从桑白皮中提取药物成分桑根酮D

开发了从中药桑白皮中提取和精制桑根酮D的工艺路线。用紫外光谱、红外光谱、质谱以及核磁共振谱 (13 CNMR、1HNMR与重水交换 )进行结构鉴定 ,证实其为桑根酮D(sanggenonD)。

桑根酮C、D在碱液中的稳定性研究

本文分别研究了桑根酮C、D在NaOH和Na_2 CO_3 水溶液中的稳定性 ,得到了桑根酮C、D在NaOH水溶液中的降解速率分别为dC/dt=1.30 8× 10 11exp(- 7770 2 .8/RT)CC1.40 1NaOH和dC/dt=5 .75 1× 10 11exp(- 830 37.4 /RT)CC1.40 0NaOH,桑根酮C、D在Na2 CO3 水溶液中的降解速率分别为dC/dt=1.4 14× 10 15exp(- 10 2 918.5 /RT)CC0 .2 955Na_2 CO_3,dC/dt=6 .16 3× 10 14exp(- 10 195 1.3/RT)CC0 .3 0 81Na_2 CO_3。 2 5℃时 ,30min以内 ,桑根酮C、D在 2 .0 %的Na_2 CO_3 水溶液和 0 .5 %NaOH水溶液中的降解率均低于 5 .0 %。这为碱液法从桑白皮中提取桑根酮的工艺过程的开发及工艺参数的设定提供了理论依据。

桑根酮D对肿瘤细胞及移植瘤生长作用研究

研究桑根酮D的体内外抗肿瘤作用。采用的体外实验,桑根酮D溶液体外共培养三种癌细胞(人肝癌HepG2细胞、小鼠黑色素瘤B16F0细胞、小鼠黑色素瘤B16F10细胞),采用SRB法(Sulforhodamine B)检测桑根酮D对肿瘤细胞增殖的影响,计算IC50。对黑色素瘤细胞(B16F0和B16F10细胞)给予不同浓度的桑根酮D,考察其对黑色素含量的影响。采用的体内实验,建立小鼠H22肿瘤模型并分组,三个剂量的桑根酮D分别为12.5、25、50 mg/kg,考察其对肿瘤生长的抑制作用。结果显示,桑根酮D抑制B16F0、B16F10、HepG2细胞增殖,HepG2细胞对桑根酮D最敏感,得IC50为22.61±0.26μmol/L。随着桑根酮D浓度的增加,抑制细胞的作用增强且均有显著性差异(P<0.01)。桑根酮D促进B16F0细胞内黑色素生成,促进细胞分化。12.5、25、50 mg/kg剂量的桑根酮D对小鼠肝癌细胞H22移植瘤抑制率为32.51%~45.72%。给药组小鼠的体重及各脏器指数变化与空白对照组和模型组比较均无显著性差异。得出结论,桑根酮D具有体内外抗肝癌作用和促进肿瘤细胞分化的作用。

桑白皮药材的质量标准研究

目的:建立桑白皮药材质量评价新模式,并以此评价了不同产区、不同采收期桑白皮的质量。方法:采用薄层鉴别,以硅胶G为薄层板,以三氯甲烷-甲醇-甲酸(5∶1∶0.3)为展开剂,在紫外光灯(365 nm)下检视;采用紫外分光光度法测定桑白皮中总黄酮含量;采用高效液相色谱法对桑白皮中桑根酮C、D及1-脱氧野尻霉素(DNJ)的含量进行测定。结果:薄层鉴别中桑根酮D荧光斑点清晰,方法简单、快速;紫外分光光度法中桑根酮C在146.8～734.0μg/mL与吸光度呈良好线性关系(n=5),平均回收率为97.4%,RSD为2.1%(n=6);高效液相色谱法中桑根酮C、D及DNJ在进样量范围内呈良好的线性关系,桑根酮C、D线性范围分别为700～4 000μg、500～3 000μg,平均回收率分别为98.8%、99.1%,RSD分别为2.6%、2.2%(n=6);DNJ线性范围为4.8～96μg,平均回收率为98.9%,RSD为1.7%(n=6)。不同产区、不同采收期桑白皮中各指标成分含量差异明显。结论:建立的定性和定量方法可用于桑白皮药材的质量控制。

桑白皮药材和黄酮提取物中异戊烯基黄酮类成分的鉴别与含量测定

目的:建立桑白皮药材和黄酮提取物中异戊烯基黄酮类成分的鉴别和的含量测定方法。方法:薄层色谱鉴别方法,采用硅胶G薄层板,三氯甲烷-甲酸-甲醇(5∶1∶0.3)为展开剂,紫外灯(365 nm)检视;以桑根酮C为对照,紫外-可见分光光度法测定总黄酮的含量;高效液相色谱法测定桑根酮C、D和桑辛素的含量。结果:薄层色谱鉴别,可见供试品色谱中与桑根酮D相应的荧光斑点;总黄酮测定,桑根酮C在0.0391~0.1564 mg·mL^(-1)浓度范围与吸光度呈良好线性关系,桑白皮药材平均回收率为97.4%,RSD=2.10%(n=5),黄酮提取物平均回收率为96.7%,RSD为1.49%(n=5);高效液相色谱法,桑根酮C、D及桑辛素分别在0.185~1.48μg、0.086~0.43μg、0.233~2.097μg进样量范围内与峰面积值呈良好线性关系,桑白皮药材中桑根酮C的回收率为98.8%,桑根酮D为98.6%,桑辛素为97.8%。RSD分别为2.61%、2.24%、2.06%(n=6)。黄酮提取物中桑根酮C的回收率为97.1%,桑根酮D为98.2%,桑辛素为97.3%;RSD分别为1.85%、2.32%、1.55%(n=6)。结论:该方法简单有效,可准确鉴别和测定桑白皮药材和黄酮提取物中的专属性成分的。

HPLC双波长法同时测定桑白皮水提物中6个成分的含量

目的:建立HPLC双波长法同时测定桑白皮水提物中桑皮苷A、绿原酸、单宁酸、桑根酮D、桑酮G、桑根酮C等6个主要成分的含量。方法:色谱柱为Phenomenex Gemini C18(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈为流动相A,0.2%甲酸水溶液为流动相B,梯度洗脱;检测波长:270 nm(单宁酸、桑根酮D、桑酮G、桑根酮C)、320 nm(桑皮苷A、绿原酸);柱温:30℃;流速:1.0 mL·min^(-1);进样量:20μL。结果:桑皮苷A、绿原酸、单宁酸、桑根酮D、桑酮G、桑根酮C分别在3.24~647.20μg·mL^(-1)、3.22~643.60μg·mL^(-1)、2.50~588.80μg·mL^(-1)、3.28~656.80μg·mL^(-1)、3.19~637.20μg·mL^(-1)、3.10~619.60μg·mL^(-1)质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r>0.999);加样平均回收率分别为99.18%、99.06%、98.96%、98.76%、98.99%、98.90%(n=9),其RSD分别为0.45%、0.33%、0.59%、0.36%、0.47%、0.49%。结论:该方法的准确度、重复性、耐用性均良好,适合用于桑白皮水提物中桑皮苷A等6个主要成分的定量测定。