人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ与人IgG∶Fc的融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

采用ＰＣＲ方法引入编码氨基酸残基序列为ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ的接头，将ｓＴＮＦＲ１ｃＤＮＡ与人ＩｇＧ：ＦｃｃＤＮＡ片段连接，构成融合基因ｆｕｓｉｏｎ１。将ｆｕｓｉｏｎ１克隆在ｐＢＳⅡＳＫ＋载体上。测定序列后，转入ｐＲＳＥＴＢ表达载体，在大肠杆菌中表达，得到分子量为４５ｋＤａ的蛋白，超声破碎后电泳证明表达的蛋白为包涵体，经免疫蛋白印迹证实为我们构建的融合蛋白。