砂梨(Pyrus pyrifolia)过敏原蛋白基因(Ppmal)的克隆与表达分析

【目的】分离和克隆梨过敏原蛋白基因Ppmal(Gen Bank登录号为KP008110),探讨其在梨果实发育过程中的功能。【方法】以砂梨品种‘翠冠’[Pyrus pyrifolia(Burm.f.)Nakai]为试材,在盛花期后30 d对植株果柄进行涂抹赤霉素处理,利用同源克隆和RACE方法克隆目的基因全长序列,并通过实时荧光定量技术和半定量技术分析该基因在梨不同组织以及梨果实发育过程中的表达变化。【结果】Ppmal的全长是906 bp,含有480 bp的开放阅读框(ORF),编码159个氨基酸,预测的蛋白质相对分子质量为17.56 k D,等电点为5.62。生物信息学分析显示该基因没有信号肽序列,没有跨膜结构域,具亲水性。与其他物种的过敏原蛋白基因核苷酸序列同源性超过75%,与苹果和西洋梨编码的氨基酸序列同源性分别高达97.48%和96.23%,进化树分析表明该基因与苹果的进化关系最近。同时,定量结果显示经过赤霉素处理后的果实中该基因的表达量随着果实的生长发育呈现先降低后升高的趋势,并且具有组织差异表达的特点,其表达量在叶片中最大,其次是嫩叶,再次是花,枝条最低。【结论】获得梨Ppmal基因全长,对该基因在砂梨品种‘翠冠’发育过程中的表达分析显示,Ppmal受到赤霉素的调控,并在砂梨果实膨大期发生上调表达。

苹果梨花芽分化期几种酶活性的变化

对‘苹果梨’花芽分化各时期叶片中过氧化物酶 (POD)、吲哚乙酸 (IAA)氧化酶、蔗糖酶和过氧化氢酶 (CAT)活性进行研究 ,前三者在花芽分化临界期 (7月 2 3日 )达高值 ,而后者处于低值 ;在花蕾、花萼分化期CAT活性增强 ,蔗糖酶、IAA氧化酶、POD活性降低 ;花瓣、雄蕊、雌蕊分化期POD、IAA氧化酶活性增加 ,蔗糖酶变化不大 。

砂梨品种资源有机酸含量及发育期变化

【目的】对70份砂梨品种资源成熟果实中有机酸含量特点(包括47个地方品种和23个选育品种)及其在果实发育期的动态变化(4个品种)进行研究,比较砂梨品种资源间的差异和特点。【方法】用毛细管气相色谱-氢火焰离子化检测器进行糖组分的测定。【结果】(1)砂梨果实中有机酸主要由苹果酸、柠檬酸组成,可明显分为苹果酸优势型和柠檬酸优势型两类。(2)苹果酸含量变化范围在1.30～4.16mg·ml-1,平均值为2.32mg·ml-1,选育品种的苹果酸含量与比率变化幅度较地方品种小,且含量显著高于地方品种;柠檬酸含量变化范围在0.43～6.20mg·ml-1,平均值为2.03mg.ml-1,选育品种的含量与比率都显著低于地方品种。成熟砂梨果实中奎宁酸含量较少,平均0.74mg·ml-1,选育品种与地方品种无明显差异。(3)总有机酸含量随果实增长呈下降趋势,主要是奎宁酸下降幅度很大;苹果酸呈先上升后下降的抛物线变化趋势;所测的两类含酸优势型品种中,初期柠檬酸含量低且没有差异,柠檬酸优势型品种从花后8周开始迅速积累并维持在较高的含量,苹果酸型品种则升幅极少,一直处于较低的水平,两类品种在果实发育中后期差异明显。【结论】砂梨果实存在苹果酸型和柠檬酸型两类品种;选育品种基本上是苹果酸型的,柠檬酸型的基本是地方品种;柠檬酸在苹果酸开始下降时上升。

梨果实源营养液的制备及其对梨树叶片光合特性和果实品质的影响

【目的】探讨梨果实源营养液的制作方法及喷施营养液对梨树叶片光合特性和果实品质的影响。【方法】以黄金梨树生理落果和人工疏除的果实为原料,研究不同的糖量、水量、果实粉碎状态、有无氧发酵和发酵时间等条件,对成品发酵液营养成分的影响。在此基础上,以两年生黄金梨幼树和15年生成年树为试材,设置叶面喷施500倍(Tr1)、200倍(Tr2)、0倍(Tr3、CK)上述营养液为处理,比较不同处理下果树叶片中矿质元素含量、叶片光合特性和果实品质的差异。【结果】制作梨果实源营养液的最佳原料配方为:梨幼果:酵素:红糖:水=50:1:10:35(质量比),最佳发酵条件为果实浆状、有氧条件,室温25—28℃发酵30—45 d。喷施营养液显著增加了幼树叶片的厚度、比叶重、叶绿素含量以及N、P、K、Ca、Fe、Mn、Cu、Zn等矿质元素的含量;显著提高了叶片净光合速率和水分利用效率;显著提高了成年梨树果实的单果重、果形指数、硬度、可溶性固形物含量、可溶性总糖含量、糖酸比和Vc含量。【结论】叶面喷施梨果实源营养液,能显著促进梨树叶片生长,提高叶片矿质营养成分含量,提升叶片的光合性能,进而改善果实品质,尤以叶面喷施200倍营养液效果最佳。这可能与成品发酵液的矿质元素含量较高、养分比例较均衡有关。

臭氧处理对黄花梨果实贮藏品质和生理的影响

【目的】研究不同浓度臭氧水处理对黄花梨整果和鲜切片贮藏品质和生理的影响。【方法】分别采用2.5和5mg·L-1臭氧水和蒸馏水处理黄花梨整果和鲜切片,定期测定贮藏期间两者的生理和品质变化。【结果】黄花梨整果和鲜切片的呼吸强度和内源乙烯释放均呈峰形变化。臭氧处理可显著抑制整果和鲜切片的呼吸强度和内源乙烯释放,但对跃变高峰的出现时间没有影响;显著抑制果实细胞组织中丙二醛(MDA)含量的增加和相对电导率的上升,维持细胞膜的完整性;显著降低整果及其鲜切片褐变指数;延缓果实可溶性固形物(TSS)、可滴定酸(TA)和维生素C(Vc)含量的下降,从而维持较高的贮藏品质。【结论】臭氧处理对黄花梨果实及其鲜切片具有较好的保鲜效果,能维持较好的贮藏品质,2.5mg·L-1臭氧水处理的效果优于5mg·L-1的。

砂梨制汁特性及适应性评价

以56个品种资源为研究试材,综合评价制汁特性并探讨砂梨制汁适应性的评价标准,以期为梨汁加工提供技术支持和理论依据。结果表明,56个砂梨品种单果质量为61.2～552.4g,出汁率为21.1%～68.1%,可溶性固形物为7.8%～16.9%,可溶性糖为4.9%～14.4%,可滴定酸为0.04%～0.78%,糖酸比为13.03～163.50,总多酚为0.096～0.257mg·g-1,褐变度为0.029～0.625。根据制汁相关性状的分布特点,初步提出砂梨制汁的特级标准为单果质量≥400g,出汁率≥60%,可溶性固形物≥12.5%,可溶性糖≥10%,可滴定酸≥0.25%,糖酸比90～120,总多酚0.2～0.25mg·g-1,褐变度≤0.05。从制汁特性的综合评价来看,所检测的多数砂梨品种适宜制汁,其中早生喜水、秋荣、金水、丰水、黄花、今村秋、木瓜制汁性能极佳。

不同植物源有机肥对沙质土壤黄金梨幼树营养效应的研究

【目的】探讨植物源有机肥对沙质土壤干湿交替灌溉条件下黄金梨幼树的营养效应。【方法】以正交设计优选出5种植物源有机肥为试材,测定土壤干湿交替灌溉下盆栽黄金梨幼树根际土壤水分、养分、有机质(OM)含量、植株生长、叶片养分、净光合和蒸腾速率的变化。【结果】植物源有机肥营养效应表现:(1)显著提高土壤干湿交替灌溉下梨幼树根际土壤含水量、降低土壤失水率;(2)显著提高梨幼树根际土壤有效氮、磷、钾含量和有机质含量,平衡土壤养分关系;(3)显著增加株高、干粗度、单叶面积及单位叶面积上干物质质量;(4)显著提高叶片氮、磷、钾含量;(5)各处理和对照相比均不同程度地提高了叶片的净光合速率,调节了叶片的蒸腾速率。【结论】综合分析认为,以黄豆(T4)为材料植物源有机肥对沙质土壤保水,提高株高及叶片净光合速率(Pn)的效果最佳;以沙打旺(T5)为材料的植物源有机肥对沙质土壤养分平衡,提高叶面积及单位叶面积干物质质量效果最佳;以白三叶和紫花苜蓿(T3)为材料的植物源有机肥对沙质土壤养分含量及树体养分含量提高综合效果最佳。

梨采后果实质地与Ca^(2+)、果胶、丙二醛、乙烯动态的关系

以果实质地和贮藏性存在明显差异的黄花、湘南梨为试材 ,对贮藏期果实硬度、Ca2 + 、果胶、丙二醛、乙烯动态进行了研究。研究结果表明 :黄花在贮藏前期Ca2 + 含量高且呈迅速下降的趋势 ,湘南在贮藏初期Ca2 +含量低但相对稳定 ,在贮藏末期有一个迅速上升的过程 ;两品种果实硬度、原果胶含量逐渐降低 ,水溶性果胶、丙二醛 (MDA)含量逐渐上升 ,但黄花在果实贮藏初期的变化幅度大 ,而湘南在贮藏后期变化幅度大 ;两品种在贮藏的第 10天左右出现乙烯峰值 ,黄花的峰值为湘南的 3.0 4倍。还对造成两品种质地及贮藏性差异的原因进行了讨论。

大棚栽培对翠冠梨叶片和果实矿质元素吸收与积累的影响

以翠冠梨为试材,以露地栽培为对照,研究大棚栽培对梨叶片与果实主要矿质元素吸收与积累的影响。结果表明:在果实发育期间,叶片和果实对N素的需求量最大;叶片中Mg,Mn,Zn 3种元素和果实中N元素的平均含量均显著高于对照,叶片与盛花后72 d之后果实中Ca元素含量均显著低于对照。大棚栽培条件下梨树的需肥量要高于露地栽培,生产上应加强肥水管理。

砂梨新品种引种筛选研究

采用合理-满意度和多维价值理论合并规则的评价方法,对2001年从日本、韩国以及国内相关果树研究所引进到湖南栽培的16个砂梨新品种的生长性状、丰产性能、果实品质特征和抗病性等4个方面进行量化比较.结果表明:翠冠、早生喜水、早生黄金、圆黄、晚大新高、爱宕、天皇表现最佳,可大力推广.

黄花梨果实采后软化生理基础

研究了 2 0℃、相对湿度 80 %～ 90 %条件下黄花梨果实采后软化的生理生化变化。结果表明 ,黄花梨属于呼吸跃变型果实 ,采后果肉硬度逐渐下降而出汁率逐渐增加。采后 5d内淀粉酶活性增加 2 .9倍而淀粉含量下降 72 .80 % ,之后淀粉酶活性和淀粉含量逐渐下降。采后原果胶和纤维素含量下降而可溶性果胶含量增加 ,且果肉硬度同原果胶含量和纤维素含量都呈极显著正相关 (P <0 .0 1)。采后 5d内 ,多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和纤维素酶活性变化不大 ,之后迅速上升 ,到采后 15d达到酶活性高峰 ,分别为采收时的 3.0倍和 7.9倍 ,之后酶活性逐渐下降。因而认为 ,黄花梨采后 5d内果肉软化 ,主要是淀粉酶活性的快速上升催化淀粉的快速水解造成的 ,并为呼吸跃变准备能源物质 ;之后果肉软化是由PG、纤维素酶作用引起果胶质、纤维素等细胞壁组分降解所致。

生草栽培对湘东丘陵砂梨园土壤理化性状的影响

为给丘陵果园生草栽培种植模式提供理论依据,在湖南省浏阳市对丘陵砂梨(Pyrus pyrifoliaNakai)园生草栽培区和清耕区(对照)的土壤理化性质进行了对比研究。结果表明,生草栽培在旱季可显著提高0～35 cm土层土壤的含水量,蓄水保墒效果明显;春季可提高30 cm处土层地温,夏季可降低地温2℃左右,同时使土壤容重降低、总孔隙度显著提高;与清耕区相比,生草栽培区0～20 cm土层的有机质、全氮、全磷、全钾含量有所增长,速效磷、速效钾的含量也显著高于清耕区,但速效氮含量有所下降,比清耕区降低了4.34%。

翠冠梨果实、新梢生长动态及相关性观察

以六年生的翠冠梨(Pyrus pyrifolia Nakai)为研究对象,观察了新梢生长与果实生长变化的动态。结果表明:新梢自4月初开始生长,6月初停止生长,发育期64 d,生长期间出现2次生长高峰。果实从4月初座果开始到7月中旬果实成熟,生育期109 d。果实纵横径生长呈S形生长曲线,发育过程中出现3次生长高峰。果实成熟时,横径为7.31 cm,纵径为6.63 cm,果形指数为0.92,果实近圆形,果表底色为绿色,有褐色锈斑,果心小,平均单果重230 g。新梢生长与果实发育关系密切,前期新梢与果实生长养分竞争激烈,中期新梢与果实生长竞争减弱,后期新梢停止生长后,果实膨大迅速并到达生长高峰。

梨果各部分(皮、肉、核)钙运转动态的研究初报

以梨品种“黄花”为试材,研究了不同时期于果实的不同部位引入45Ca后各个部位放射性比活及钙分配比率变化。结果表明:(1)在幼果期,引入果肉的钙可快速向果皮与果核扩散,且向果皮扩散的速率较果核快;引入果核的钙也能向果肉中迅速运转。(2)在膨大期,引入果肉的钙可以向果皮、果核和种子扩散,但速率较幼果期慢;引入果核的钙基本上不向果皮和果肉运转。(3)在成熟期,引入果肉中的钙可以迅速向果皮与果核中积累,引入果核的钙向皮肉的运转微弱。

‘晚大新高梨’树体及果实生长发育特性研究

为深入系统研究‘晚大新高梨’树体及果实生长发育特性，对其幼龄期树干、枝梢生长进行了田间观测，并对生长结果期果台叶、果实及其内含营养成分动态变化进行了测定分析。结果表明：‘晚大新高梨’幼龄期树体生长快，枝条生长势强，幼树干周膨大率前期高后期低，前期达142％，后期降为120％左右；生长结果期1年生长枝生长快、发育好，花芽率平均高达63．15％，结实能力与2、3年枝基本相同。果台叶在盛花后30～150d，SPAD值逐渐增大，变化范围在39．6～48．8；叶中P、K、Mg含量逐渐降低，ca含量逐渐升高，变幅分别为0．058％～0．124％、1．07％～1．48％、0．250％～0．332％、1．10％～2．37％，N含量相对稳定，在2．08％～2．85％。果实在年生长发育过程中，纵、横径生长动态曲线为“W”型，呈“快-慢-快”的趋势；水分日相对变化率与生长动态曲线相似，果实生长快时，水分相对变化牢也高；果实中无机成分含量（鲜重）在幼果期即盛花后45d前变化快，其中K变化最大，幼果期含量高达1．092g／100g，成熟时降为1．035g／100g；果实中总糖变化呈逐渐积累趋势，在成熟采摘时达最高值10．15g／100g；有机酸含量呈“降-升-降”变化，成熟时含量最低。果实最佳采收期在盛花后150～160d。

翠冠梨黑皮病发生规律与AFS基因克隆及其表达研究

以梨黑皮病易感品种翠冠果实为材料,采用RACE技术克隆α法尼烯合成酶基因(PpAFS)的cDNA全长。PpAFS开放阅读框包括1731个碱基,编码576个氨基酸,相对分子质量为66.26×103。由该基因推测的氨基酸序列具有倍半萜类氨基酸的特征结构:RR(X8)W模式(33～43位氨基酸)和DDxxD模式(326～330位氨基酸)。2℃低温贮藏和1MCP(1甲基环丙烯)处理均能抑制翠冠果皮中PpAFS的表达,减缓α法尼烯合成,降低α法尼烯及其氧化产物共轭三烯的含量,进而推迟黑皮病的发病时间并降低其发病率;在两种措施同时应用情况下,翠冠果实采后42d之内不会发生黑皮病。贮藏于室温(28～32℃)或低温(2℃)的翠冠果实,果皮中共轭三烯含量超过2.0nmol.cm-2,黑皮病就会发生,因此推断该值为黑皮病发生的阈值,环境温度只能起延缓或加速达到这一阈值的作用,而与黑皮病的发生并无直接关系。

砂梨新品种‘清香’

‘清香’是以‘新世纪’为母本,浙江省地方品种‘三花梨’为父本杂交育成的早中熟砂梨新品种。杭州地区8月上中旬成熟,果实生育期135d左右。果实长圆型,果皮黄褐色,平均单果280g,大果超过580g,果肉白色,肉质细嫩松脆,化渣,味甜,多汁,可溶性固形物含量11%～12%。

黄花梨CA贮藏中气体成分对果实呼吸和发病率的影响

以黄花梨为试材,通过两年的气调贮藏（CA）试验,找到了该水果的适宜贮藏温度（1-4℃）及相应的O2和CO2气体浓度,它们分别为8%-11%和1%-4%;特别是对O2和CO2含量的动态监测数据及结果的分析对比,得出了反映呼吸变化的呼吸差Rd值与贮藏效果的关系,初步探明：随Rd值的增大,发病率增加,Rd值越小,越利于贮藏;还可通过Rd值的比较反推其临界氧含量.

砂梨多品种矿质营养适宜值的高接比对法研究

根据果树品种间叶片矿质营养适宜值存在稳定差异原理,用砂梨(Pyrus pyrifolia)为试材,并以已知叶片矿质营养适宜值的品种翠冠为对照,在检验同砧高接的砂梨品种间叶片矿质营养存在稳定差异的基础上,高接比对分析5个砂梨品种叶片的矿质营养差异。依各品种元素平均值排序与品种间元素差异显著性与否,及其对照品种与比对品种营养元素平均差值80%置信上限1.28×Std+d,统计推断比对品种的叶片矿质营养适宜范围,修订蜜雪梨与制定黄花、清香、玉冠砂梨品种的叶片矿质营养适宜指标。文章还讨论分析"高接比对法"应用的必备条件与局限性,以及最小可靠样本量n的选定。

几个晚熟砂梨引种栽培试验

为推进湖南省砂梨种植结构的合理化。以4个晚熟砂梨品种:华丰、爱宕、新高、天皇为研究对象,通过对其进行田间生长性状、丰产性调查和果实品质的测定,筛选适合湖南栽培的晚熟砂梨品种。结果表明:4个品种的生长性状表现为华丰生长最旺盛,其它3个品种无差异;分析果实的品质特性表明,天皇>华丰>新高>爱宕;丰产性,爱宕表现最好,其他品种差异不明显;采用多维价值理论进行合成"合理-满意度"的定性分析,爱宕>天皇>华丰>新高。通过定量、定性综合分析表明,天皇综合表现好于其他晚熟品种,可以成为湖南晚熟砂梨主栽品种。