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转sMTPGH基因小鼠胚胎的体外培养 被引量:1
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作者 孙燕 孙新明 +1 位作者 侯蓉 张家骅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期387-389,共3页
采用纯化的羊金属硫蛋白 (s MT)启动子指导的猪生长激素 (PGH )基因 (s MTPGH)为显微注射片段 ,将其导入小鼠受精卵原核 ,比较了几种不同培养液对导入外源基因的小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明 ,改进的 M16培养液(用 m M16表示 )能... 采用纯化的羊金属硫蛋白 (s MT)启动子指导的猪生长激素 (PGH )基因 (s MTPGH)为显微注射片段 ,将其导入小鼠受精卵原核 ,比较了几种不同培养液对导入外源基因的小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明 ,改进的 M16培养液(用 m M16表示 )能有效克服 2 -细胞阻断现象 ,并使转基因胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段。在 m M16培养液的基础上 ,再加入表皮生长因子 (EGF) ,可使 1-细胞胚胎发育到囊胚的比率进一步提高。在 3种培养液 (M16、m M16、m M16 +EGF)中 ,转基因胚胎突破 2 -细胞阻断期的比率分别为 12 %、6 8%、90 % ,发育到囊胚期的比率分别是 0 %、2 0 %、4 3%。采用 PCR方法检测 5 7枚经体外培养发育至囊胚的显微注射胚胎 ,4枚扩增出阳性条带 ,外源基因在囊胚期胚胎的滞留率为 7%。 展开更多
关键词 smtpgh 显微注射 胚胎 体外培养 2-细胞阻断 PCR 转基因小鼠
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早期转基因兔胚的培养及外源基因滞留的研究 被引量:1
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作者 陈清轩 刘雷 +2 位作者 宋德秀 范必勤 王斌 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期277-282,共6页
用显微注射法导入外源SMTPGH基因的早期兔胚进行体外培养,并用PCR技术对单个胚中的外源基因进行了检测,以探讨SMTPGH基因在早期兔胚中的滞留情况。研究结果表明早期转基因兔胚在Tc199+10%FCS培养液中有75%发育到囊胚期;其外源基因在8... 用显微注射法导入外源SMTPGH基因的早期兔胚进行体外培养,并用PCR技术对单个胚中的外源基因进行了检测,以探讨SMTPGH基因在早期兔胚中的滞留情况。研究结果表明早期转基因兔胚在Tc199+10%FCS培养液中有75%发育到囊胚期;其外源基因在8细胞期前没有丢失,随后有逐渐丢失的现象。到胚胎的发育后期,其外源基因的滞留率接近于整合率。 展开更多
关键词 转基因胚 smtpgh基因 体外培养
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In vitro Culture of Early Rabbit Embryos Injected with Foreign Gene and Its Retention
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作者 陈请轩 刘雷 +1 位作者 邓辉南 宋德秀 《Developmental and Reproductive Biology》 1993年第2期62-68,T001,共8页
Fertilized rabbit eggs injected with SMTPGH gene were cultured in vitro and retention of theinjected gene was studied using PCR technique and nonradioactive labelling methed. In a mediumof TC199 + 10% FCS, three quart... Fertilized rabbit eggs injected with SMTPGH gene were cultured in vitro and retention of theinjected gene was studied using PCR technique and nonradioactive labelling methed. In a mediumof TC199 + 10% FCS, three quarters of the fertilized eggs developed to the blastocyst stage. Noapparent change of the injected gene was found before the 8-cell stage, after which it was eitherintegrated into the chromosome of the host or lost gradually. But finally, the retention rate of theinjected gene should be equal to its integration rate. 展开更多
关键词 早期胚胎 兔胚 外源基因注入 体外培养 转基因动物
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