肺癌手术前后血清STNFRI变化的临床意义

目的 研究肺癌患者手术前后血清STNFRI的变化。方法 采用ELISA方法测定了80例肺癌患者 ,14例非肿瘤患者 ,61例志愿健康成年人。结果 肺癌患者中STNFRI的平均水平明显高于健康对照组和非肿瘤组 (P<0.01)。按肿瘤TNM分期 ,肺癌Ⅲ～Ⅳ期患者远高于Ⅰ～Ⅱ期升高幅度 ,与疾病分期明显相关 ,而与病理类型无关 (P<0.01)。结论 排除自身免疫疾病和感染 ,STNFRI的测定对肿瘤的诊断 ,筛选 ,预后有辅助意义。也可了解病人的异常免疫状态 ,为肿瘤患者的免疫治疗提供依据及观察指标。

嵌合蛋白sTNFRⅡ-IgG Fc纯化与生物学活性研究

目的 建立嵌合蛋白sTNFR IgGFc的纯化工艺 ,并对该蛋白的理化和生物活性进行研究。方法 嵌合蛋白sTNFRⅡ IgGFc经变性、复性后 ,用金属螯合层析进行纯化 ,纯化的蛋白进行配基结合实验和拮抗TNF活性检测。结果 该嵌合蛋白的纯度大于 95 % ,在体外能够二聚化 ,保留了sTNFRⅡ对hTNFα的结合特性 ,同单体sTNFRⅡ相比 ,对hTNFα的拮抗活性明显提高。

急性胰腺炎患者外周血IL-6和sTNFR的变化及其临床意义

目的 探讨炎性细胞因子IL 6、TNFα和其拮抗因子sTNFR水平的变化及其在急性胰腺炎 (AP)发生、发展和转归中的作用。方法 采用ELISA双抗体夹心法检测了轻、重 2组共 41例AP患者发病后第 1、5、14天外周血IL 6和可溶性肿瘤坏死因子受体 (sTNFR)水平的变化。结果 轻症组 2 2例患者在发病第 5天后逐渐恢复 ,重症组 19例中12例在发病后 5～ 7天病情渐趋好转。两组患者在发病后第 1、5、14天的sTNFR均明显升高 (P <0 .0 0 1) ,且重症组明显高于轻症组 (P <0 .0 1) ,但随着病情好转有逐渐下降趋势。IL 6重症组第 1天时显著性升高 (40 .38pg/ml,对照组为12 .41pg/ml,二者比较 ,P <0 .0 0 1) ,然后逐渐下降至正常。上述两指标均在发病第 1天达峰值 ,然后逐渐下降 ,与AP严重程度呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 血清IL 6。

慢性腹透病人sIL─2R和STNFR1增高的临床研究

测定了８０例慢性腹透患者（ＰＤ）及６２例血透患者（ＨＤ）的ｓＩＬ－２Ｒ、ＳＴＮＦＲ１，结果表明：①ＰＤ者淋巴细胞活化较ＨＤ者稳定；②透析患者ｓＩＬ－２Ｒ增高不能单用清除减少来解释，可能还存在免疫调节；③高龄者免疫功能（ｓＩＬ－２Ｒ）降低与ＡＬＢ降低有关。认为ｓＩＬ－２Ｒ、ＳＴＮＦＲ１增高可降低宿主炎症反应。

乙型肝炎患者血清sTNFR、IL-6、IL-8检测及其临床意义

目的 :探讨乙型肝炎 (乙肝 )患者血清白细胞介素 6 (IL 6 )、IL 8、可溶性肿瘤坏死因子受体 (sTNFR)水平与病情发展的关系。方法 :用ELISA法分别检测 80例慢性活动性肝炎、2 0例重型肝炎患者的IL 6、IL 8、sTNFR水平。结果 :慢性活动性肝炎及重型肝炎组血清IL 6、IL 8、sTNFR水平均高于健康对照组 (P <0 .0 1) ,而慢性活动性肝炎除IL 6外 (P >0 .0 5 ) ,其余各指标均低于重型肝炎组 (P <0 .0 1)。结论 :测定乙肝患者血清IL 6、IL 8、sTNFR水平对判断预后。

肺结核病患儿血清IL-2、TNF-α和STNFR检测的临床意义

本文对我院明确诊断的62例肺结核患儿进行了血清IL-2、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和可溶性肿瘤坏死因子-α受体（STNFR）测定,旨在了解IL-2、TNF-α和STNFR水平在活动性和非活动性儿童肺结核病的含量变化及临床意义,现将结果报告如下。

sTNFRⅡ和VIP融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测

可溶性肿瘤坏死因子受体II(sTNFRII)和血管活性肠肽(VIP)对类风湿性关节炎(RA)均有治疗作用,但两者的作用机制不同。制备两者融合蛋白,可能具有更好的防治类风湿关节炎的作用。用含有VIP基因序列的上游引物和sTNFRII的下游引物,用PCR扩增出由连接序列将VIP和sTNFRII基因连接的片段,再亚克隆到原核表达载体pET32a,在大肠杆菌DH5α内诱导表达。表达的产物经离子交换、疏水层析纯化,并用体外中和试验检测其抑制TNF细胞毒及肝细胞膜特异性脂蛋白(Lsp)诱导的细胞毒生物活性。结果显示构建的pET32aVIPsTNFRII表达载体在大肠杆菌DH5α内以包涵体形式表达,疏水层析结合离子交换层析纯化后,融合蛋白具有较好的抑制炎症分子诱导的炎症反应生物活性,为将来应用打下基础。

多囊卵巢综合征患者血浆TNFα、sTNFR2水平与胰岛素抵抗的相关性

【目的】 探讨血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)?可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFR2)与多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗和血清雄激素(T)水平的相互关系?【方法】 PCOS患者和对照者根据体重指数(BMI)分为PCOS肥胖组(21例)?PCOS非肥胖组(25例)? 肥胖对照组和非肥胖对照组,各25例,采用ELISA法测定血浆TNFα ?sTNFR2水平,化学发光法测定血清性激素6项,已糖激酶终点法测定血清葡萄糖浓度,时间分辨免疫分析法测定血清胰岛素浓度,按Cederholm的方法计算胰岛素敏感指数(ISI)?【结果】 ①PCOS肥胖组血浆TNFα和sTNFR2水平及PCOS非肥胖组血浆sTNFR2水平均较非肥胖对照组明显升高,且以肥胖者升高更为明显?②血浆TNFα与其ISI在PCOS肥胖组和肥胖对照组均呈负相关(P< 0.05)?③血浆sTNFR2与其ISI在PCOS肥胖组?PCOS非肥胖组和肥胖对照组均呈负相关(P< 0.05)?【结论】 PCOS肥胖组血浆TNFα和sTNFR2水平及PCOS非肥胖组血浆sTNFR2水平均较非肥胖对照组明显升高,且与其ISI呈负相关,提示二者可能与PCOS患者发生胰岛素抵抗有关?

帕金森病患者血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平的检测及临床意义

目的检测帕金森病(PD)患者血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平,分析彼此的相关性,探讨其变化的原因及相关因素。方法采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法,对40例PD患者及性别、年龄匹配的30例正常对照组血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平进行检测。采用PD统一评分量表第3部分(UPDRS III)和改良Hoehn-Yahr分级对PD患者病情进行评估。并按照治疗状况对PD患者进行分组。结果 PD组血清sTNFR1水平显著高于对照组(P<0.01);PD组TNF-α和sTNFR1水平低度正相关(rs=0.40,P<0.05),sTNFR1和sTNFR2水平显著正相关(rs=0.55,P<0.01),对照组血清sTNFR1和sTNFR2水平中度正相关(rs=0.42,P<0.05);对PD组血清TNF-α、sTN-FR1、sTNFR2水平与年龄、病程及病情进行相关性分析,结果表明TNF-α水平与年龄、病程、UPDRS评分及Hoehn-Yahr分级均无相关性,sTNFR1和sTNFR2水平与病程、UPDRS评分及Hoehn-Yahr分级均无相关性,但sTNFR1水平与年龄显著正相关(rs=0.497,P<0.01),sTNFR2水平与年龄低度正相关(rs=0.353,P<0.05);PD组按治疗情况进行分组,各组间TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平均无显著性差异(均P>0.05)。结论 PD患者血清sTNFR1水平显著增高,且与年龄正相关,提示TNF-α介导的细胞内信号级联反应参与了PD的免疫炎性病理过程,老化是主要危险因素。同时检测两个sTNFRs水平对TNF-α的整体水平评估是必要的,它们是比TNF-α更可靠的标记物。

复发性口疮病灶TNF/sTNFR失衡在其致病机制中意义

目的 :为验证肿瘤坏死因子 (TNF)及其可溶性受体 (s TNFR)失衡导致复发性口疮发病的假说。方法 :采用双抗体夹心酶联免疫法检测组织标本中 TNFα、TNFβ及 s TNFR分泌水平 ,复发性口疮 (RAU)活动期患者 2 1例作为研究组 ,无 RAU病史的口腔粘膜外伤 2 3人作对照组。结果 :RAU病灶中 TNFα、TNFβ分泌水平明显高于对照组 ;RAU粘膜病灶的 s TNFR- 水平明显高于对照组 ,但 RAU病灶中口腔粘膜固有层单个核细胞分泌s TNFR- 并未升高。结论 :RAU患者的 TNFα分泌增多 ,但其粘膜固有层单个核细胞分泌 s TNFR- 的数量并未相应升高。RAU患者 TNF与 TNF天然抑制因子分泌失衡在其致病机制中占有重要意义。

肝癌患者血清sTNFR Ⅰ的临床意义

为评估可溶性肿瘤坏死因子受体（ｓＴＮＦＲ）在肝癌中的作用和临床意义，我们用ＥＬＩＳＡ方法检测了８３例肝癌患者和６１例健康人的血清ｓＴＮＦＲＩ水平变化。结果发现肝癌患者血清ｓＴＮＦＲＩ的平均水平明显高于健康对照组（２．６２±０．７９ｎｇ／ｍｌ对０．９３±０．２９ｎｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．００１）。升高幅度与疾病分期明显相关，即Ⅲ～Ⅳ期患者的水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者（２．９７±０．４３ｎｇ／ｍｌ对１．７４±０．４１ｎｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．００１）。同时我们发现ｓＴＮＦＲⅠ升高与血清碱性磷酸酶（ｒ＝０．５９）、白细胞计数（ｒ＝０．４３）、血清球蛋白（ｒ＝０．３２）成正相关，而与血清白蛋白（ｒ＝－０．７１）成负相关。在肝癌患者中，血清ｓＴＮＦＲⅠ升高率（８９．１６％）远大于血清ＡＦＰ阳性率（５４．２２％）。２５例化疗患者，ｓＴＮＦＲⅠ升高者显示缺乏临床效应，而降低者则有缓解（３．３９±０．４３ｎｇ／ｍｌ对２．６７±０．３４ｎｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．００１）。实验结果显示：肿瘤患者血清ｓＴＮＦＲⅠ水平与疾病的分期和对化疗的反应相关，它的测定对肿瘤的检测、随访和预后的评估有辅助诊断意义，表明ｓＴＮＦＲⅠ可作为宿主对肿瘤的生物学反应的标?

宫颈HPV感染患者血清STNFRs、TNF水平与临床关系的研究

目的:了解血清STNFRs、TNF在HPV感染和宫颈病变发展中的变化。方法:按照入选标准,选择宫颈癌50例(CA组),宫颈上皮内瘤变58例(CIN组),正常对照组34例(其中10例为外阴尖锐湿疣、宫颈检查尚未见异常)。取3组病例的宫颈上皮组织,用定量PCR法检测HPVl6、18型;采用双抗体夹心ELISA法检测血清中TNF-α、STNFRI和STNFRII。结果:HPV阳性时,CIN组和CA组的血清TNF高于HPV阴性时;对照组、CIN组和CA组的血清STNFRI、S'INFRII均高于HPV阴性时,差异有显著性。在CA组,血清STNFRI、STNFRII均高于对照组;在CIN组,HPV阳性时TNF高于对照组,HPV阴性时STNFKI、STNFRII高于对照组。结论:血清STNFRs在HPV感染及与之密切相关的宫颈上皮内瘤变、宫颈癌的发生发展中有一定的作用。

人sTNFR1基因的克隆、融合表达与生物学活性

采用RT-PCR,从Hela细胞的mRNA中扩增人sTNFR1基因,构建含有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆,转化入大肠杆菌,测序证实其序列与基因数据库中sTNFR1基因一致。经异丙基-β-D半乳糖苷酶(IPTG)诱导表达,淀粉树脂亲和层析法纯化,得到融合蛋白sTNFR1-MBP。结果显示:经Western-blotting检测,sTNFR1-MBP具有免疫活性;MTT检测目的蛋白可有效地封闭TNFα对QSG7701的细胞毒性作用;流式细胞术检测目的蛋白对TNF-α诱导QSG7701凋亡有抑制作用;sTNFR1-MBP具有良好的生物活性,为今后的研究打下了基础。

比较研究TPS、CEA、CYFRA21-1和STNFR四种肿瘤活性标志物在肺癌中的诊断价值

背景与目的近年来,肿瘤标志物的研究不断取得新的进展。其中,组织多肽特异性抗原(TPS)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和可溶性肿瘤坏死因子受体(STNFR)是近几年逐步应用于临床的新的肿瘤标志物。本研究旨在比较四种肿瘤标志物TPS、癌胚抗原(CEA)、CYFRA21-1和STNFR对肺癌的临床诊断价值。方法用ELISA法对72例肺癌患者的血清TPS、CEA、CYFRA21-1和STNFR水平进行检测,并与54例肺部良性疾病患者及32例正常健康人比较。结果四种肿瘤标志物在肺癌组的水平均明显高于良性疾病组(P<0.005)和正常对照组(P<0.001)。在对肺癌的诊断中,相对而言,STNFR的敏感性(81.9%)最高,CYFRA21-1的特异性(91.5%)最高,TPS的诊断符合率(83.5%)最高。结论TPS、CYFRA21-1和STNFR均是用于肺癌诊断的较好的肿瘤标志物,优于传统标志物CEA,其中又以CYFRA21-1的综合临床应用价值最好。

大鼠多器官功能障碍综合征时sTNFR的变化及其意义

目的 :研究大鼠多器官功能障碍综合征 (MODS)时可溶性肿瘤坏死因子受体 (s TNFR)的变化及其意义。方法 :采用创伤 +感染 2次打击 ,复制了“双相迟发”的 MODS大鼠模型 ;应用 EL ISA方法 ,检测血清中 s TNFR浓度的变化。结果 :实验模型组 (A组 ) MODS后血清 s TNFR 的浓度为 (438.0 6± 6 7.0 6 ) pg/ m l,较正常水平 [(112 .15± 2 4 .95 ) pg/ ml]显著增高 (P<0 .0 1)。仅受感染或创伤 1次打击的两对照组 (B组和 C组 )处死前 s TNFR 改变不明显。 A组中功能障碍器官数 =2或 >2的大鼠 s TNFR 分别为 (35 8.6 3± 17.0 8) pg/ ml和 (474 .18± 4 7.2 5 ) pg/ ml(P <0 .0 1) ,且与 AL T升高呈正相关 (r=0 .95 0 0 )。3组动物 s TNFR 变化均不甚明显。 结论 :大鼠 MODS时 s TNFR 升高明显 ,且与多器官功能障碍程度呈正相关。提示监测血 s TNFR 可预测 MODS的发生 ,外源性 s TNFR治疗 MODS可能有一定的应用前景。

早产患者血清TNF-α和sTNFRⅡ水平的变化及意义

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)、肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)与早产发病的关系。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测46例早产患者(根据胎盘病检有无绒毛膜羊膜炎分为早产感染组21例和早产非感染组25例)及同期足月正常产20例母血清TNF-α、sTNFRⅡ的水平。结果:早产感染组孕妇血清中TNF-α、sTNFRⅡ水平明显高于早产非感染组和正常足月产组,差异均有显著性(P<0.05)。结论:TNF-α、sTNFRⅡ水平升高对感染性早产有提示作用,有望成为早期预测、诊断早产和宫内感染并判断其预后的指标。

益气泄浊法对慢性肾功能不全患者TNF-α及其sTNFR水平影响研究

目的 :研究益气泄浊法对慢性肾功能不全患者 (CRF)血清肿瘤坏死因子 (TNF α)及其可溶性受体 (sTNFRⅠ、Ⅱ )含量的影响 ,进一步探讨益气泄浊法治疗慢性肾功能不全有效的作用机制。方法 :采用ELISA法检测 2 8例CRF患者服用益气泄浊中药前后血清TNF α及其sTNFRⅠ、Ⅱ含量 ,并与 2 2例服用尿毒清冲剂的CRF患者及 2 0名健康人作对照。结果 :(1 )CRF患者血清TNF α及其sTNFRⅠ、Ⅱ含量明显高于健康组 ,与肌酐 (SCr)、尿素氮 (BUN)、胆固醇 (TC)、甘油三脂 (TG)、尿蛋白定量、血色素(Hb)、血清白蛋白 (ALB)、高密度脂蛋白 (HDL)呈正相关。 (2 )两个疗程后两组CRF患者血清TNF α及其sTNFRⅠ、Ⅱ含量及其它各项指标均降低 ,但治疗组降低更明显 ,与对照组比较差异显著 (P <0 0 5)。结论 :CRF患者血清TNF α及其sTNFRⅠ、Ⅱ含量与病情程度密切相关 ,病情越重 ,其含量越高 ,益气泄浊中药有降低CRF患者血清中增高的TNF α及其sTNFRⅠ、Ⅱ含量的作用 ,并可改善其它各项相关指标 ,减轻CRF患者的肾功能损害 。

重组人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(sTNFRⅡ)的纯化

目的 从大肠杆菌破碎液中纯化可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ,获得能够中和TNF活性的受体蛋白。方法 菌体破碎液经热沉淀处理后,用金属鳌合层析柱纯化重组蛋白。并对蛋白的理化特性和生物学活性进行分析。结果 纯化的重组蛋白纯度大于95％,并且能中和TNF的生物学活性,抑制其对细胞的杀伤作用。结论该工艺能简便有效地纯化出TNF受体蛋白,为进一步深入研究奠定了基础。

转sTNFR基因处理对供心缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNFR）基因直接体外灌注转染供者器官的效果,利用小鼠异位心脏移植模型探讨sTNFR基因转染对供心缺血/再灌注损伤的保护机制。方法实验分3组,每组C57/BL6（H-2Kb）供体鼠和BalB/c（H-2Kd）受体鼠各10只,在0-4℃溶液中对3组C57/BL6（H-2Kb）小鼠的供心分别经主动脉缓慢灌注含编码小鼠sTNFR-p55基因的复制缺陷重组腺病毒载体（Adm sTNFR组）、复制缺陷重组腺病毒载体AdHCVsp1LacZ（AdmLacZ组）的PBS和单纯PBS（对照组）,灌注1 h后,将供心移植给BalB/c（H-2Kd）受体鼠。检测各组移植受体鼠外周血血清sTNFR的表达水平和移植物浸润细胞（G IC）的数量,并分析Adm-sTNFR基因修饰后G IC的同种反应活性（MLR）。结果以2×10^12pfu/L的滴度转染移植心脏后,12 h即可在Adm sTNFR组小鼠的血清中检测到高水平的sTNFR-p55表达,24 h达到分泌高峰,为（59.5±6.5）μg/L;而AdmLacZ组24 h的sTNFR-p55水平为（1.5±0.56）μg/L（P〈0.05）,对照组更低;术后14天,Adm sTNFR组仍持续表达有效高水平的sTNFR-p55〔（20.1±3.7）μg/L〕。Adm sTNFR组移植心脏的G IC数目为（0.5±0.12）×10^6/孔,明显低于对照组和AdmLacZ组的（5.0±2.2）×10^6/孔（P〈0.05）,其比例为1∶10-1∶20。将不同组的G IC与γ射线（20 Gy）灭活的供体鼠来源的T细胞作72 h MLR,Adm sTNFR组的G IC增殖受到了明显的抑制,AdmLacZ组和对照组的G IC则显示较强的对同种刺激的增殖活性。结论在低温（0-4℃）的条件下可以将编码sTNFR基因的腺病毒成功地转入移植心脏,通过基因表达可长时间维持有效的sTNFR-p55的局部浓度,减轻了受体鼠移植器官内的炎性细胞浸润,并抑制移植器官内浸润细胞的同种反应活性。

血浆sFas和sTNFRⅠ在急性白血病中的临床意义

目的探过急性白血病(AL)患者血浆可溶性Fas(sFas)及可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ(sTNFRⅠ)水平及其临床意义。方法采用双抗体夹心ELISA法对60例初治AL患者血浆sFas和sTNFRⅠ进行测定,另设10名健康献血员为对照。结果初治AL的sFas和sTNFRⅠ均明显高于正常对照(P<0.01);治疗缓解后,sFas水平显著低于治疗前(P<0.01);血浆(TNFⅠ)水平与急性粒细胞性白血病(ANLL)亚型、反映肿瘤负荷的指标、临床预后、染色体核型相关。结论血浆sFas和sTNFRⅠ可作为白血病发生、转归和预后的指标。