水杨酸对中国红豆杉内生真菌代谢产紫杉醇的影响

在中国红豆杉内生真菌液体发酵培养的不同阶段,添加不同浓度的水杨酸(SA),研究其对中国红豆杉内生真菌菌丝体及代谢产紫杉醇含量的影响。结果表明,在中国红豆杉内生真菌稳定期初期15 d时添加5.0 mg/L水杨酸,内生真菌产紫杉醇的量为604.0μg/L。且不同质量浓度的水杨酸均可提高紫杉醇的产量,其中25 mg/L水杨酸对紫杉醇合成的效果最为明显,紫杉醇质量浓度为890.0μg/L,是对照组的1.88倍。

南方红豆杉紫杉醇产生菌的分离与鉴定

从南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)根部树皮内表皮中分离得到69株内生真菌,通过HPLC检测发酵液中紫杉醇含量,共获得7种紫杉醇产生菌,同时,通过形态学分析以及ITS序列分析确定分别属于链格孢属(Alternaria)、葡萄孢盘菌属(Botryotinia sp.)、刺盘孢属(Colletotrichum)、拟茎点霉属(Phomopsis)和枝孢菌(Cladosporium),其中链格孢属真菌紫杉醇产量最高,平均为271.54μg/L,是目前见诸报道的产量最高的链格孢菌,亦是从红豆杉根部树皮中筛选出的紫杉醇产量较高的野生菌株之一。该菌株的发现为紫杉醇高产菌的选育提供了又一优良的种质资源。

南方红豆杉内生真菌分离时的表面消毒方法探索

表面消毒是植物内生菌分离的关键环节,在南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)内生真菌分离的过程中,使用75%乙醇、2%次氯酸钠(NaClO)代替升汞对外植体进行了表面消毒摸索。结果显示:红豆杉叶、茎、皮经预处理后,先用75%乙醇浸泡3 min,再用2%次氯酸钠浸泡2 min,然后红豆杉叶、茎、皮分别用75%乙醇浸泡3 min、5 min、7 min,可取得满意的表面消毒效果。