sIL-16在大肠杆菌中的表达及活性分析

用PCR法扩增本室保存的sIL 16cDNA片段,插入含T7启动子的表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET sIL16,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温经IPTG诱导蛋白表达,过Ni2+螯和层析柱一步纯化表达蛋白,重组蛋白与Jurkat细胞共同孵育后,观察它对细胞表面IL 2R表达的影响,结果发现IPTG诱导蛋白表达后,经SDS PAGE电泳,可以看到在18kD左右出现明显蛋白表达条带,表达量占菌体可溶蛋白的40%左右,纯化蛋白的纯度达90%以上,经重组蛋白处理过的Jurkat细胞表面IL 2R的表达水平比未经它处理的细胞增高了18.54%.

宫颈癌前病变中HPV16/18与p16的关系

目的研究宫颈癌的各个阶段中人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)和抑癌基因p16的表达,探讨HPV致癌的机理。方法利用免疫组织化学技术检测20例正常宫颈组织、30例宫颈低度鳞状上皮内病变(LSIL)、30例宫颈高度鳞状上皮内病变(HSIL)和20例宫颈鳞状细胞癌中PHV16/18和p16的表达水平。结果正常宫颈组织没有HPV16/18和p16的表达;LSIL、HSIL和宫颈鳞状细胞癌中HPV16/18的阳性率分别为16.7%(5/20)、53.3%(16/30)和75%(15/20);p16的阳性率分别为36.7%(11/30)、73.3%(22/30)和100%(20/20)。HPV16/18和p16在HSIL的表达均明显高于LSIL。16例HPV16/18阳性的HSIL中14例发现p16的高表达。结论宫颈癌前病变存在p16的过度表达;HPV16/18阳性的宫颈癌及HSIL常伴随p16蛋白的高表达,提示HPV16/18有可能引起自然抑癌基因p16突变,而导致细胞癌变。