,以及p-Akt蛋白表达水平进行比较,结果显示Ad-GFP组、Ad-SHP2组、Ad-shRNA/SHP2组及模型组均显著高于对照组(P均<0.05),而各时间点的Ad-GFP组、Ad-SHP2组、Ad-shRNA/SHP2组及模型组的Akt表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05);与模型组及Ad-GFP组大鼠肝组织中p-Akt表达水平相比较,AdshRNA/SHP2组在各时间点均显著降低(P均<0.05),Ad-SHP2组在各时间点均显著升高(P均<0.05),模型组与Ad-GFP组的p-Akt表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 在CCl4诱导的大鼠肝纤维化病程中,肝组织中SHP2过表达可通过促进Akt磷酸化增强Akt的活性,而肝组织中SHP2低表达则可通过抑制Akt磷酸化减弱Akt的活性。

血清可溶性sH2a联合sICAM-1对非酒精性脂肪性肝病肝纤维化的诊断价值分析

[目的]探讨血清可溶性sH2a联合sICAM-1对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝纤维化的诊断价值。[方法]本院收治NAFLD患者98例,根据肝穿刺活检术病理检查结果分为S0组、S1-S2组、S3-S4组。测定3组患者ALT、AST、GGT、ALB、总胆固醇、sH2a、sICAM-1水平,绘制特征曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),分析其敏感性和特异性以评估sH2a联合sICAM-1对NAFLD肝纤维化的诊断价值。[结果]S1-S2组sH2a低于S0组,S3-S4组sH2a低于S0、S1-S2组,差异有统计学意义(t=23.56、19.56、22.19,P<0.05),S1-S2组sICAM-1高于S0组,S3-S4组sICAM-1高于S0、S1-S2组,差异有统计学意义(t=24.78、26.33、21.48,P<0.05)。各组ALT、AST、GGT、ALB、总胆固醇组间比较差异无统计学意义。sH2a与肝脏病理纤维化分期负相关关系明显,sICAM-1与肝脏病理纤维化分期正相关关系明显,差异有统计学意义(r=-0.42、0.56,P<0.05)。ALT、AST、GGT、ALB、总胆固醇与肝脏病理纤维化分期相关关系不明显,差异无统计学意义。sH2a、sICAM-1、sH2a+sICAM-1诊断肝纤维化的AUC曲线下面积分别为0.773、0.762、0.811,sH2a+sICAM-1诊断方法的灵敏度略高于sH2a、sICAM-1单独诊断,特异度略低于sH2a、sICAM-1单独诊断,但差异均无统计学意义。[结论]血清可溶性sH2a联合sICAM-1诊断NAFLD肝纤维化具有较高的灵敏度和特异性,值得在临床上推广应用。

DNA Methylation of KLRC1 and KLRC3 in Autoimmune Thyroiditis:Perspective of Different Water Iodine Exposure

Objective This study aimed to identify differentially methylated genes(DMGs) associated with natural killer cells in patients with autoimmune thyroiditis(AIT), focusing on the influence of varying water iodine exposure levels.Methods Participants were divided into categories based on median water iodine(MWI)concentrations: iodine-fortified areas(IFA, MWI < 10 μg/L), iodine-adequate areas(IAA, 40 ≤ MWI ≤ 100μg/L), and iodine-excessive areas(IEA, MWI > 300 μg/L). A total of 176 matched AIT cases and controls were recruited and divided into 89, 40, and 47 pairs for IFA, IAA, and IEA, respectively. DMGs were identified using 850K Bead Chip analysis for 10/10 paired samples. Validation of DNA methylation and m RNA expression levels of the DMGs was conducted using Methyl Target^(TM) and QRT-PCR for 176/176paired samples.Results KLRC1, KLRC3, and SH2D1B were identified as significant DMGs. Validation revealed that KLRC1 was hypomethylated and highly expressed, whereas KLRC3 was hypermethylated and highly expressed in individuals with AIT. Furthermore, KLRC1 was hypomethylated and highly expressed in both IFA and IEA.Conclusion The DNA methylation status of KLRC1 and KLRC3 may play crucial roles in AIT pathogenesis. Additionally, DNA methylation of KLRC1 seems to be influenced by different iodine concentrations in water.

自身免疫性肝病患者SH2B3基因Rs3184504单核苷酸多态性分析

目的探讨自身免疫性肝病(AILD)患者SH2B衔接蛋白3(SH2B3)基因中Rs3184504单核苷酸多态性(SNP)变化。方法2017年6月~2023年10月我院收治的58例自身免疫性肝炎(AIH)、62例原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者和同期体检的60例健康人,采用PCR法检测SH2B3基因中Rs3184504位点多态性。应用Logistic回归分析SH2B3基因Rs3184504单核苷酸多态性与AIH或PBC的患病风险度。结果AIH组SH2B3基因Rs3184504位点中TT基因型和等位基因T占比分别为53.4%和66.4%,PBC组分别为54.8%和69.4%,均显著高于健康人(分别为16.7%和26.7%,P<0.05),而AIH组和PBC组SH2B3基因Rs3184504位点中CC基因型分别为20.7%和16.1%,均显著低于健康人的63.3%(P<0.05);Logistic回归分析显示,相对于SH2B3基因Rs3184504位点中CC基因型携带者,TT基因型携带者AIH患病风险提高了2.529倍(OR=2.529,P<0.05),相对于SH2B3基因Rs3184504位点中CC基因型携带者,CT基因型携带者PBC患病风险提高了2.812倍(OR=2.812,P<0.05),TT基因型携带者PBC患病风险提高了2.370倍(OR=2.370,P<0.05)。结论AILD与SH2B3基因中Rs3184504单核苷酸多态性变化有关,其中TT基因是AIH易感基因型,CT和TT基因型是PBC易感基因型,携带T等位基因的患者发生AILD的风险增加。

SHIP1在肿瘤发生发展及免疫调节中的作用

含有SH2区域的肌醇5′磷酸酶1(SHIP1)是一类主要但不完全表达在造血源性细胞胞质中的磷酸酶蛋白,属于肌醇5′磷酸酶家族,是磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路的重要负性调控因子。PI3K信号通路已被证明在肿瘤的发生发展中起作用,而SHIP1作为磷酸肌醇信号通路的调节因子,是肿瘤发生发展和免疫调节中不容小觑的一环。本文旨在总结SHIP1在肿瘤发生发展和免疫调节中的作用,以探寻肿瘤治疗新途径。

miR-484通过SORBS2/MEK-ERK通路调控乳腺癌细胞增殖、转移和自噬

为了分析miR-484在乳腺癌组织和细胞中的表达情况,研究miR-484在乳腺癌细胞增殖、转移和自噬过程中的作用机制,首先,采用GEO数据库分析乳腺癌组织中差异表达miRNA谱,并用实时荧光定量PCR在临床乳腺癌组织及其配对的癌旁组织中检测miR-484的表达情况;其次,利用miR-484模拟物、抑制剂检测miR-484对MCF-7乳腺癌细胞增殖、转移和自噬能力的影响;再次,预测miR-484的调控基因并进行验证,同时构建Sorbin和SH3结构域包含蛋白2(Sorbin and SH3 domain-containing protein 2,SORBS2)过表达载体,检测SORBS2对乳腺癌细胞增殖、转移和自噬能力的影响;最后,用Western-blot分析miR-484调控下MCF-7细胞中丝裂原活化的胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase,MEK)/p-MEK和胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/p-ERK的蛋白质含量变化。结果显示,miR-484在乳腺癌组织及细胞中高表达,具有提高乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力以及降低乳腺癌细胞自噬能力的作用;而且,miR-484可通过下调SORBS2并激活MEK/ERK通路参与乳腺癌的发生发展。

SH2D5介导DNA甲基化改善LPS诱导C6细胞的凋亡机制研究

据报道,DNA甲基化参与抑郁症的发生发展。课题组发现抑郁症大鼠海马中SH2D5含量减少,DNA甲基化是否调控SH2D5以及SH2D5具体作用机制。方法 采用LPS刺激C6细胞,建立抑郁症体外模型。使用MTT评估C6细胞的活力。通过qRT-PCR和Western印迹分析检测SH2D5、Bax、Bcl-2、Bad和Daxx的表达水平。使用亚硫酸氢盐测序/PCR评估SH2D5甲基化水平。结果 模型中SH2D5含量减少,而Bax、Bcl-2、Bad和Daxx的表达水平增加;过表达SH2D5后,上述凋亡指标显著改善。进一步发现,SH2D5的CpG位置高甲基化。结论 过表达SH2D5改善LPS诱导C6细胞凋亡指标,同时SH2D5的变化受DNA甲基化的调控。

SH2B1与EMT相关蛋白在NSCLC中的表达及相关性分析

研究接头蛋白SH2B1在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中的表达及其与上皮细胞间充质转化(EMT)之间的关系,探讨SH2B1是否参与了NSCLC的EMT过程及可能的作用机制,以期为NSCLC的诊疗提供新的分子生物靶点。方法 分别采用免疫组化法(ABC三步法)检测63例NSCLC癌组织和相应的正常肺组织中SH2B1及EMT相关蛋白β-catenin、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin的表达情况,分析SH2B1、β-catenin、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin与NSCLC临床病理特征之间,以及SH2B1与EMT相关蛋白之间的关系。结果 免疫组织化学检测结果显示: SH2B1,N-cadherin,Vimentin在NSCLC癌组织中表达高于正常组织(P<0.05)。β-catenin在癌组织中主要表达于胞核,在正常组织中表达于包膜及胞浆。E-cadherin主要表达于包膜,在正常组织中高于癌组织(P<0.05)。SH2B1、β-catenin、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin的表达与淋巴结转移,TNM分期有关,与年龄、性别、分化类型均无关。SH2B1与EMT相关蛋白的表达在NSCLC中成正相关。结论 SH2B1的表达与NSCLC的EMT相关蛋白的表达具有相关性,提示SH2B1的表达可能参与了NSCLC的EMT过程。 。

血清miR-138-5p,SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度的相关性研究

目的探讨血清微小RNA-138-5p(miR-138-5p)、Sorbin和SH3结构域连接蛋白2(SORBS2)水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者斑块稳定性及病变程度的相关性。方法取2022年7月至2024年1月于石家庄市人民医院收治的131例老年冠心病患者,根据超声结果确定血管腔内的斑块情况分为稳定组52例和不稳定组79例;根据冠状动脉造影结果进行Gensini评分,结合病变范围分为单支病变组42例,双支病变组46例和三支病变组43例。另外选取同期在本院进行体检的49例健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对两组血清miR-138-5p和SORBS2水平检测,采用Pearson法和Spearman法分析血清miR-138-5p和SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度相关性。结果不稳定组血清miR-138-5p低于稳定组、对照组,且稳定组低于对照组。不稳定组血清SORBS2高于稳定组和对照组,且稳定组高于对照组(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,老年冠心病患者血清miR-138-5p水平与SORBS2水平呈负相关(P<0.05)。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血清miR-138-5p水平是老年冠心病患者不稳定斑块形成的保护因素,三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清SORBS2水平是老年冠心病患者不稳定斑块形成的危险因素(P<0.05)。与单支病变组相比,双支病变组、三支病变组患者血清miR-138-5p水平降低,其中三支病变组降低更显著(P<0.05),血清SORBS2水平、Gensini评分升高,其中三支病变组升高更多(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,老年冠心病患者血清miR-138-5p水平与Gensini评分呈负相关,血清SORBS2水平与Gensini评分呈正相关。结论血清miR-138-5p和SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度密切相关。

JAK2 V617F及exon12突变阴性的红细胞增多患者遗传性红细胞增多症相关基因变异分析

目的分析JAK2 V617F及exon12突变阴性的红细胞增多患者遗传性红细胞增多症相关基因变异情况。方法回顾性纳入2021年6月~2022年11月于我院就诊、JAK2 V617F及exon12突变筛查结果为阴性且无继发性红细胞增多原因的红细胞增多症患者31例,收集其一般资料、实验室检查结果,分析遗传性红细胞增多症相关基因变异情况。结果在31例红细胞增多症患者中,2例(6.45%)检测到EPO基因变异,分别为NM_000799.4:c.401C>T p.Thr134Ile和NM_000799.4:c.-36C>A。在受检患者中,检测到PHD2和SH2B3基因共4个单核苷酸多态性(SNP)位点,按发生率由高至低依次为SH2B3基因rs3184504、rs78894077、PHD2基因rs186996510及SH2B3基因rs140649197,其中rs78894077在本研究中的检出率显著高于数据库中人群变异频率,且Mutation Taster及PolyPhen-2软件预测该变异可能有害。结论在JAK2 V617F及exon12突变阴性的红细胞增多症患者中发现两个新的EPO基因变异,同时SH2B3基因rs78894077检出率更高,测序结果可能有助于疾病鉴别诊断,为病因学研究提供理论基础。

非小细胞肺癌组织中TP酶激活蛋白SH3功能结合蛋白2的表达及临床意义

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中TP酶激活蛋白SH3功能结合蛋白2(G3BP2)的表达情况,分析G3BP2对NSCLC细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法收集NSCLC患者120例,腺癌47例,鳞状细胞癌73例。免疫组织化学检测腺癌、鳞状细胞癌组织中G3BP2的表达情况,分析G3BP2表达与患者临床病理特征的关系。蛋白免疫印迹实验和qRT-PCR检测SPC-A-1、16HBE细胞中G3BP2的表达。对NCI-H226、SPC-A-1细胞转染si-NC、si-G3BP2质粒,检测敲低G3BP2对细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。结果腺癌组织和鳞状细胞癌组织中G3BP2的阳性表达率无统计学差异(P>0.05),G3BP2阳性与TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。NCI-H226和SPC-A-1细胞中G3BP2蛋白及mRNA的表达高于16HBE细胞。敲低G3BP2可明显抑制NCI-H226、SPC-A-1细胞的增殖和侵袭并增强细胞凋亡。结论G3BP2在NSCLC组织中的阳性表达与TNM分期、淋巴结转移有关,敲低G3BP2的表达可显著抑制NSCLC的进展。

非小细胞肺癌患者癌组织和血清中SKA3、G3BP2、PROX1表达与临床治疗的关系

目的探讨非小细胞肺癌患者癌组织和血清中癌基因纺锤体与着丝粒相关蛋白(SKA)3、TP酶激活蛋白SH3结合蛋白(G3BP)2和Prospero相关同源异形盒蛋白(PROX)1的表达与术后治疗的临床关系。方法选择内蒙古民族大学附属医院微创手术的非小细胞肺癌患者102例为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测非小细胞肺癌患者手术前后血清中SKA3、G3BP2、PROX1蛋白含量;采用免疫组织化学染色法检测非小细胞肺癌患者癌组织、癌旁组织中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白阳性表达强度,分析癌组织中各指标与肿瘤临床病理特征的关系。结果与术前比较,术后非小细胞肺癌患者血清中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白含量均明显降低(P<0.05);非小细胞肺癌患者癌组织中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白阳性表达强度明显高于癌旁组织(P<0.05);不同组织学分型的非小细胞肺癌患者SKA3、G3BP2、PROX1的表达差异无统计学意义(P>0.05);不同病理分型、临床分期、有无淋巴结转移的非小细胞肺癌患者SKA3、G3BP2、PROX1的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者血清中SKA3、G3BP2、PROX1与患者临床病理特征密切相关,提示其可能成为非小细胞肺癌治疗的靶点及预测预后和复发的指标。

结合基因关联和转录组分析鉴定小麦成株期抗条锈病位点YrZ501-2BL的候选基因

【目的】小麦条锈病是小麦的主要病害之一,每年都会对小麦产量安全造成严重危害,挖掘小麦抗条锈病基因,为小麦抗条锈病种质创新和揭示小麦抗条锈病遗传机制奠定基础。【方法】利用多组学手段结合全基因关联分析(GWAS)开展对小麦成株期抗条锈病性状的解析。首先对411份来自CIMMYT和ICARDA的春小麦进行全基因组关联分析,在小麦2BL染色体上定位到一个主效的成株期抗条锈病位点,并利用含有该位点的抗病材料Z501及感病亲本晋麦79的双亲群体进行连锁作图,成功验证了该位点抗性的稳定性,暂命名为YrZ501-2BL。在此基础上,通过基因注释、比较基因组分析、转录组分析和候选基因的关联分析对目标区间筛选候选基因。【结果】综合GWAS和连锁作图结果,将YrZ501-2BL锁定在小麦2B染色体0.26 Mb(575.706—576.587 Mb)范围内,根据中国春参考基因组注释信息分析,该区间含有12个基因,其中,高可信基因6个;利用在线网站,将目标区间所在的中国春参考基因组与其他已公布的不同倍性小麦基因组进行比较,发现该区间的6个高可信小麦基因基本都能在其他小麦材料中找到同源基因,且基因排列顺序相同,说明该区间可能不存在较大片段的插入、缺失、倒位等现象,可以利用参考基因组信息进行候选基因预测;结合抗病亲本Z501和感病亲本晋麦79的成株期接种条锈菌后的转录组数据,发现只有TraesCS2B02G406400、TraesCS2B02G406500和TraesCS2B02G406600受诱导表达,且抗感病亲本存在表达差异。根据中国春基因组注释,三者分别编码GATA转录因子、SH3P2蛋白和锌指蛋白。通过进一步的候选基因关联分析,发现只有SH3P2蛋白中存在与条锈病表型显著性差异的SNP位点(G/A),虽然该位点(G1369A)在2个可变剪切的转录本中均未引起氨基酸编码变化(TCG和TCA均编码丝氨酸),但可能与可变剪切有关,同时该位点(G1369A)的不同单倍型表型之间也存在极显著差异,进一步分析发现,在G1369A位点下游还有2个引起氨基酸改变的变异位点G1377A和G1431A,分别引起缬氨酸(GTT)到异亮氨酸(ATT)和缬氨酸(GTG)到甲硫氨酸(ATG)的改变,但这两个位点在455份重测序材料中所占比例只有0.87%,属于稀有变异,因此,未进行显著性检验。综上,推测TraesCS2B02G406500为YrZ501的重要抗病候选基因;此外,针对YrZ501候选区间的差异SNP开发了相应的AQP标记,可用于辅助选择,为下一步小麦抗锈病分子育种应用提供了标记资源。【结论】利用多组学整合关联分析的方法,成功在小麦2B染色体上挖掘到1个抗条锈病候选基因TraesCS2B02G406500。

阿司匹林通过抑制SH2B1/β-catenin增强顺铂对食管鳞癌细胞的化疗敏感性

目的探讨阿司匹林(ASA)是否增强顺铂(DDP)对食管鳞癌(ESCC)的治疗作用及其相关机制。方法培养ESCC细胞,实验分为空白组(DMSO组)、实验组(ASA组,DDP组,ASA+DDP组)。CCK8检测ASA和DDP单用或联用对ESCC细胞(Eca-109、Kyse30、TE-10)活性的影响,Annexin-V-FITC/PI检测ASA和DDP单用或联用对ESCC细胞凋亡的影响;转染PHY-LVOE1.6-SH2B1上调Eca-109细胞SH2B1的表达水平,CCK8及细胞划痕实验检测过表达SH2B1对Eca-109细胞活性及迁移的影响,免疫荧光及Western blot检测Eca-109细胞内SH2B1、β-catenin及其相关通路关键分子(GSK-3β、CyclinD1、TCF-4)蛋白变化。结果给予5mmol/L ASA处理后,与空白组相比Eca-109、Kyse30、TE-10细胞活性及凋亡率均无明显差异(Ps>0.05);与DDP5组相比,ASA5+DDP5组3株细胞活性最低(t=3.49,P<0.05;t=2.80,P<0.05;t=3.10,P<0.05)、凋亡率最高(t=11.44,P<0.05;t=11.68,P<0.05;t=12.24,P<0.05),差异具有统计学差异。DDP(5μmol/L)联合梯度ASA(0、5、10mmol/L)处理Eca-109细胞,SH2B1的表达量随ASA浓度上升而下降(F=54.0,P<0.05)。与SH2B1组相比,ASA(10mmol/L)和DDP(5μmol/L)联合处理后,Eca-109细胞SH2B1(t=2.62,P<0.05)、GSK-3β(t=0.96,P<0.05)、CyclinD1(t=1.25,P<0.05)、TCF-4(t=1.98,P<0.05)蛋白表达下降;与Vector组相比,过表达SH2B1,Eca-109细胞活性及迁移能力增强(Ps<0.05),β-catenin表达量及入核增加(t=2.52,P<0.05),GSK-3β(t=2.50,P<0.05)、CyclinD1(t=1.49,P<0.05)、TCF-4(t=2.62,P<0.05)表达增加;可部分逆转ASA和DDP联用处理所带来的上述蛋白抑制作用。结论ASA通过抑制SH2B1/β-catenin信号通路在一定程度上增强ESCC细胞对DDP的化疗敏感性,协同DDP可以抑制细胞活性及促进细胞凋亡。

SHIP2、EGFL7表达与肺癌患者临床病理参数及预后的关系

目的探讨肺癌组织含SH2结构域的Ⅱ型肌醇5’-磷酸酶(SHIP2)、类表皮生长因子域7(EGFL7)表达与肺癌患者临床病理参数及预后的关系。方法回顾性收集湖州市第一人民医院2019年1-12月收治的76例肺癌患者,均以免疫组织化学SP法检测组织中SHIP2、EGFL7蛋白的表达情况,采用Kaplan-Meier法和多变量Cox回归分析SHIP2、EGFL7与肺癌患者预后的关系。结果肺癌组织中SHIP2、EGFL7蛋白高表达率均高于癌旁组织(均P<0.05);SHIP2、EGFL7高表达与低表达组TNM分期、淋巴结转移差异均有统计学意义(均P<0.05);SHIP2、EGFL7高表达组3年生存率均低于低表达组(均P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、SHIP2及EGFL7高表达均为影响肺癌患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论肺癌患者癌组织中SHIP2、EGFL7均为高表达,并与TNM分期及淋巴结转移有关,是影响预后的独立危险因素。

肺癌患者癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达水平及其临床预后意义

目的分析肺癌患者癌组织中含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2(SHIP2)、Pleckstrin2(PLEK2)蛋白表达水平及其临床预后意义。方法收集97例肺癌患者的癌组织标本及其癌旁组织(距肿瘤边缘4 cm处)标本。应用免疫组织化学染色法检测所有标本组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达水平。采用χ^(2)检验分析肺癌患者癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达与临床病理特征的关系,多因素Cox回归分析影响肺癌患者预后的相关因素。结果癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白高表达率均明显高于癌旁组织(61.86%vs 30.93%,63.92%vs 32.99%;P<0.05)。SHIP2、PLEK2蛋白表达与肺癌患者的TNM分期、淋巴结转移存在显著关系(P<0.05)。SHIP2高表达、低表达组患者3年生存率分别为31.67%(19/60)、59.46%(22/37),PLEK2高表达、低表达组患者3年生存率分别为33.87%(21/62)、57.14%(20/35),SHIP2、PLEK2高表达、低表达组3年生存率比较均存在差异(P<0.05)。单因素分析结果显示:TNMⅢ期、淋巴结转移、SHIP2高表达、PLEK2高表达肺癌患者3年生存时间均明显缩短(P<0.05)。多因素Cox分析结果显示,TNMⅢ期、淋巴结转移、SHIP2高表达、PLEK2高表达均为影响肺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论肺癌患者癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达均为高表达,并与肺癌TNM分期、淋巴结转移有关,SHIP2高表达、PLEK2高表达的肺癌患者预后较差,二者有望作为评价肺癌患者预后的生物标志物。

腓骨肌萎缩症4C型1例

报告1例腓骨肌萎缩症4C型病例。患者47岁女性,渐进性双下肢无力伴行走不稳7年。神经系统查体:弓形足,宽基步态。双眼诱发水平及垂直眼震。臀部以下肌萎缩,鹤腿征,双下肢远端肌力Ⅳ+级,四肢腱反射减弱。闭目难立征睁眼及闭眼(+),卧立试验(+),轮替试验(+),反跳试验(+)。肌电图(运动神经)示双侧正中神经中重度脱髓鞘,尺神经轻度-重度混合型病损(脱髓鞘为主),双侧腓总神经和胫神经中重度混合型病损。基因检测结果显示SH3TC2基因C.3143T>C变异。诊断为腓骨肌萎缩症4C型。予康复治疗后,患者行走平衡较前好转。报告本病例旨在增强对该病认识,提高临床医生对该病早期识别和诊断。