医疗机构制剂加味双柏膏的质量研究

目的:对不同批次加味双柏膏进行质量研究。方法:采用显微鉴别法对大黄及关黄柏进行显微特征研究,采用薄层色谱法对大黄进行薄层色谱研究及其方法考察。结果:不同批次加味双柏膏的大黄及关黄柏显微特征明显易见;大黄的薄层色谱分离效果良好,色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。结论:该实验方法简便可行,重现性好,可用于加味双柏膏的质量控制。

黄柏与关黄柏化学成分及药理作用研究进展

黄柏和关黄柏分别为芸香科植物黄皮树和黄檗的干燥树皮,均具有清热燥湿的功效。从黄柏和关黄柏中提取出来的化学成分主要包括生物碱类、酚酸类、柠檬苦素类、苯丙素类、萜类等,具有抗炎、抗菌、抗癌、降血糖、保护肝脏和肾脏等多种药理作用。本文对黄柏和关黄柏的化学成分及药理作用进行综述,旨在为进一步研究黄柏和关黄柏的药效物质基础提供理论依据。

黄柏及黄柏酒炙品的薄层色谱鉴别方法的研究与改进

目的:薄层色谱鉴别一直是中药材真伪快速鉴别的常用方法,具有操作简单,检测速度快,应用领域广泛的优点。采用《中国药典》2020版所载薄层色谱鉴别方法对黄柏饮片进行鉴别检测,发现药典方法重复性较差,操作相对繁琐,需要改进。方法:本研究从薄层色谱鉴别条件(提取溶剂、提取方法、展开系统、展距、点样量)、专属性和耐用性的角度对《中国药典》2020版所载黄柏薄层色谱条件进行研究与改进。结果:改进后的方法优选甲醇超声提取制备供试品样品溶液,点样量1~2μL,采用乙酸乙酯-甲醇-三氯甲烷-氨水-三乙胺(V_(乙酸乙酯)∶V_(甲醇)∶V_(三氯甲烷)∶V_(氨水)∶V_(三乙胺)=6∶2∶2∶1∶1)为展开系统,在365 nm下检视,供试品在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的亮黄色荧光斑点。结论:用改进后的方法对不同产地的关黄柏、黄柏饮片及酒黄柏饮片进行薄层色谱鉴别,发现小檗碱荧光点集中清晰、不漂移,方法操作简单易行,耐用性良好。改进后的方法还能进行黄柏和关黄柏的鉴别性检测。

比较两种黄柏组方二妙胶囊的抗炎作用

目的研究由关黄柏和川黄柏组成的二妙胶囊对急性炎症模型的影响。方法采用组织胺诱发大鼠皮肤通透性增加、二甲苯诱发小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等急性炎症模型,观察两种黄柏组成的二妙胶囊对3种炎症模型的抗炎作用。结果由关黄柏组方的二妙胶囊(A组)有抑制组胺所致大鼠皮肤通透性增加、二甲苯所致鼠耳肿胀、角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等作用。由川黄柏组方的二妙胶囊(B组)仅有抑制二甲苯所致鼠耳肿胀的作用。同剂量下,B组作用弱于A组。结论A组抗急性炎症作用强于B组。

关黄柏、黄柏及其精制提取物HPLC指纹图谱的相关性研究

目的建立关黄柏、黄柏及其AB-8型大孔树脂精制提取物的HPLC指纹图谱，研究饮片与提取物指纹图谱的相关性。方法采用zorbax SB C18色谱柱；流动相为乙腈-0．4mol·L-1的氯化铵溶液（梯度洗脱）；检测波长为230nm；柱温为40℃；流速为1．0mL·min-1。结果关黄柏标示出17个共有峰，关黄柏提取物能检出关黄柏中的15～17个共有峰，鉴别了4个特征峰；10批关黄柏及其提取物的相似度分别为0．992～0．999、0．964～0．999，同批次关黄柏与提取物之间的相似度为0．926～0．999。黄柏及其提取物均标示出与关黄柏相同的14个共有峰，但相对峰面积比值相差较大；3批黄柏及其提取物的相似度分别为0．999～1．000、0．994～1．000，同批次黄柏与提取物之间的相似度为0．988—0．989。关黄柏与黄柏、关黄柏提取物与黄柏提取物指纹图谱模式之间的相似度分别为0．807、0．815。结论该方法准确可靠，重复性好，为关黄柏、黄柏及其提取物的质量控制提供了方法依据，同时为含关黄柏复方制剂的工艺与质量控制提供了参考。

HPLC测定黄柏中的盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱

目的测定黄柏中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱的含量,为完善质量评价提供依据。方法采用HPLC法。结果与结论四川9个产区黄柏的盐酸小檗碱含量平均为50.5840 mg.g-1,关黄柏为6.8583 mg.g-1;其中荥经产黄柏中盐酸小檗碱的含量最高,为86.5381 mg.g-1,说明荥经是黄柏的道地药材产区;9个产区黄柏的盐酸巴马汀含量很低,平均为0.1296mg.g-1,而关黄柏为3.1310 mg.g-1;黄柏盐酸药根碱平均含量是0.2956 mg.g-1,关黄柏中是0.2883 mg.g-1,二者较接近。

盐炙对关黄柏化学成分溶出的影响

目的考察盐炙对关黄柏水煎液中主要生物碱类及柠檬苦素类成分溶出的影响。方法采用HPLC法比较用分析纯NaCl、MgCl2、KCl和食盐炮制的关黄柏样品中3种主要生物碱小檗碱、药根碱、巴马汀的峰面积。色谱柱:Diamonsil ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈(A)-体积分数为0.1%的磷酸溶液(B)(梯度洗脱程序:0～20 min:90%B～65%B,20～35 min:65%B～50%B),流速:0.8 mL.min-1,检测波长:345 nm。同时采用分光光度法测定水煎后药渣中柠檬苦素类成分的含量。结果不同种类的盐炮制的关黄柏中生物碱类成分的峰面积均有变化。药渣中的柠檬苦素成分含量也均有变化。结论盐炙对关黄柏中主要成分的水中溶出有较大影响,为阐明盐炙的炮制机理提供一定的依据。

土壤因子对关黄柏10种化学成分含量的影响

为了揭示不同产地土壤因子对关黄柏酚酸类、生物碱类和柠檬苦素类化学成分含量的影响,本研究对31个样点的15个土壤因子及所产药材的10种化学成分含量进行检测。通过冗余分析考察土壤因子与化学成分间的相关性,用t-value双序图解读各土壤因子对各化学成分含量的影响,并通过聚类分析考察样点土壤特征对药材化学特征的影响。结果显示:土壤中的盐分、速效磷、阳离子交换量、速效氮、速效钾、有机质、有效锰、硫和有效铜对关黄柏化学成分含量有显著影响;3-O-阿魏酰奎尼酸、4-O-阿魏酰奎尼酸、5种生物碱、黄柏内酯含量随上述土壤因子含量的上升呈下降趋势;紫丁香酚苷和黄柏酮主要呈上升趋势。研究结果表明环境土壤因子的差异会导致关黄柏多种化学成分的含量发生显著性改变。

不同产地黄柏及关黄柏有效成分的含量测定

目的考察不同产地黄柏和关黄柏有效成分的含量,为这两个品种质量标准提供一定的依据。方法采用HPLC测定不同产地黄柏和关黄柏中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量,以kromasil C18(150mm×4.6mm5μm)为色谱柱;流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(50:50)(每100mL加十二烷基硫酸钠0.1g);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检验波长:265nm。结果结果表明,川黄柏中以盐酸小檗碱的含量最高,为3.73%～6.131%之间,药根碱和巴马汀的含量较低,分别在0.007%～0.061%和0.027%～0.082%之间;关黄柏中盐酸小檗碱的含量在0.474%～1.240%之间,巴马汀的含量在0.516%～1.224%之间,以药根碱的含量最低,在0.008%～0.043%之间。结论不同产地的黄柏及关黄柏的含量差异较大,两个品种的含量差异也较大。

关黄柏对对乙酰氨基酚诱导大鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究关黄柏对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用对乙酰氨基酚所致大鼠急性肝损伤模型,给药24 h后检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP);留取肝脏组织,常规石蜡包埋切片,HE染色,光镜观察肝脏组织病理变化;制备肝匀浆,测定肝中还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与空白组比较,模型组小鼠血清中ALT、AST和ALP活性明显升高,肝脏组织出现明显的肝细胞变性坏死;与模型组相比,不同浓度的关黄柏可以明显降低小鼠血清中ALT、AST和ALP的活性,降低肝组织中MDA的含量,升高GSH的含量,肝组织病理损伤也明显减轻。结论:关黄柏对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用。

市售关黄柏药材质量及微量元素特征分析

目的:明确目前市售关黄柏药材质量是否因来源变化而产生变化。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)分别检测野生、市售关黄柏样品中盐酸黄柏碱、木兰花碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱等5种生物碱成分的含量,利用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定关黄柏样品中钙(Ca)、铜(Cu)、铁(Fe)、钾(K)、镁(Mg)、锰(Mn)、钠(Na)、磷(P)、硫(S)、锌(Zn)等10种微量元素含量,并对两组药材进行比较。结果:野生关黄柏与市售关黄柏生物碱含量无明显差异,钙(Ca)、铁(Fe)、钾(K)、镁(Mg)、锰(Mn)、硫(S)等微量元素含量存在差异,部分市售关黄柏S含量较高。结论:野生与市售关黄柏质量不能等同。

不同生长年限黄檗树枝与关黄柏中生物碱类成分相关性研究

建立黄檗树枝与关黄柏中5种生物碱类成分的含量测定方法,比较关黄柏、黄檗三年生、四年生、七年生及八年生树枝中生物碱类成分含量累积规律。采用HPLC法对不同年限的黄檗树枝与关黄柏中5种生物碱类成分进行含量测定;采用相似度比较法进行分析及共有峰的鉴定;采用质谱法对未标定成分进行分析。随着生长年限增长,黄檗树枝中盐酸黄柏碱、木兰花碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量逐年递增。八年树枝与关黄柏药材共有模式之间的相似度大于0.96。建立的不同年限黄檗树枝与关黄柏中5种生物碱类成分的含量测定方法简便、准确、重复性好。黄檗树枝与关黄柏主要成分较为相近,且八年生树枝中生物碱含量与关黄柏药材最为相近,可进一步为关黄柏药源高值化利用提供理论依据。

关黄柏中总黄酮的提取工艺及抗氧化活性研究

目的:获得超声波提取关黄柏中总黄酮的提取工艺,并考察其体外抗氧化活性。方法:采用超声波萃取法提取关黄柏中的黄酮类化合物,利用正交试验法确立最佳提取条件。考察关黄柏中总黄酮提取液对OH·、O-2·和DPPH自由基的清除能力,结果用IC50值表示。结果:关黄柏中总黄酮的最佳提取工艺参数是温度为70℃,料液比20:1,提取时间为40min,乙醇体积分数为70%,此条件下提取率为2.31%。关黄柏中总黄酮提取物对OH·、O-2·和DPPH清除率的IC50值分别为2.9525mg/L、1.6827mg/L、1.3951mg/L。结论:超声波法辅助提取法可用于提取黄柏中总黄酮类物质,其提取工艺高效、安全、简便、稳定,且关黄柏中的黄酮类物质有很强的抗氧化活性。

关黄柏不同炮制品中黄柏酮与黄柏内酯的含量测定

目的:以黄柏酮、黄柏内酯含量为指标,考察不同炮制方法对关黄柏中柠檬苦素类成分含量的影响。方法:采用RP-HPLC测定关黄柏不同炮制品中黄柏酮、黄柏内酯的含量,色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(50∶50),流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长205 nm。结果:关黄柏不同炮制品中黄柏酮、黄柏内酯的含量有显著差异,黄柏酮的含量变化依次为:生品>炒炭品>酒炙品≈盐炙品,黄柏内酯的含量变化依次为:炒炭品≈酒炙品≈盐炙品>生品。结论:炙法使黄柏酮损失量远大于炒炭法损失量,炙法和炒炭均使黄柏内酯有近似程度的增加,增加率依次为18.15%、15.62%、15.84%。

超声波辅助提取关黄柏中巴马汀的研究

目的通过正交试验确定超声波辅助提取关黄柏中巴马汀的最佳提取工艺。方法用超声波辅助回流为主要提取方法,紫外分光光度法为主要测定方法,用测定结果吸光度值比较分析。结果影响关黄柏中巴马汀超声波辅助提取效果的主次因素为:提取温度>料液比>提取时间>提取功率,关黄柏中巴马汀最佳提取工艺为料液比1/15,超声提取35 min,温度40℃,超声功率90 W。结论通过正交试验可以优选出巴马汀的最佳提取工艺,为更好的提取关黄柏中的巴马汀提供理论参考。

关黄柏不同炮制品中盐酸小檗碱与盐酸巴马汀含量测定

目的:以盐酸小檗碱、盐酸巴马汀含量为指标,考察不同炮制方法对关黄柏季铵碱类成分含量的影响。方法 :采用HPLC测定不同炮制品中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀的含量,色谱柱为Diamonsil TM(钻石)C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(0.02 mol.L-1磷酸二氢钠)(25∶75),流速1.0 mL.min-1,柱温25℃;检测波长345 nm,参比波长500 nm。结果:不同炮制品中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量高低顺序依次为:酒炙品>生品>盐炙品>炒炭品,其中生品与盐炙品差异不明显,炒炭品中仅检出少量。结论:在关黄柏不同炮制品中,随着炮制程度的加大,炒炭品中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀的含量大幅下降,而酒炙品中两者含量明显增加。

关黄柏提取纯化过程中生物碱转移率的考察

目的对关黄柏提取纯化过程中生物碱的转移率进行考察,以确定最佳精制工艺。方法采用AB-8型大孔树脂对关黄柏生物碱进行纯化,以盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量为指标,采用HPLC对醇提液、上柱液及洗脱液进行含量测定。结果最佳工艺为8倍量75%的乙醇回流提取3次,每次1h,转移率可达83.75%;上柱液(调pH=8并离心)浓度为0.1g/mL的转移率达到80%左右;上柱液浓度为0.1g/mL时洗脱液中生物碱的转移率达到75.14%。结论经过优化的工艺稳定可行,用AB-8型大孔树脂纯化关黄柏中生物碱效果良好。

引发剂对黄檗种子休眠解除作用的研究

黄檗种子具休眠特性,且休眠程度因种子产地和年份不同有较大差异,常规低温层积解除种子休眠的方法在实际生产中效果不甚理想。为了解决黄檗种子的萌发率低的问题,探究最有效的打破种子休眠方式,采用了各种化学引发剂浸种处理,以及协同4℃或8℃低温层积处理。结果表明,NAA、6-BA、KNO3、PEG6000溶液浸种可部分解除种子的休眠,并显著提高种子发芽率;用引发剂溶液浸种后4℃层积30天可有效解除种子休眠,其中GA3(1000 mg/L)、NAA(80 mg/L)、6-BA(400 mg/L)、KNO3(1.0%)、PEG6000(20 g/L)溶液浸种后4℃层积30天可有效解除种子休眠,分别将黄檗种子发芽率分别从11.50%升高到91.00%、94.00%、97.00%、94.50%、83.00%。引发剂可有效打破黄檗种子休眠,促进种子萌发并能缩短低温层积时间。

双水相体系分离富集黄柏中盐酸小檗碱

目的利用双水相体系分离富集黄柏药材中的盐酸小檗碱。方法采用非离子表面活性剂PEG400/(NH4)2SO4双水相体系萃取黄柏药材中的盐酸小檗碱,考察了PEG400浓度、(NH4)2SO4盐浓度、萃取温度、水浴时间、pH值和料液比等因素对盐酸小檗碱萃取率的影响。结果盐酸小檗碱在PEG400浓度为15%、(NH4)2SO4浓度为3.4mo.lL-1、pH值为9.0和水浴温度为70℃、水浴时间为30 min、料液比为1.0时,萃取率为99.52%,提高了盐酸小檗碱的浓度。结论本文方法所形成双水相体系操作简便、萃取率高,方法重复性好,可适用于分离盐酸小檗碱。

浅析黄柏、关黄柏在妇炎康片中的混用现象

目的分析成方制剂中黄柏、关黄柏的混用现象。方法以黄柏、关黄柏、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱为对照,与3批妇炎康片样品溶液点于同一块薄层板上,分别在两种不同的展开剂中展开,展开后,晾干,于365 nm紫外光下检视。结果在与盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、黄柏、关黄柏相应的位置上均呈现相同颜色的荧光斑点。结论采用两种展开系统同时进行展开,试验结果一致,验证了该品种的成方制剂中使用了关黄柏替代黄柏入药或二者同时入药的可能性。