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H_2O_2和ABA对干旱高温复合胁迫诱导的玉米叶片sHSPs表达的影响 被引量:2
1
作者 杨海荣 王瑛 +1 位作者 张莉 胡秀丽 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1328-1333,共6页
以玉米脱落酸(ABA)缺失突变体vp5及其野生型Vp5的叶片为材料,分别采用ABA、碘化钾(H2O2清除剂)、钨酸钠(ABA抑制剂)预先处理,对干旱+高温复合胁迫下玉米叶片小热休克蛋白(sHSPs)基因表达进行研究,以确定H2O2和ABA对干旱+高温复合胁迫诱... 以玉米脱落酸(ABA)缺失突变体vp5及其野生型Vp5的叶片为材料,分别采用ABA、碘化钾(H2O2清除剂)、钨酸钠(ABA抑制剂)预先处理,对干旱+高温复合胁迫下玉米叶片小热休克蛋白(sHSPs)基因表达进行研究,以确定H2O2和ABA对干旱+高温复合胁迫诱导的玉米叶片sHSPs基因表达的影响。结果显示:(1)与对照和干旱相比,高温、干旱+高温复合胁迫显著诱导了sHSP16.9、sHSP17.2、sHSP17.4、sHSP17.5、sHSP22和sHSP26等6种sHSPs的表达。(2)H2O2清除剂KI和ABA抑制剂钨酸钠预处理,仅略微抑制高温、干旱+高温复合胁迫诱导的6种sHSPs表达。(3)与未用100μmol/L ABA预处理的vp5相比,100μmol/L ABA预处理仅略微提高了高温、干旱+高温复合胁迫诱导的6种sHSPs的表达水平。研究表明,在干旱+高温复合胁迫条件下H2O2和ABA参与了干旱+高温复合胁迫诱导的玉米叶片sHSPs表达,但并无显著影响,暗示了H2O2和ABA不是干旱+高温复合胁迫诱导sHSPs表达的重要调控因子。 展开更多
关键词 玉米 shsps 干旱+高温复合胁迫 ABA H2O2
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干旱高温复合胁迫下sHSPs基因在不同耐旱性玉米中的表达差异及其对ABA和H_2O_2的响应 被引量:4
2
作者 潘攀 杨彦芳 +1 位作者 王瑛 胡秀丽 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1612-1620,共9页
以4个玉米(Zea mays L.)品种——‘郑单958’(耐干旱)、‘浚单20’(耐高温)、‘隆玉602’(耐干旱高温复合胁迫)和‘驻玉309’(对3种胁迫均敏感)为实验材料,分别采用脱落酸(ABA)及其抑制剂氟定酮(F)、H2O2及其清除剂碘化钾(I)和丙酮酸钠... 以4个玉米(Zea mays L.)品种——‘郑单958’(耐干旱)、‘浚单20’(耐高温)、‘隆玉602’(耐干旱高温复合胁迫)和‘驻玉309’(对3种胁迫均敏感)为实验材料,分别采用脱落酸(ABA)及其抑制剂氟定酮(F)、H2O2及其清除剂碘化钾(I)和丙酮酸钠(P)预处理,探讨干旱高温复合胁迫下小热休克蛋白(sHSPs)在不同耐旱性玉米品种中的表达以及ABA和H2O2对其表达的影响。结果显示:(1)高温、干旱高温复合胁迫诱导的sHSP16.9、sHSP17.2、sHSP17.4、sHSP17.5、sHSP22和sHSP26等6个sHSPs基因表达增加量明显高于干旱和对照。(2)在6个sHSPs中,sHSP17.2基因仅在‘郑单958’中表达;sHSP16.9、sHSP17.4和sHSP26基因在‘隆玉602’中表达增加量最高,在‘驻玉309’中表达增量最低;sHSP17.5和sHSP22基因在‘郑单958’中表达增加量最高,在‘驻玉309’中最低。(3)ABA、F、I和P预处理后,对干旱高温复合胁迫诱导的6个sHSPs基因表达增加量仅有略微影响,但显著影响了sHSP26的蛋白表达。研究表明,sHSPs在不同耐旱性玉米品种中的表达存在显著差异,ABA和H2O2仅稍微提高了sHSPs基因表达,但显著提高了sHSP26蛋白表达,这些结果为进一步研究植物在多胁迫条件下耐逆机理奠定了基础。 展开更多
关键词 玉米 ABA shsps H2O2 干旱高温复合胁迫
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植物中小分子热激蛋白基因家族(sHSPs)研究进展 被引量:14
3
作者 张宁 姜晶 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期943-948,共6页
热激蛋白(HSP)是从细菌到高等真核生物中普遍存在的在受到环境胁迫的响应后迅速合成的一类蛋白,它们几乎在所有的植物中起着重要的作用。真核生物的HSP根据分子量的大小可以分为5个家族,即HSP100、HSP90、HSP70、HSP60和小分子热激蛋白(... 热激蛋白(HSP)是从细菌到高等真核生物中普遍存在的在受到环境胁迫的响应后迅速合成的一类蛋白,它们几乎在所有的植物中起着重要的作用。真核生物的HSP根据分子量的大小可以分为5个家族,即HSP100、HSP90、HSP70、HSP60和小分子热激蛋白(s HSPs)。因为s HSPs的分子量普遍在20 k Da左右,故也称为HSP20。近年来的研究表明s HSPs基因家族在响应植物非生物胁迫中起着重要的作用。本文介绍了s HSPs基因结构和功能的最新研究进展,为阐明其在不同植物中的功能提供参考。 展开更多
关键词 植物 shsps基因家族 研究进展
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小鼠Lewis肺癌细胞与旋毛虫相关抗原基因sHSPs的原核表达及鉴定 被引量:1
4
作者 鹿香云 张西臣 +4 位作者 李姗 张洪波 宫鹏涛 李建华 杨举 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期409-412,共4页
目的对小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞与旋毛虫(Trichinella spiralis)相关抗原基因sHSPs进行原核表达,对表达产物进行抗原性鉴定。方法利用噬菌体文库展示技术筛选旋毛虫与LLC细胞相关抗原基因并分析,获得sHSPs(DQ 986457)基因。以旋毛虫cDNA... 目的对小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞与旋毛虫(Trichinella spiralis)相关抗原基因sHSPs进行原核表达,对表达产物进行抗原性鉴定。方法利用噬菌体文库展示技术筛选旋毛虫与LLC细胞相关抗原基因并分析,获得sHSPs(DQ 986457)基因。以旋毛虫cDNA为模板,PCR扩增sHSPs基因,连接至表达载体pET-32a(+)后转化入感受态BL21(DE3),以IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白的表达及其反应原性。结果重组表达质粒pET-32a(+)-sHSPs经双酶切及测序鉴定证明克隆载体构建正确,SDS-PAGE检测其表达重组蛋白相对分子质量约为36×10~3。Western blot检测重组蛋白可被抗LLC细胞多抗血清识别。结论成功构建了pET-32a(+)-sHSPs克隆载体,其表达的重组蛋白可与抗LLC细胞多抗血清反应即具有反应原性,为该蛋白的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 旋毛虫 LLC细胞 原核表达 shsps
原文传递
花楸树小热激蛋白23.8基因(SpHSP23.8)克隆与表达分析 被引量:4
5
作者 张泽 裴鑫 +2 位作者 鲁仪增 常金财 郑健 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期9-20,共12页
以花楸树〔Sorbus pohuashanensis(Hance)Hedl.〕为研究对象,对其小热激蛋白23.8基因(SpHSP23.8)的克隆、组织特异性表达以及响应非生物胁迫的表达进行研究。结果表明:SpHSP23.8基因开放阅读框(ORF)包含648个碱基,编码215个氨基酸,其编... 以花楸树〔Sorbus pohuashanensis(Hance)Hedl.〕为研究对象,对其小热激蛋白23.8基因(SpHSP23.8)的克隆、组织特异性表达以及响应非生物胁迫的表达进行研究。结果表明:SpHSP23.8基因开放阅读框(ORF)包含648个碱基,编码215个氨基酸,其编码氨基酸序列的理论相对分子质量约23800,该基因包含1个内含子。氨基酸序列比对结果显示:SpHSP23.8蛋白与枇杷〔Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.〕EjsHSP6蛋白(登录号AKP06201.1)的同源性最高。根据SpHSP23.8蛋白与模式植物小热激蛋白氨基酸序列的聚类分析结果,推测SpHSP23.8蛋白定位于线粒体中。组织特异性表达结果显示:SpHSP23.8基因在茎中的相对表达量最高,其次为果实和根,而花中的相对表达量最低。高温、NaCl及干旱胁迫下,花楸树叶片中SpHSP23.8基因的相对表达量显著升高。随着高温胁迫时间的延长,SpHSP23.8基因的相对表达量呈先升高后降低的变化趋势,且在胁迫2.00 h达到峰值;在NaCl和干旱胁迫下,SpHSP23.8基因的相对表达量均呈升高的变化趋势。高温、NaCl和干旱胁迫下,SpHSP23.8基因在转SpHSP23.8基因拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕中的表达趋势与其在相应胁迫条件下花楸树中的表达趋势一致。上述研究结果表明:SpHSP23.8基因参与了花楸树对高温、NaCl和干旱胁迫的响应,在花楸树引种驯化的适应性方面起着一定的作用。 展开更多
关键词 花楸树 小热激蛋白(shsps) 基因克隆 基因表达 非生物胁迫
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小分子热休克蛋白生物学功能的研究进展 被引量:5
6
作者 王国强 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第19期9946-9947,9949,共3页
根据国内外近年来小分子热休克蛋白的研究概况,对小分子热休克蛋白的分子伴侣功能、稳定细胞结构功能和调节细胞凋亡功能进行综述,并讨论小分子热休克蛋白在生物进化研究中的意义以及应用前景。
关键词 shsps 分子伴侣 细胞结构 细胞凋亡 进化
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植物小分子热激蛋白的进化及表达调控研究进展 被引量:3
7
作者 李春子 成善汉 《热带生物学报》 2010年第2期193-196,共4页
小分子热激蛋白(sHSPs)是一类分子质量为15~30KDa的热激蛋白,在植物耐热反应中起着重要作用。笔者详细分析了4种常见的茄科植物番茄、烟草、辣椒、马铃薯和模式植物拟南芥中各种sHSPs基因序列的系统进化关系,并综述了热激蛋白基因在不... 小分子热激蛋白(sHSPs)是一类分子质量为15~30KDa的热激蛋白,在植物耐热反应中起着重要作用。笔者详细分析了4种常见的茄科植物番茄、烟草、辣椒、马铃薯和模式植物拟南芥中各种sHSPs基因序列的系统进化关系,并综述了热激蛋白基因在不同胁迫条件下的表达和调控机理。 展开更多
关键词 shsps 系统发育 胁迫表达 基因表达调控
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小毛茛内酯影响耐药结核患者外周血淋巴细胞SHSP和GLS表达的研究 被引量:26
8
作者 詹莉 戴华成 +2 位作者 杨治平 易著文 成诗明 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期677-679,共3页
目的 :研究小毛茛内酯 (Ternatolide ,Tern)抗人PBL内结核休眠菌感染的分子免疫学机理。方法 :用Tern 2 0 0mg·L-1体外分别培养PBL 2 4 ,36 ,4 8,6 0 ,72 ,84h后 ,采用PCR方法检测 84例耐药、多耐药结核患者体外PBL内结核菌小热休... 目的 :研究小毛茛内酯 (Ternatolide ,Tern)抗人PBL内结核休眠菌感染的分子免疫学机理。方法 :用Tern 2 0 0mg·L-1体外分别培养PBL 2 4 ,36 ,4 8,6 0 ,72 ,84h后 ,采用PCR方法检测 84例耐药、多耐药结核患者体外PBL内结核菌小热休克蛋白 (16KDaSHSP)基因的表达 ;采用反转录聚合酶链反应半定量 (QC RT PCR)方法 ,测定其PBL内颗粒裂解肽 (Granulysin ,GLS)mRNA的表达。结果 :Tern能显著减少耐药结核患者PBL内结核菌16KDaSHSP基因拷贝表达量 (P <0 .0 0 1) ,这种表达减少与培养时间成正比 ;同时显著增加了PBLGLSmRNA的表达水平 (P <0 .0 0 1)。结论 :Tern可能通过减少结核休眠菌 16KDaSHSP的表达 ,激活休眠菌的同时促进GLSmRNA高水平的表达 ,增强机体CTL杀菌能力 ,达到抗耐药的作用。 展开更多
关键词 小毛茛内酯 外周血 淋巴细胞 SHSP GLS 耐药结核病 休眠菌 免疫学机理
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昆虫sHSP基因的系统进化研究 被引量:8
9
作者 李斌 夏庆友 +2 位作者 孙卫忠 鲁成 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第4期340-343,共4页
低分子量热激蛋白 (sHSP)广泛存在于生物界 ,不同组织的sHSP是紧密相关的 ,主要的HSP具有高度保守的氨基酸序列 ,HSP基因的保守性可以为生物进化研究提供一定的科学依据。对昆虫纲的 2个目 4个种的sHSP进行了系统进化分析 ,它们在系统... 低分子量热激蛋白 (sHSP)广泛存在于生物界 ,不同组织的sHSP是紧密相关的 ,主要的HSP具有高度保守的氨基酸序列 ,HSP基因的保守性可以为生物进化研究提供一定的科学依据。对昆虫纲的 2个目 4个种的sHSP进行了系统进化分析 ,它们在系统演化上形成两大分支 ,基本代表了其在经典分类上的地位 ;但Bmhsp 2 1.4与其它家蚕及昆虫sHSP在演化上存在极大的分歧 ,在进化上可将Bmhsp 2 1.4与其它 5种家蚕sHSP划分为两大类群 ,推测其在家蚕的演化分析中具有重要地位。另外 ,果蝇致死因子Dml(2 )efl与家蚕的 展开更多
关键词 昆虫 低分子量热激蛋白 SHSP 基因 系统进化 组织 氨基酸序列 Bmhsp 21.4 果蝇致死因子 家蚕
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报春PF sHSP 17-1基因转化拟南芥及耐热鉴定 被引量:3
10
作者 张路 胡伟娟 +3 位作者 张启翔 高亦珂 石少川 王叶 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期177-181,186,共6页
根据灰岩皱叶报春PF sHSP 17-1热激蛋白基因序列,采用PCR法从差减文库中克隆得到该基因,并构建pCAMBIA1301-PF sHSP 17-1植物表达载体,通过根癌农杆菌介导的花器浸染法转化拟南芥,经潮霉素筛选、PCR和RT-PCR法鉴定后,对转基因植株和野... 根据灰岩皱叶报春PF sHSP 17-1热激蛋白基因序列,采用PCR法从差减文库中克隆得到该基因,并构建pCAMBIA1301-PF sHSP 17-1植物表达载体,通过根癌农杆菌介导的花器浸染法转化拟南芥,经潮霉素筛选、PCR和RT-PCR法鉴定后,对转基因植株和野生型对照进行高温胁迫,分析其耐热性差异。结果显示,在40℃、42℃、44℃处理下,转基因拟南芥的相对电导率和丙二醛含量升高的幅度均显著低于野生型对照,而脯氨酸含量的积累明显高于对照,可溶性蛋白的含量在热胁迫下也比对照稳定,仅有轻微下降。试验证明,PF sHSP 17-1基因对植物的耐热性有重要作用。 展开更多
关键词 PF sHSP17-1基因 拟南芥 转基因 耐热 热激蛋白
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小麦MITE转座子对sHSP基因的表达调控研究 被引量:4
11
作者 李静婷 王健胜 杨风岭 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第12期29-32,共4页
MITE(miniature inverted-repeat transposable elements)是一类特殊的DNA介导的转座子,经常插入基因的编码区、内含子、启动子、非翻译区(UTR)而与基因紧密相关。探讨插入小麦16.9 ku sHSP基因(sHSP16.9)3'-UTR中MITE对基因表达调... MITE(miniature inverted-repeat transposable elements)是一类特殊的DNA介导的转座子,经常插入基因的编码区、内含子、启动子、非翻译区(UTR)而与基因紧密相关。探讨插入小麦16.9 ku sHSP基因(sHSP16.9)3'-UTR中MITE对基因表达调控的影响,实时定量结果显示:在高温、低温处理时,具有MITE插入的基因型中sHSP16.9基因转录水平较无MITE插入的基因型显著提高;构建2种不同的植物表达载体p CAMBIA Super-1300+sHSP16.9、p CAMBIA Super-1300+sHSP16.9+MITE转化拟南芥,半定量结果显示,sHSP16.9+MITE超表达的转基因拟南芥中sHSP16.9基因表达量较sHSP16.9超表达的转基因拟南芥中显著提高,推测sHSP16.9基因3'-UTR中MITE插入增强该基因的转录水平。 展开更多
关键词 MITE转座子 sHSP基因 基因表达 基因调控 小麦 植物双元表达载体 构建
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Ca^(2+)/CaM参与了sHSP26增强玉米叶绿体耐干旱高温复合胁迫 被引量:3
12
作者 赵玉龙 李娜娜 +1 位作者 赵飞云 胡秀丽 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期447-452,共6页
以玉米(Zea mays L.)品种郑单958为试验材料,利用免疫印迹等技术,确定干旱高温复合胁迫条件下,Ca^(2+)/CaM对sHSP26的表达、叶绿体抗氧化防护酶活性的影响。结果显示:(1)高温、高温干旱复合胁迫下sHSP26的表达量明显高于对照和干旱,经Ca... 以玉米(Zea mays L.)品种郑单958为试验材料,利用免疫印迹等技术,确定干旱高温复合胁迫条件下,Ca^(2+)/CaM对sHSP26的表达、叶绿体抗氧化防护酶活性的影响。结果显示:(1)高温、高温干旱复合胁迫下sHSP26的表达量明显高于对照和干旱,经CaCl_2预处理后能显著增强sHSP26的表达;(2)经CaCl_2预处理后,叶绿体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性显著增加,而经Ca^(2+)螯合剂EGTA及CaM抑制剂TFP和W7处理后,这些抗氧化防护酶活性显著下降。本研究表明,在干旱高温复合胁迫条件下适宜浓度的Ca^(2+)能够增强sHSP26的表达及提高叶绿体抗氧化防护酶活性,从而对叶绿体起到保护作用,提高植物耐热性。 展开更多
关键词 干旱高温胁迫 免疫印记 sHSP26 叶绿体抗氧化防护酶
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热预处理诱导京秀葡萄果实低温耐性与小分子热激蛋白sHsp17.6合成的关系 被引量:5
13
作者 张俊环 黄卫东 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第2期1-5,共5页
以京秀葡萄果实为试材,研究了38℃/10 h热预处理诱导葡萄果实对-2℃低温产生适应性反应过程中小分子热激蛋白sHsp17.6的合成变化。结果表明,热预处理明显减缓了低温引起的电解质渗漏率的增加,同时在转录和翻译两种水平上增强了sHsp17... 以京秀葡萄果实为试材,研究了38℃/10 h热预处理诱导葡萄果实对-2℃低温产生适应性反应过程中小分子热激蛋白sHsp17.6的合成变化。结果表明,热预处理明显减缓了低温引起的电解质渗漏率的增加,同时在转录和翻译两种水平上增强了sHsp17.6的表达。因此认为,sHsp17.6参与了热预处理所诱导的葡萄果实的低温耐性。 展开更多
关键词 葡萄 热预处理 低温耐性 sHsp17.6
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线虫中的小分子热休克蛋白HSP12.1具有类分子伴侣活性 被引量:3
14
作者 秦焱 王慧 昌增益 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期620-624,共5页
很多种类的小分子热休克蛋白(small heat shock protein,sHSP)都能在胁迫条件下抑制蛋白质的聚集,显示出了类分子伴侣活性,这种活性是ATP非依赖型的.从已经进行的实验发现,线虫C.elegans中最小的小分子热休克蛋白家族成员HSP12.1具有类... 很多种类的小分子热休克蛋白(small heat shock protein,sHSP)都能在胁迫条件下抑制蛋白质的聚集,显示出了类分子伴侣活性,这种活性是ATP非依赖型的.从已经进行的实验发现,线虫C.elegans中最小的小分子热休克蛋白家族成员HSP12.1具有类分子伴侣活性,以胰岛素、乙醇脱氢酶和溶菌酶做底物发现HSP12.1能够一定程度地抑制底物的热聚集,虽然这种活性较一些经典的分子伴侣蛋白(线虫中的HSP16.1)要低.与此不同,另外3种和其分子质量相近的sHSP12s(HSP12.2、HSP12.3和HSP12.6)却没有检测出这样的类分子伴侣活性,虽然它们在一级结构上有很高的相似性.另外,在大肠杆菌中表达HSP12.1蛋白能够提高细菌在高温环境下的生存率,45℃处理后的生存率比未表达HSP12.1的菌高4倍左右,不过在线虫中是否发挥同样的功能还不是很清楚.从研究结果来看,C端“尾巴”结构域对sHSP发挥类分子伴侣活性不是必要的,在HSP12.1中没有C端“尾巴”结构域也有类分子伴侣活性就证明了这一点.N端结构域可能在发挥类分子伴侣活性中发挥比较重要的作用,当然α-crystallin结构域也可能参与到发挥这样的功能当中. 展开更多
关键词 线虫 小分子热休克蛋白(sHSP) 类分子伴侣活性
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低温锻炼诱导葡萄幼苗的耐热性过程中sHSP17.6在叶片中的亚细胞定位 被引量:4
15
作者 张俊环 黄卫东 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期8-11,共4页
为了探讨热激蛋白在低温锻炼诱导的耐热性形成过程中的保护功能,进一步分析葡萄幼苗对温度逆境产生交叉适应性的细胞学机制,试验以葡萄(Vitis vinifera L. cv. Jingxiu)幼苗为试材,采用胶体金免疫电镜定位技术,定位观察了小分子热激蛋白... 为了探讨热激蛋白在低温锻炼诱导的耐热性形成过程中的保护功能,进一步分析葡萄幼苗对温度逆境产生交叉适应性的细胞学机制,试验以葡萄(Vitis vinifera L. cv. Jingxiu)幼苗为试材,采用胶体金免疫电镜定位技术,定位观察了小分子热激蛋白17.6(sHSP17.6)在葡萄叶片中的亚细胞分布情况,结果表明,低温锻炼预处理可增强其在高温胁迫条件下的表达水平,细胞核和叶绿体中代表sHSP17.6的免疫金颗粒密度比相应的对照细胞明显增多,尤其是胁迫处理3 h时。这一结果为sHSP17.6参与低温锻炼诱导的耐热性提供了更直观的细胞学证据。 展开更多
关键词 葡萄幼苗 低温锻炼 sHSP17.6 胶体金免疫电镜定位
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水稻二化螟小分子量热激蛋白21.3基因的克隆和表达分析
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作者 宋杰 于同英 +2 位作者 崔亚东 陆明星 杜予州 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期505-513,共9页
小分子量热激蛋白(sHSPs,small heat shock proteins)在昆虫中分布广泛,能影响昆虫的生长繁殖、参与多种生理过程以及增强昆虫的温度耐受性。水稻二化螟Chilo suppressalis(Walker)是水稻上的主要害虫之一,目前在我国局部稻区危害严重... 小分子量热激蛋白(sHSPs,small heat shock proteins)在昆虫中分布广泛,能影响昆虫的生长繁殖、参与多种生理过程以及增强昆虫的温度耐受性。水稻二化螟Chilo suppressalis(Walker)是水稻上的主要害虫之一,目前在我国局部稻区危害严重。为了深入了解sHSPs在水稻二化螟生长发育及温度耐受性中的功能,利用RT-PCR和RACE技术克隆出一个二化螟小分子量热激蛋白Cs HSP21.3基因。Cshsp21.3的cDNA序列全长为844 bp,其中开放阅读框(ORF)为555 bp,编码184个氨基酸,理论分子量为21.3 kDa,等电点为5.97;基因组结构分析发现,Cshsp21.3缺失内含子。实时定量PCR的实验结果表明:在脂肪体中Cshsp21.3的表达高于其它不同组织器官;在二化螟的不同发育阶段,3龄幼虫Cshsp21.3的表达水平最高,而且雌雄蛹的表达差异显著;高低温不能显著诱导Cshsp21.3的表达,说明该基因对温度胁迫不敏感。总之,Cshsp21.3与二化螟的温度耐受性之间没有密切的联系,但在二化螟的生长发育方面起着重要的作用。 展开更多
关键词 shsps 二化螟 组织器官 发育阶段 温度 表达
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报春PF sHSP21.4基因转化拟南芥的获得及耐热鉴定 被引量:1
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作者 张路 胡伟娟 +1 位作者 张启翔 高亦珂 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第5期635-641,共7页
根据灰岩皱叶报春PF sHSP21.4热激蛋白基因序列,采用PCR法从差减文库中克隆得到该基因并构建pCAMBIA1301-PF sHSP21.4植物表达载体,通过根癌农杆菌介导的花器浸染法转化拟南芥,经潮霉素筛选、PCR和RT-PCR法鉴定后,对转基因植株和野生型... 根据灰岩皱叶报春PF sHSP21.4热激蛋白基因序列,采用PCR法从差减文库中克隆得到该基因并构建pCAMBIA1301-PF sHSP21.4植物表达载体,通过根癌农杆菌介导的花器浸染法转化拟南芥,经潮霉素筛选、PCR和RT-PCR法鉴定后,对转基因植株和野生型对照进行高温胁迫,分析其耐热性差异。结果显示:在43℃或44℃处理下,转基因拟南芥幼苗的存活率明显高于野生型拟南芥,且高温处理后转基因植株叶片的相对电导率升高的幅度显著低于野生型对照,Fv/Fm值比野生型拟南芥下降幅度较小,可溶性蛋白的含量在热胁迫下有轻微上升,而野生型拟南芥的可溶性蛋白含量则随胁迫的加剧而显著降低。实验证明,PF sHSP21.4基因对植物的耐热性有重要作用。 展开更多
关键词 PF sHSP21.4基因 拟南芥 热激蛋白
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Molecular cloning and expression patterns of two small heat shock proteins from Chilo suppressalis(Walker) 被引量:1
18
作者 SONG Jie LU Ming-xing DU Yu-zhou 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第6期1522-1529,共8页
Small heat shock protei ns(sHSPs)are a very complex protei n superfamily that increase in sect temperature tolera nee.In order to deeply understand the function and role of sHSPs in Chilo suppressalis(Walker),this stu... Small heat shock protei ns(sHSPs)are a very complex protei n superfamily that increase in sect temperature tolera nee.In order to deeply understand the function and role of sHSPs in Chilo suppressalis(Walker),this study isolated and identified two CsHSP genes lacking introns from C.suppressalis,Cshsp23.9 and Cshsp27.3.The cDNA full-length of Cshsp23.9 and Cshsp27.3 were 909 and 1036 bp encoding 220 and 242 amino acids,respectively.Alignment with homologs and phylogenetic analysis indicated Cshsp23.9 and Cshsp27.3 were two new types of Cshsps in C.suppressalis.Real-time quantitative PCR(qPCR)revealed that Cshsp23.9 had the highest relative expression in hindgut compared with other tissues(head,epidermis,foregut,midgut,fat body,Malpighian tubules,and hemocytes),while Cs/?sp27.3 expressed the highest in fat body con tent.Whe n exposed to thermal stress from-11 to 43°C for 2 h,two genes showed differe nt expression patterns.Cshsp23.9 did not respond to low temperature,but could be up-regulated by high temperature and the highest expression temperature was at 36°C.Cshsp27.3 could only be induced by mild temperature,with the highest expression at 15 and 30°C.In conclusion,Cshsp23.9 and Cshsp27.3 existed in different tissues/organs of C.suppressalis,and played different important roles in C.suppressalis to resist temperature stress and regulate physiological activities. 展开更多
关键词 shsps CHILO SUPPRESSALIS expression TISSUES temperature
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家蚕hsp24.3基因的克隆及功能研究
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作者 刘彬斌 柴春利 +2 位作者 王先燕 黄飞飞 鲁成 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期4201-4208,共8页
【目的】对家蚕hsp24.3基因(Bmhsp24.3)的功能进行研究,为选育抗逆境家蚕品种提供基础材料和理论依据。【方法】在对家蚕基因组进行生物信息学分析的基础上,对家蚕低分子量热激蛋白基因Bmhsp24.3进行克隆,然后利用家蚕的芯片数据对Bmhsp... 【目的】对家蚕hsp24.3基因(Bmhsp24.3)的功能进行研究,为选育抗逆境家蚕品种提供基础材料和理论依据。【方法】在对家蚕基因组进行生物信息学分析的基础上,对家蚕低分子量热激蛋白基因Bmhsp24.3进行克隆,然后利用家蚕的芯片数据对Bmhsp24.3基因在5龄第3天幼虫不同组织中的表达模式进行分析,并利用半定量RT-PCR技术,分别对Bmhsp24.3基因在正常情况下和热刺激条件下家蚕5龄幼虫不同发育时期(1~6 d)后部丝腺中的表达状况以及10个不同家蚕品种5龄第3天幼虫丝腺中的表达情况进行了检测;最后将Bmhsp24.3基因进行原核表达,获得重组蛋白rBmHSP24.3,并进一步对该重组蛋白的功能进行了体外验证。【结果】Bmhsp24.3基因的编码区(CDS)长度为633 bp,编码210个氨基酸,为单外显子基因;RT-PCR检测发现该基因在家蚕的体壁、脂肪体以及丝腺组织中有较高水平表达,在其它组织中的表达不明显;同对照相比,不同家蚕品种以及不同发育时期的5龄幼虫在热刺激后,其后部丝腺中的Bmhsp24.3基因的表达显著升高。经Native-PAGE和SDS-PAGE分析表明,在高温条件下,表达获得的重组蛋白rBmHSP24.3能与硫氰酸酶形成稳定的复合物,使底物蛋白免受热刺激胁迫而变性,从而起着分子伴侣的作用。【结论】重组蛋白rBmHSP24.3在体外具有分子伴侣的功能,推测该蛋白在家蚕体内同样具有分子伴侣的功能,在家蚕的抗逆境适应过程中起重要作用。 展开更多
关键词 家蚕 低分子量热激蛋白(sHSP) 分子伴侣
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Expression analysis of two reverse duplicated small heat shock protein genes in rice(Oryza sativa L.) 被引量:1
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作者 GUO Hong-xia ZENG Wen-zhi +8 位作者 WANG Chuang-yun FENG Jing-lei TANG Hui-wu BAI Mei LIU Yao-guang ZHAO Li WANG Lu-jun FAN Tao GUO Jing-xin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第8期1685-1692,共8页
supported by grants from the National Natural Science Foundation of China (30671178);the Shanxi Province Science Foundation for Youths, China (2014021029-2)
关键词 small heat shock proteins(shsps expression characteristics semi-quantitative RT-PCR GUS staining rice
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