胃癌及癌前病变患者幽门螺杆菌的sabA基因多态性的研究

目的对癌症和癌前病变患者幽门螺杆菌进行sabA基因遗传信息多态性的研究。方法采用特异引物聚合酶链反应(PCR)及测序和比较基因组方法分析42株国内癌症及癌前病变患者幽门螺杆菌的sabA基因CT双核苷酸重复序列调节区多态性。结果 sabA基因调节区的阳性检测率为85%,功能性sabA基因占所有测序菌株的55%。对随机挑选的18株检测阳性菌株进行测序分析,结果显示在碱基水平及氨基酸水平存在显著的遗传多态性。对sabA基因调节区的氨基酸序列聚类分析中发现,本研究菌株与国际已经完成测序的7株幽门螺杆菌可以明显的分为两个组,即中国组与西方组。结论 sabA基因CT双核苷酸重复序列调节区在中国菌株中普遍存在,且在翻译水平有很显著的多态性。聚类分析发现含有功能性sabA基因的幽门螺杆菌菌株多态性存在明显的地域性分布差异。

温阳化浊清解方对Hp感染GES-1细胞IceA 、SabA基因及HSP70、TRL4表达的影响

目的探讨温阳化浊清解方对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染人胃黏膜上皮细胞(GES-1)IceA、SabA基因及HSP70、TRL4表达的影响。方法制备幽门螺杆菌感染GES-1体外模型。实验分组为空白组、模型组、西药组、低、中、高浓度中药组(10,20,40μg/ml)。空白组为正常人GES-1细胞,不予任何处理;模型组为Hp感染后人GES-1细胞;西药组为标准四联杀菌药干预;低、中、高中药组分别以上述浓度中药进行干预。干预完成后,采用PCR法分别检测各组细胞中幽门螺杆菌IceA、SabA基因表达,采用Western斑点印迹技术进行HSP70及TRL4表达水平的检测。结果IceA1、IceA2、SabA模型组较空白组mRNA转录水平变化均明显上升,差异性明显(P<0.05)经药物干预后,各组mRNA转录水平均下降差异显著(P<0.05),温阳化浊清解方在降低IceA2mRNA转录水平表达方面存在量-效关系,随浓度梯度升高而增强。SabA基因mRNA转录水平变化,高浓度中药组优于其余几组,差异有特异性(P<0.05)。且在降低Sa-bA基因mRNA转录水平方面存在量-效关系。与空白组相比,各组样本TLR4、HSP70蛋白相对表达量及IL8水平均升高(P<0.05)。与模型组相比,西药组、温阳化浊清解方各浓度组TLR4、HSP70蛋白相对表达量及IL8水平均明显降低(P<0.05)。结论温阳化浊清解方能增强Hp感染后人胃黏膜上GES-1活力,降低细胞凋亡率,抑制IceA、SabA基因表达和HSP70、TRL4蛋白表达,抑制IL8,减轻炎症,这可能是其抑制Hp相关胃炎的作用机制。