HPLC-ELSD同时测定腺梗豨莶草中6个二萜成分的含量

为了研究腺梗豨莶草中6个二萜成分(对映海松烯型二萜:奇任醇、Hythiemoside B和豨莶精醇;对映贝壳杉烷型二萜:对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸和对映-16α氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸)的含量,本试验建立了高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定二萜类化合物含量。样品粉碎过筛加甲醇和乙酸乙酯回流提取,蒸发减压除去溶剂,甲醇溶解,0.45μm滤膜滤过,取续滤液进行测定。色谱条件:色谱柱为Waters Symmetry Shield^(TM)RP18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.3%甲酸水溶液-乙腈(v/v),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min。蒸发光散射检测器漂移管温度为103℃,雾化气流速为3.0 L/min。应用该方法测定腺梗豨莶草样品不同部位中6个二萜类化合物的含量,同时比较叶、枝、茎中对映海松烯型二萜、对映贝壳杉型二萜和总二萜含量的差异。结果显示,6个二萜成分在其线性范围内线性关系良好(r≥0.9992);日内和日间精密度相对标准偏差(RSD)均小于3.5%;回收率介于96.5%~101.5%,RSD均小于2.3%;腺梗豨莶草不同部位(叶、枝、茎)的二萜类化合物含量差异较大。结果表明,本试验所建立的HPLC-ELSD方法简便、准确、重复性好,为腺梗豨莶草药材全面的质量评价和临床应用中最佳药用部位的选择提供了参考。

HPLC-ELSD法测定龙泽熊胆胶囊中牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的含量

目的:以牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸为指标,建立龙泽熊胆胶囊中熊胆粉的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱串联蒸发光检测器,色谱柱为ChromCore AQ C 18(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈(A)-5 mmol•L^(-1)醋酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~40 min,25%A;40~50 min,25%A→29%A;50~80 min,29%A;80~100 min,29%A→40%A),流速1.0 mL•min^(-1),柱温30℃,ELSD漂移管温度110℃,氮流量2.5L•min^(-1)。结果:牛磺熊去氧胆酸进样量在1.069~9.57μg内、牛磺鹅去氧胆酸进样量在0.74046~7.40464μg内,进样量的对数与峰面积的对数呈良好的线性关系;仪器精密度、重复性、稳定性试验的RSD<2.0%;经低、中、高3个浓度的准确度试验考察,牛磺熊去氧胆酸的回收率为95.2%~97.7%,牛磺鹅去氧胆酸的回收率为91.9%~95.9%。测定样品42批次,牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的含量分别为0.18~0.43、0.10~0.44 mg•粒^(-1)。结论:本法适用于龙泽熊胆胶囊中熊胆粉的质量控制,可为完善龙泽熊胆胶囊的质量标准提供科学的依据。

HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质含量

目的为硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质建立质控方法。方法采用HPLC-ELSD方法,色谱柱:GRACEApollo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.2 mol/L三氟乙酸溶液-甲醇(96:4,V/V),流速0.6 mL/min;柱温30℃;进样量20μL;Waters低温分流型蒸发光散射检测器,载气流量40 psi,漂移管温度55℃。结果所建方法通过方法学验证,庆大霉素C组分与各杂质间分离完全,庆大霉素、西索米星和小诺霉素分别在0.5~6 mg/mL、25~100μg/mL和25~100μg/mL的浓度范围内,各浓度的对数值与对应色谱峰面积的对数值呈现出良好的线性。采用所建方法对市售16家生产企业43批次硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊样品进行测定,获得该制剂产品中各组分及有关物质的数据。结论所建方法是在中国药典方法基础上优化并验证适用于硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊C组分及有关物质的含量测定,方法简便准确,专属性强,稳定性好。由获得的实验数据可知,该复方制剂中C组分及有关物质的含量在各厂家间或同厂家不同批次间差异显著,可能存在影响用药安全的潜在隐患,建议在该剂型质量标准中增加相关质控项。

高效液相-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定红参中的精氨酸单糖苷(AF)及精氨酸双糖苷(AFG)含量

目的建立一种同时测定人参加工品中精氨酸单糖苷(AF)和精氨酸双糖苷(AFG)含量的方法。[方法]用PrevailTMC18column(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱进行检测。流动相A:色谱乙腈,流动相B:5.0mmol/L七氟丁酸的0.7%三氟醋酸溶液。色谱条件为[0%A(0 min);0%A(5 min);15%A(8 min);35%A(25 min)];流速0.8 mL/min;漂移管温度为115℃;气体流量3.2 L/min。[结果]AF和AFG的检测限分别为0.015和0.010 mg/mL;线性关系相关系数分别为,AF:0.9997,AFG:0.9999,表明线性关系良好。AF和AFG检测的精密度,重复性,稳定性以及回收率的相对标准偏差分别为0.43%&0.37%,0.43%&0.55%,0.43%&0.49%,0.45%&0.15%。AF和AFG检测的回收率分别为99.5%&100%,表明方法稳定。经检测,高丽红参,中国红参和生晒参中AF含量分别为0.74%,0.91%和1.14%,AFG含量分别为6.69%,5.12%和0.85%。[结论]这种方法成功用于高丽红参,中国红参及生晒参中AF及AFG的检测;且红参中AF和AFG含量明显高于生晒参。该方法测定结果可靠,缩短了测定时间,较少杂质干扰。但因为本研究考察氨基酸种类较少,当衍生物种类较多时,仍需进一步考察其分离度。

HPLC-VWD-ELSD法同时测定消炎宁胶囊中7个成分的含量

目的 采用高效液相色谱-紫外检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-VWD-ELSD)法同时测定消炎宁胶囊中苦玄参苷IA、异嗪皮啶、迷迭香酸、金丝桃苷、甘草苷、冬青素A和毛冬青皂苷A1的含量。方法 采用Waters Symmetry C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈(A)-0.15%醋酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1)。苦玄参苷IA、异嗪皮啶、迷迭香酸、金丝桃苷、甘草苷采用VWD进行检测,切换波长分别为270 nm及342 nm;冬青素A和毛冬青皂苷A1采用ELSD进行检测,漂移管温度为85℃,载气流速3.5 L·min^(-1)。结果 苦玄参苷IA、异嗪皮啶、迷迭香酸、金丝桃苷、甘草苷、冬青素A和毛冬青皂苷A1进样量分别在1.764~35.28μg、0.6903~13.81μg、0.9524~19.05μg、0.4067~8.134μg、0.2136~4.272μg、0.9182~18.36μg和0.7665~15.33μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9991),平均回收率及RSD分别为100.01%(0.81%)、99.14%(0.84%)、99.40%(0.92%)、99.34%(1.02%)、99.20%(1.04%)、98.83%(1.09%)、98.99%(1.08%)。4批消炎宁胶囊中上述7个成分的含量测定结果分别为6.812~6.901 mg·g^(-1)、1.726~1.789 mg·g^(-1)、2.391~2.422 mg·g^(-1)、1.134~1.155 mg·g^(-1)、0.6087~0.6105 mg·g^(-1)、2.306~2.324 mg·g^(-1)和1.995~2.016 mg·g^(-1)。结论 所建立的方法简捷,重复性好,可用于消炎宁胶囊中7个成分的含量测定,为消炎宁胶囊全面的质量控制提供科学依据。

HPLC-ELSD法与薄层色谱扫描法用于测定二硬脂酰磷脂酰胆碱有关物质的对比研究

目的:建立二硬脂酰磷脂酰胆碱有关物质的检测方法。方法:对比考察HPLC-ELSD液相色谱法与薄层色谱扫描法。薄层色谱扫描法,采用硅胶G60薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水-浓氨溶液(65∶25∶4∶0.4)为展开剂,检测波长为450 nm。液相色谱法采用C8柱,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,蒸发光散射检测器,以浓度的对数值为横坐标,以峰面积的对数值为纵坐标,进行线性回归计算,并对建立的方法进行了方法学验证。结果:薄层色谱扫描法虽也可定量,但仅检出少量已知杂质,不能有效检出未知杂质。液相色谱法所需样品量少、杂质检出量高、操作简便,优于薄层色谱扫描法。结论:建立方法采用液相色谱法克服了原有薄层色谱法不能准确定量的弊端,检测灵敏度高,定值准确,可作为二硬脂酰磷脂酰胆碱质量控制方法。

HPLC-ELSD法同时测定柴胡中柴胡皂苷a、c、d、f的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法同时测定柴胡中柴胡皂苷 a、c、d、f 含量。方法:采用Phenomenex C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱(0 min:30:70,40 min:50:50,50 min:50:50),流速1.00 mL·min^(-1),Alltech ELSD-2000ES 检测器,漂移管温度:108℃,气体:空气,流速:3.0 L·min^(-1),柱温:室温。结果:柴胡皂苷 a、c、d、f 分别在0.18～8.84,0.17～8.28,0.21～10.40,0.16～8.20μg的范围内线性关系良好(r 分别为0.9997,0.9999,0.9997,0.9997);平均回收率(n=9)分别为103.3%,99.26%,102.0%,101.7%。结论:本法简便、准确,重复性好,可作为柴胡药材质量检测的方法。

河北道地药材北柴胡HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的:建立河北道地药材北柴胡的 HPLC-ELSD 指纹图谱分析方法,以提高柴胡药材质量标准。方法:采用 HPLC-ELSD 法测定了道地北柴胡等21个不同来源的柴胡样品。色谱条件:C_(18)柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,ELSD 检测器,流速1.0mL·min^(-1),柱温30℃。结果:建立了北柴胡 HPLC-ELSD 指纹图谱共有模式,并对不同产地柴胡药材进行了相似度比较。结论:色谱指纹图谱分析法能简便、快速地鉴别和区分不同来源的柴胡药材,为全面控制柴胡药材的质量提供了依据。

HPLC-ELSD法同时测定食品中的10种糖和糖醇

建立高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)同时测定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖、赤藓糖醇、木糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、麦芽糖醇的方法。方法采用Grace Previl Carbohydrate ES色谱柱,柱温30℃;乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min;蒸发光散射检测器,飘移管温度95℃,氮气流量2.5L/min。结果表明:5种糖和5种糖醇均在线性0.2～20mg/mL范围内,线性良好,精密度RSD小于5%,回收率91.53%～105.2%。本方法在30min内完成了10种糖和糖醇的分离,灵敏度高,重现性好,可以用于无糖食品中糖和糖醇含量的测定。

HPLC-ELSD法测定不同来源桔梗中桔梗皂苷E的含量

目的:建立测定桔梗样品中桔梗皂苷 E 含量的方法。方法:采用 HPLC-ELSD 法,C_(18)柱(3.9mm×300mm,4μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0mL·min^(-1),ELSD 漂移管温度112℃,载气(N_2)流速3.2L·min^(-1)。结果:不同产地的桔梗中均含有桔梗皂苷 E,但含量差别较大,其中以安徽青阳产含量最高(0.26%)。结论:本方法稳定、可靠,桔梗皂苷 E 可作为评价桔梗质量的指标之一。

HPLC-ELSD法测定山药中尿囊素含量的研究

目的:建立HPLC-ELSD法测定山药中尿囊素的含量。方法:以20%乙醇超声提取,用高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定,Hypersil C_(18)(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(10:90)为流动相,流速为0.8 mL·min^(-1),雾化温度为35℃,蒸发温度为50℃,载气流速为1.5 L·min^(-1)。结果:尿囊素在5.5～16.5μg范围内线性关系良好,方程为Y=1.283X+0.3319(r=0.9992),回收率为101.0%(RSD=2.3%)。结论:该方法专一稳定,明显优于现有测定法,可用于山药中尿囊素的测定。

HPLC-ELSD同时测定食品中5种糖含量

建立高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)同时测定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的方法。以Waters-NH2(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;乙腈:水=75:25(V/V)为流动相,流速为1.0mL/min,ELSD为检测器,漂移管温度45℃,N2流量25psi。待测组分与其他组分分离度良好(R>1.5),果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖在50～2000μg/mL内有良好的线性关系,精密度RSD小于3.8%,回收率大于80.3%。本方法在20min内完成了5种糖的分离,结果比较理想,可作为糖类食品的质量控制和安全评价的测定方法。

HPLC-ELSD同时分离检测食品中十种单糖、双糖和低聚果糖

为实现食品中木糖、果糖、葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖等十种糖的同时分离检测,建立了以乙腈-水为流动相,NH2色谱柱分离,梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测的分离检测方法;十种糖均在0.1～5mg/mL内具有良好的线性,线性相关系数在0.9901～0.9996之间;检出限均在0.1mg/mL以下,精密度RSD在1.71%～7.21%之间,回收率在97.91%～103.35%之间,结果较理想。本法高效、简单快速,可作为食品中以上十种糖同时分离检测的分析方法。

HPLC-ELSD测定积雪草提取物中积雪草苷的含量

目的：用HPLC-ELSD测定积雪草提取中积雪草苷的含量。方法：色谱柱为HiQ siL KYA—C18分析柱，流动相为乙腈-水，梯度洗脱；漂移管温度105℃；载气流速2．9L·min^-1。结果：积雪草苷在0．35—7．0μg呈良好线性关系；积雪草提取物中积雪草苷的回收率为94．9％（RSD 1．7％）。结论：该方法简便、准确、分离效果好，无干扰，可用于积雪草提取物中积雪草苷的质量评价。

HPLC-ELSD法同时测定四逆散不同配伍中柴胡皂苷a、b_2、c的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法同时测定四逆散不同配伍中柴胡皂苷a,b_2,c的含量。方法:采用Hypersil BDS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^(-1),ELSD检测器,漂移管温度:100℃,气体:空气,气体流速:2.0 L·min^(-1),柱温:室温。结果:柴胡皂苷a,b_2,c分别在7.74~129.00,7.86~131.00,5.12~85.30μg的范围内线性关系良好(r分别为0.999 2,0.999 2,0.999 3);平均回收率分别为98.6%,99.3%,100.7%,RSD分别为2.5%,1.8%,2.7%(n=6)。结论:白芍中的成分可降低柴胡皂苷a、c的煎出量;枳实中的成分可提高柴胡皂苷a、b_2、c的煎出量;与单味柴胡药材相比,配伍组合中柴胡皂苷b_2的含量均显著增加。

HPLC—ELSD法同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱含量

建立高效液相色谱—蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱的方法,并对不同样品含量进行测定。结果表明：当ELSD漂移管温度98℃,雾化管温度30℃,载气压力6.90kPa时,以0.1%三氟乙酸水—乙腈为流动相,经梯度洗脱程度,α-茄碱和α-卡茄碱可获得良好分离,色谱峰柱效高。样品用质量100倍的1%甲酸甲醇为提取溶剂在70℃下提取90min,提取液直接注入色谱仪进行检测。α-茄碱标准品在0.196-9.800μg线性关系良好（R2=0.999 5）,平均回收率为99.4%,并以该标准曲线同时计算样品中的α-茄碱和α-卡茄碱的含量。马铃薯植物的不同部位均含有生物碱,α-茄碱的含量为0.13-1.59mg/g,α-卡茄碱的含量为0.39-8.28 mg/g;两种生物碱总量为0.52-9.37mg/g,同一部位中α-卡茄碱的含量为α-茄碱的1.2-7.6倍。

HPLC-ELSD法测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸的含量

目的:建立熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)和牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)含量的测定方法。方法:应用 HPLC-EISD法直接测定熊胆粉中 TUDCA 和 TCDCA 的含量。色谱条件:色谱柱:Varian C_(18)(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇-醋酸-醋酸铵缓冲液(pH4.5)(70:30),流速:0.8mL·min^(-1);ELSD 漂移管温度:105℃,载气流速:3.2L·min^(-1),雾化气体(空气)压力:0.5MPa。结果:在选定的色谱条件下,TUDCA 和 TCDCA 可达到很好的分离。TUDCA 进样量在0.378～6.056μg范围内,TCDCA 进样量在0.489～7.829μg范围内均呈良好的线性关系。结论:该方法简便、快速,结果准确,重现性好。

ELSD-HPLC联用测定制剂中草甘膦的含量

通过蒸发光散射检测器(ELSD)与高效液相色谱仪(HPLC)联用,可用反相C18色谱柱,以甲醇+0.1%三氟乙酸(TFA)水溶液=10+90(v+v)为流动相,分离检测草甘膦制剂中的草甘膦含量。草甘膦的相对标准偏差、平均回收率、线性范围分别为1.3%(n=9)、100.3%(n=5)、0.5￣2.5mg/ml(r=0.9994)。

HPLC-ELSD法测定灵芝孢子油中三油酸甘油酯的含量

目的建立灵芝孢子油中三油酸甘油酯的HPLC-ELSD含量测定方法。方法采用HPLC-ELSD法,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相:乙腈-异丙醇(体积比51∶49),流速:1 mL.min-1,ELSD漂移管温度:80℃,载气流速:2.0 L.min-1。结果三油酸甘油酯在2.08～20.8μg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为99.04%,RSD值为2.8%。结论该方法简便、准确、重现性好,可为灵芝孢子油的质量评价提供参考依据。

不同来源知母药材HPLC-ELSD指纹图谱的研究

目的:建立不同来源知母药材 HPLC—ELSD 指纹图谱测定方法。方法:采用 HPLC—ELSD 法测定了18个来源不同的知母样品。色谱条件:Diamonsil^(TM)C_(18)(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腑(A)-0.5%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱[0～10 min,5%A→20%A;10～15 min,20%A→23%A;15～25 min,23%A;25～50 min,23%A→100%A;50～60 min,100%A],流速0.8 mL·mln^(-1)。柱温25℃。ELSD 检测器:漂移管温度110℃,雾化气体流速2.6 L·min^(-1)。结果:建立了不同来源知母的 HPLC—ELSD 指纹图谱,并进行相似度比较,对其中的知母皂苷 B-Ⅱ、知母皂甘 B-Ⅲ、anemarrhenasaponin Ⅰa、schidigera—saponin—F2、知母皂苷 A-Ⅲ进行了归属。其中前4个单体化合物为首次归属。结论:该方法操作简便、重复性好,可用于知母药材质量控制。