Effect of Salvia Miltiorrhiza on Expression of the MMP-2 9 in Tissue of Early Stage Acute Lung Injury in Rats with Severe Acute Pancreatitis

Objective:To investigate the effect of salvia miltiorrhiza on expression of the MMP-2、9 and TIMP-1、TIMP-2 in tissue of acute lung injury of severe acute pancreatitis(SAP).Methods:MMP-2、9 expression and changes of the lung were measured after the SAP rats were induced by retrograde injection of 5%sodium tauocholate into hepatopancreatic duct.The changes of those parameters were also measured after salvia miltiorrhiza was injected intramuscularly just after induction of SAP.Results:The level of MMP-2、9 in pancreas and lung in SAP group were significantly higher than those in sham;The level of MMP-2、9 in salvia miltiorrhiza group were significantly lower than those in SAP group. Conclusion:MMP-2、9 were overexpressed in Acute lung injury (ALI) induced by SAP, salvia miltiorrhiza downregulates MMP-2、9 expression and decreased injury of lung tissue.

复方丹参方制剂治疗稳定型心绞痛随机对照试验的系统评价

[目的]评价复方丹参方制剂(与硝酸酯类作对照)治疗稳定型心绞痛的疗效和安全性。[方法]通过检索Cochrane Centre,MEDLINE,EMBASE,中国生物医学文献数据库(CBM),中文全文期刊数据库(CNKI)和维普中文期刊数据库(VIP)等数据库(截至2007年1月),全面搜集有关复方丹参方制剂(丹参、三七、冰片组成)治疗稳定型心绞痛的随机对照试验。质量评价参照Cochrane handbook4.26提供的标准。[结果]有33篇文献纳入评价。32个研究采用心绞痛症状改善为指标,合并效应量RR(random)及95%可信区间(CI)为1.16(1.10,1.23)。30个研究采用心电图改善为指标,合并效应量RR(random)及95%可信区间为1.38(1.25,1.51)。复方丹参方制剂的不良反应主要表现为轻度的胃部不适,发生率为3.4%,95%CI(2.5%,4.2%)。[结论]根据系统评价结果,提示复方丹参方治疗冠心病心绞痛与硝酸酯类相比,在改善心绞痛症状、改善心肌缺血状态等方面显示出一定的优势,且不良反应少。但由于原始研究质量较低,影响了结论的可靠性,有待高质量研究提供更有力的证据。

丹参对大鼠急性肺损伤的保护作用

目的:通过观察丹参(SM)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺水通道蛋白-1(AQP-1)的影响,探讨其保护作用。方法:SD大鼠48只,随机分为正常组、丹参注射液预保护组、丹参注射液7 d治疗组、ALI 7 d模型组、丹参注射液8hr治疗组、ALI 8 hr模型组,每组各8只。分别于7 d和8 hr后电镜HE染色观察各组大鼠肺组织病理改变,肺湿/干重比(W/D)观察肺脏水通透性的变化,免疫组化法及肺组织匀浆后Western blotting法检测AQP-1表达变化。结果:模型组均出现肺损伤症状。SM7 d治疗组的肺水肿病理改变与ALI 7 d模型组比较明显减轻,但两组AQP-1表达均与正常组无明显差异(P<0.05)。SM8 hr治疗组和SM预保护组与ALI 8 hr模型组比较肺水肿病理改变明显减轻,血流变明显改善(P<0.05),其中SM预保护组AQP-1表达上调明显,有显著差异(P<0.01)。结论:ALI时SM能增加肺组织毛细血管上AQP-1的表达,从而减轻其减少引起的肺水肿,在一定程度上缓解ALI病变的发生与发展。

UPLC和HPLC方法对丹参药材中丹酚酸B含量测定结果的比对

目的:比对超高效液相色谱与高效液相色谱方法测定丹参药材中丹酚酸 B 的含量结果。方法:采用中国药典2005年版(一部)丹参药材含量测定项下有关标准对原高效液相色谱方法进行转换并优化为超高效液相色谱方法。原高效液相色谱方法色潜柱为 Waters X-Bridge^(TM)BEH C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(10:30:59:1),流速:1mL·min^(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃;超高效液相色谱方法色潜柱为 Waters ACQUITY UPLC^(TM)。BEH C_(18)柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(8:25:66:1),流速:0.4 mL·min^(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃。结果:2种方法所得含量测定结果一致。结论:超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定丹参药材中丹酚酸 B 含量,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度。

丹参药材中铅、镉、砷、汞、铜的含量测定

[目的]对不同产地的丹参药材中铅、镉、砷、汞、铜的含量进行测定,为高品质丹参药材的筛选提供某种依据,并为中药材质量标准的建立提供一定的参考价值。[方法]样品经湿法消解后,用原子吸收分光光度法进行检测。[结果]超标率为:铅6.25%;镉100%;砷0;汞0;铜31.25%。[结论]不同产地的丹参药材中砷、汞含量较低,铅和铜的含量个别超标,镉含量严重超标。

丹参诱导人脐血间充质干细胞分化为神经样细胞

目的探讨丹参注射液对人脐血单个核细胞来源的间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的诱导作用。方法利用FACScan流式细胞仪检测MSCs表面抗原CD29、CD44、CD59、CD33,用丹参注射液诱导人脐血原代细胞和脐血来源的间充质干细胞向神经细胞方向分化,并与神经生长因子(NGF)和神经常苷脂(GM1)的诱导作用比较,用免疫细胞化学方法对分化和未分化细胞进行鉴定。结果人脐血原代细胞中MSCs的表耐标记CD29、CD44、CD59阳性率分别为10.7%、37.27%和66.67%,而造血细胞的表面标记CD33阳性率仅为0.33%。人脐血传代细胞(第5代)MSCs的表面标记CD29、CD44、CD59的阳性率分别为40.2%、70.5%和95.4%。原代培养的贴壁细胞形态呈大小不等圆形和条形,用丹参诱导可表达神经细胞的标记。传代培养的间充质干细胞,可维持在未分化状态稳定增殖。用丹参可诱导这种细胞向神经样细胞分化,表达神经干细胞标记nestin,神经元的标记β-Ⅲ类神经微管(β-TubulinⅢ)、神经微丝(NF)和神经胶质细胞的标记胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。与NGF和GMI的诱导作用比较,细胞形态类似,表达相同的神经细胞标记,丹参的诱导速度较快,诱导后细胞表达神经元标记的比例较高。结论人脐血是MSCs的来源之一,丹参可诱导人脐血干细胞分化为神经样细胞,丹参可作为神经诱导剂,人脐血干细胞可作为神经干细胞的来源。

丹参水提液絮凝澄清工艺研究

目的:优选丹参提取液絮凝澄清工艺。方法:采用单因素实验法,以澄清处理后的丹参提取液的浊度和指标成分丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛含量为考察对象,优选两种絮凝澄清剂的用量和絮凝温度。结果:使用壳聚糖进行絮凝澄清处理后的丹参水提液上清液浊度低于用ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂处理后的浊度,并能够更好地减轻膜污染程度。结论:壳聚糖作为丹参水提液絮凝澄剂效果优于ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂。

丹参药材水溶性成分HPLC化学指纹图谱研究

目的:对9个地区的丹参18批样品建立丹参药材水溶性成分HPLC指纹图谱。方法:运用Agilent 1100 DAD-HPLC高效液相色谱仪,采用大连依利特Sino Chrom ODS-BP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.7%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量20μL,测定了18批丹参药材并进行聚类分析。结果:根据聚类分析结果,采用安徽不同来源的10批丹参药材,建立了丹参水溶性成分指纹图谱共有模式,显示12个共有峰,指认了丹参素钠、表儿茶醛、丹酚酸B 3个特征峰。结论:建立的丹参药材水溶性成分指纹图谱,色谱图中个峰分离度较好,特征明显,方法的精密度重现性试验的RSD值小于5%,可做为丹参药材质量控制标准。

丹参多酚酸盐对持续性高正加速度造成大鼠颞颌关节损伤的保护作用

目的:观察丹参多酚酸盐对在持续性高正加速度(+Gz)引起颞颌关节病的作用。方法:40只雄性SD大鼠随机分为5组:第1组的大鼠只在实验装置上固定5min作为阴性对照组;第2组在+10Gz条件下处置5min,每日重复5次,每周4次,连续3周作为阳性对照组;第3～5组处置方法同第2组,每日离心前30min肌肉注射丹参多酚酸盐(给药剂量分别为1、3、10mg/kg),阴性对照组给予等容积的生理盐水。用电子显微镜观察形态学变化,用RT-PCR技术检测颞肌c-fosmRNA基因表达。结果:丹参多酚酸盐能有效地保护持续性高正加速度对于颞颌关节造成损伤,电子显微镜的影像学显示该作用具有剂量依赖性。丹参多酚酸盐对于持续性高正加速度引起的颞肌c-fosmRNA表达有抑制作用。结论:丹参多酚酸盐对于持续性高正加速度引起的大鼠颞颌关节损伤有保护作用。

不同产地丹参的HPLC和TLC图谱分析

目的:根据丹参药材的HPLC和TLC图谱,分析比较不同产地丹参成分的异同。方法:采用HPLC和TLC法测定不同产地的丹参成分。结果:不同产地丹参的成分不一,含量不同,其中代表性成分丹参酮ⅡA含量差异较大,山东青岛的丹参酮ⅡA含量最高,是陕西商洛(含量最低)含量的3.5倍。结论:两种方法鉴别特征很显著,且操作简便,重现性好。该测定结果可为临床和科研单位选用丹参提供参考依据。

复方丹参对急性肺损伤患者血小板活化因子表达及凝血功能的影响

目的探讨复方丹参注射液对急性肺损伤（ALI）患者血清血小板活化因子（PAF）表达及凝血系统功能的影响。方法ALI患者40例，随机分为对照组和治疗组，每组各20例，对照组予以治疗原发病、机械通气、激素治疗、抗感染、维持水电解质及酸碱平衡等常规治疗。治疗组在常规治疗的基础上加用复方丹参注射液20mL溶于5％葡萄糖注射液250mL中静脉滴注，1次／d，共3d。分别于治疗前及治疗3d后测定血清PAF、血栓素B2（TXB2）和凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、血小板参数及血气分析。比较对照组和治疗组治疗前后血清PAF、TXB2和PT、APTT、FIB、血小板参数及血气分析变化。结果与治疗前比较，治疗后两组氧合均改善，PAF和TXB2下降，胛、APTT延长，FIB下降，血小板参数改善（均P〈0．01）。与对照组比较，治疗组治疗后氧合显著改善，PAF和TXB，显著下降，PT、AFTT显著延长，FIB显著升高，血小板参数显著改善（P〈0．01或P〈0．05）。但两组病死率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论复方丹参能减少ALI患者PAF的表达，改善ALI患者高凝状态和氧合，为临床早期治疗ALI提供了新方法。

复方丹参注射液减轻缺氧/复氧性HK-2细胞损伤的作用及机制

目的探讨丹参注射液减轻缺氧-复氧性人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)细胞损伤的作用机制。方法以人近曲肾小管上皮细胞为研究对象,采用液体石蜡覆盖法建立缺氧/复氧模型。实验分为3组:对照组、损伤组和丹参组,每个组均设立7个时间点:缺氧4,12,24h和缺氧24h后复氧4,12,24,48h,其中丹参组设立4个浓度亚组(生药浓度):0.05%,0.10%,0.15%,0.20%。在倒置相差显微镜下观察细胞的形态学改变,MTT法进行活细胞计数,生化法检测培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,放射免疫法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果缺氧处理后,损伤组在各时间点细胞数量均明显降低,在缺氧24h达最低值;与损伤组比较,在丹参各组中,HK-2细胞数量较多,其中以0.10%丹参组细胞数量在各时间点均为最高。与对照组比较,损伤组LDH,TNF-α水平升高,在缺氧24h-复氧4h达最高值;与损伤组相比,丹参组在缺氧/复氧过程各时间点中LDH,TNF-α水平降低。结论复方丹参注射液对HK-2细胞缺氧-复氧性损伤具有保护作用,作用机制可能与丹参注射液抑制炎症细胞因子的产生有关。

加热方式对丹酚酸提取物质量的影响

目的研究中药提取时加热方式(温度控制策略)对丹参提取物中活性物质含量的影响。方法比较在3种加热方式下丹参提取物共有色谱峰面积及标记性成分丹酚酸B含量的差异。结果以加热方式1下所得提取物的色谱为基准,加热方式2所得提取物的丹酚酸B含量低21.73%,加热方式3下丹酚酸B含量低55.44%。结论提取时温度波动与控制策略对丹酚酸提取物质量影响很大,在热敏性物质为活性成分的中药提取过程中应当严格控制加热方式。

动脉灌注蟾酥、丹参、苦参碱联合TACE对肝癌患者免疫功能的影响

目的观察动脉灌注蟾酥、丹参、苦参碱联合TACE对原发性肝癌患者免疫功能的影响。方法对48例经影像学及病理学确诊的肝癌患者随机分为两组:研究组和对照组,研究组行经肝动脉灌注蟾酥、丹参、苦参碱联合TACE治疗,对照组予以单纯TACE治疗,比较两组治疗前后T细胞亚群的变化。结果同治疗前相比,动脉灌注蟾酥、丹参、苦参碱联合TACE治疗组CD3+、CD4+轻度下降(P>0.05)、CD8+轻度升高(P>0.05),单纯TACE治疗组CD3+、CD4+明显下降(P<0.01)、CD8+升高(P<0.01),研究治疗组与对照治疗组比较,治疗后的CD3+、CD4+、CD8+改变差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TACE治疗可引起肝癌患者免疫功能的下降,联合动脉灌注蟾酥、丹参、苦参碱可有效保护TACE引起的肝癌患者免疫功能的下降。

中药穴位注射治疗慢性疲劳综合征

目的探讨慢性疲劳综合征的发病机制及中药穴位注射治疗效果。方法180例慢性疲劳综合征患者随机分为治疗组和对照组,治疗组92例应用双侧肝、脾、肾腧穴位注射黄芪、丹参注射液治疗,对照组88例应用双侧足三里、手三里、丰隆穴位注射黄芪、丹参注射液治疗,应用疲劳量表、疲劳评定量表、抑郁自评量表、焦虑自评量表及生活质量综合评定问卷对患者治疗前、后进行客观评价。结果疲劳量表、疲劳评定量表、抑郁自评量表、焦虑自评量表、生活质量综合评定问卷评分显示:治疗组和对照组治疗前后比较,P<0.05,治疗组和对照组治疗后比较,P<0.05。结论肝、脾、肾腧穴位注射黄芪、丹参注射液治疗慢性疲劳综合征更有效。

靶细胞提取和高效液相飞行时间质谱联用分析预测丹参中的活性成分

建立靶细胞提取和与高效液相飞行时间质谱联用(HPLC-ESI/TOFMS)分析相结合进行丹参活性成分研究的方法,对丹参中可能的活性成分进行了推测。将靶细胞和丹参样品一起孵育培养,根据活性成分可以与靶细胞膜有特异性的结合或者进入靶细胞内的原理,用HPLC-MS方法对培养后细胞破碎液中的成分进行分析。从加药Raw264.7细胞和Ecv304细胞破碎液中检测到丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸D、紫草酸、迷迭香酸及丹酚酸B7种丹参中成分,在加药的HL7702细胞破碎液中检测出丹参素、原儿茶醛、咖啡酸及丹酚酸B4种丹参中的水溶性成分。结果显示:细胞破碎液中检测的成分为丹参在靶细胞中有吸收的成分,本方法可用于预测中药中的活性成分。

丹参水提液对小鼠睾丸生精功能及精子DNA损伤的影响

目的探讨丹参水提液对小鼠睾丸生精功能及精子DNA碎片的影响。方法将40只昆明小鼠随机均分为低、中、高浓度、空白对照、阳性对照5组,低、中、高浓度组小鼠每天分别灌胃1 500、3 000、6 000 mg/kg丹参水提液,空白对照组每天灌胃10 mL/kg生理盐水,阳性对照组一次性注射100 mg/kg环磷酰胺,30 d后处死小鼠,分别采用流式细胞术、吉姆萨染色法与染色质扩散法检测睾丸生精细胞周期、早期生精细胞微核率及精子DNA碎片率。结果低、中、高浓度组小鼠睾丸早期生精细胞微核率均低于空白对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。随着丹参浓度增加,低、中、高浓度组睾丸单倍体细胞(1C)比例呈上升趋势,且高浓度组显著高于空白对照组(P<0.05);空白对照、低、中、高浓度组睾丸二倍体细胞(2C)、四倍体细胞(4C)、1C∶2C、1C∶4C比例比较均差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照、低、中、高浓度组小鼠精子DNA碎片率逐渐下降,且高浓度组显著低于空白对照组(P<0.05)。结论丹参水提液对小鼠睾丸生精功能有促进作用,且可减少生精细胞早期染色体畸变与精子DNA损伤。

替代对照品法用于丹参和复方丹参片含量测定的研究

目的:建立HPLC替代对照品法测定丹参和复方丹参片的含量。方法:选取对羟基苯甲酸甲酯作为丹参和复方丹参片含量测定对照品丹酚酸B的替代对照品,在不同的条件下测定替代对照品相对对照品的校正因子,利用校正因子和替代对照品对羟基苯甲酸甲酯进行丹参和复方丹参片中丹酚酸B的含量测定。结果:丹酚酸B和对羟基苯甲酸甲酯进样量分别在0.09～2.71μg(r=1.0000)和0.015～0.45μg(r=1.0000)内与峰面积呈良好的线性关系(n=7),测得校正因子f=5.2884,用替代对照品测定方法测得回收率为100.5%(n=9)。结论:本文首次在高效液相色谱仪上使用替代对照品测定了丹参和复方丹参片中丹酚酸B的含量,结果证明用替代对照品对于丹参和复方丹参片进行药品质量控制是可行的、实用的。

乳疾灵合剂质量标准研究

目的：建立乳疾灵合剂的质量标准。方法：采用薄层色谱法对乳疾灵合剂中白芍、淫羊藿、丹参进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定白芍中主要成分芍药苷的含量。结果：供试品色谱中，在与白芍、淫羊藿、丹参对照药材相应的位置上，分别显相同颜色的斑点；芍药苷检测浓度在80～1280μg／ml范围内与峰面积积分值线性关系良好（r=0．9997），平均回收率为99．4％（RSD=1．8％）。结论：本方法简便、准确，可用于乳疾灵合剂的质量控制。

姜黄素、丹参单体和苦参碱抑制IL-1β诱导下兔RPE细细胞增生的体外实验研究

背景 增生性玻璃体视网膜病变（PVR）是临床上常见的致盲眼病.视网膜色素上皮（RPE）细胞是PVR发生和发展中的关键细胞,研究中药对体外培养RPE细胞的作用及原理对于防治PVR并揭示其发病机制具有重要意义. 目的 研究姜黄素、丹参单体、苦参碱对白细胞介素-1β（IL-1β）诱导的兔RPE细胞增生的抑制效果.方法 取第3～4代体外培养的有色兔RPE细胞,采用透射电子显微镜鉴定细胞结构.采用MTT法检测2.5、5.0、10.0、20.0 μg/L IL-1β培养后24、48和72 h RPE细胞的增生率;并检测5、10、20 μg/ml姜黄素和丹参单体IH763-4以及100、200、400 μg/ml苦参碱对IL-1β诱导RPE细胞增生的抑制率.采用线性回归分析计算各药物的半数抑制率（IC50）剂量.结果 初分离的兔RPE细胞呈球形,细胞中可见大量黑色素颗粒;第4代细胞色素颗粒明显减少,形态更加狭长.免疫细胞化学染色结果显示,细胞角蛋白（AE1/AE3）在细胞质表达呈阳性.透射电子显微镜下可见细胞顶端有大量的微绒毛,细胞间可见连接复合体.不同质量浓度IL-1β组培养后24、48、72 h细胞增生率总体比较差异均有统计学意义（F时间=30.33,P=0.00;F浓度=9.37,P=0.00）;组内相邻培养时间点间细胞增生率比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,同一培养时间点相邻质量浓度IL-1β组间细胞增生率比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.10.0μ,g/LIL-1β培养72 h后细胞增生率达峰值.不同质量浓度姜黄素、丹参单体和苦参碱不同培养时间点细胞抑制率总体比较差异均有统计学意义（姜黄素：F时间=128.75,P=0.00;F质量浓度=334.05,P=0.00.丹参单体：F时间=39.32,P=0.00;F质量浓度=165.57,P=0.00.苦参碱：F时间=267.76,P=0.00;F质量浓度=912.34,P=0.00）.3种药物对RPE细胞的抑制作用均呈明显的剂量和时间依赖性,组内相邻培养时间点间细胞抑制率比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,相邻质量浓度药物组间细胞抑制率的比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）.培养后24、48及72 h,姜黄素的IC50分别为26.77、19.01和9.45 μg/ml,丹参单体的IC50分别为33.72、23.47和12.56μg/ml,苦参碱的IC50分别为570.96、352.25和97.50 μg/ml. 结论 IL-1β可促进RPE细胞增生,10.0 μg/L IL-1β促增生作用最显著;姜黄素、丹参单体、苦参碱均可抑制IL-1β诱导的RPE细胞增生,其抑制作用均呈时间和剂量依赖性,其中姜黄素抗增生作用最强.