sRAGE与重症肺炎患者病情程度、应激性高血糖的关系

目的探讨血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)水平与重症肺炎患者病情严重程度和应激性高血糖发生的关系。方法选取2016年6月—2019年5月在马鞍山市人民医院重症医学科住院治疗的成人非糖尿病重症肺炎患者100例、普通肺炎患者100例,以及同期该院健康体检者100例。检测血清sRAGE、晚期糖基化终末产物(AGEs)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。检测重症肺炎患者空腹血糖,并分为合并应激性高血糖(空腹血糖≥7.0 mmol/L)(合并组)和未合并应激性高血糖患者(空腹血糖<7.0 mmol/L)(未合并组)。比较两组患者血清sRAGE水平,采用多元线性回归对sRAGE的影响因素进行分析。结果重症肺炎患者血清sRAGE水平高于健康对照和普通肺炎患者(P<0.05)。合并组血清sRAGE水平高于未合并组(P<0.05)。APACHEⅡ评分[OR=2.295(95%CI:1.877,3.241)]、MODS评分[OR=3.315(95%CI:2.186,5.673)]、sRAGE[OR=1.271(95%CI:1.026,1.573)]、AGEs[OR=1.328(95%CI:1.105,1.792)]是重症肺炎患者发生应激性高血糖的独立影响因素(P<0.05)。结论血清sRAGE在重症肺炎患者尤其是发生应激性高血糖的重症肺炎患者中的表达水平明显升高,sRAGE不仅可反映肺炎患者的疾病严重程度,而且参与应激性高血糖的发生过程。

hsRAGE-IgG Fc融合蛋白的表达及其生物学活性

将编码人可溶性晚期糖基化终产物受体-免疫球蛋白G Fc段(hsRAGE-IgG Fc)融合蛋白的DNA片段克隆到大肠杆菌表达载体pET-20b中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)并表达。SDS-PAGE分析表明其表达形式为包涵体,相对分子质量约为66kDa,表达量占菌体总蛋白的38.4%。经复性后,获得纯度为96.6%的融合蛋白,得率约为29.5mg/L。经Western印迹法鉴定,该融合蛋白可与sRAGE抗体产生阳性反应。同时,hsRAGE-IgG Fc融合蛋白可以显著抑制晚期糖基化终产物(AGE)引起的ECV-304细胞NF-κB p65表达的上调,其活性与hsRAGE相似。