三七及其混淆品的HPLC指纹图谱鉴定

目的 建立三七及其混淆品的指纹图谱鉴定方法。方法 采用 HPL C方法 ,测定三七、人参、西洋参、姜状三七、三七不同部位及其 2种混淆品的指纹图谱。结果 三七与人参、西洋参、姜状三七及其 2种混淆品的指纹图谱有明显区别 ,三七不同部位也有差异。结论 HPL C皂苷指纹图谱鉴别三七及其混淆品具有重复性好、特征性强、方法简便等特点 。

三七总皂苷抗炎作用机制的实验研究

以角叉菜胶 (Car) 2 5 mg/kg sc诱导大鼠气囊滑膜炎为模型 ,分别采用 L owry法、试管稀释法、硫代巴比妥酸分光光度法 ,观察了三七总皂苷 (Pn S)对气囊滑膜炎渗出液中蛋白含量、白细胞数量及脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量的影响 ,此外 ,采用细胞色素 C还原法及放射免疫分析法 ,进一步观察了 Pn S对渗出液中中性粒细胞(Neu)释放超氧阴离子 (O÷2 )及其胞内 c AMP含量的影响。结果发现 :Pn S 6 0 ,12 0 ,2 40 m g/kg 3个剂量组均能剂量依赖性地抑制 Car诱导的白细胞游出和蛋白渗出 ;显著降低 MDA含量、抑制 Neu释放 O÷2 ;但能升高 Neu内c AMP含量。提示 Pn S对大鼠气囊滑膜炎具有明显抗炎作用 ,其抗炎机制与升高 Neu内 c AMP从而抑制氧自由基生成。

HPLC-ELSD及紫外分光光度法测定三七中皂苷的含量

采用反相高效液相色谱蒸发激光散射检测器测定三七中人参皂苷 Rg1 的含量。色谱柱为 CL C- ODS (6 .0mm× 15 0 m m) ,流动相为乙腈 -水 (30∶ 70 ) ,蒸发激光散射检测器。定量方法简单 ,准确。回收率为 10 0 .5 0 % ,RSD为 1.82 %。并用紫外分光光度法测定了三七中总皂苷的含量 ,结果和 HPL C法基本一致 ,说明该方法定量准确 ,回收率为 10 1.5 0 % ,RSD为 1.44 %。结论认为两方法均可以控制三七的质量。

三七总皂苷对TNF、NO含量的影响及其机制研究

：采用ｓｃ角叉菜胶（Ｃａｒ）２５ｍｇ／ｋｇ复制大鼠背部气囊滑膜炎模型。白细胞计数、蛋白含量分别用试管稀释法和Ｌｏｗｒｙ法测定。酶联免疫吸附分析法、Ｒｉｖａｎｏｌ法和Ｆｕｒａ－２荧光分析法分别用于测定灌洗液中ＴＮＦ、ＮＯ含量以及中性粒细胞胞内游离钙（Ｎｅｕ－［Ｃａ^（２＋）］_ｉ）水平的变化。结果显示：三七总皂苷（ＰｎＳ）６０、１２０、２４０ｍｇ／ｋｇ ３个剂量组均能一定程度地降低灌洗液中白细胞数、蛋白含量、ＴＮＦ及 ＮＯ含量；与此同时，抑制 Ｎｅｕ－［Ｃａ^（２＋）］_ｉ水平的升高，其抑制率分别为： ９．２％、３４．３％及３９．２％。提示ＰｎＳ具有良好抗炎活性，其机制与抑制灌洗液中炎性细胞因子ＴＮＦ及ＮＯ水平的升高有密切关系，而抑制Ｎｅｕ－［Ｃａ^（２＋）］_ｉ水平的升高则是ＰｎＳ抑制炎性细胞因子含量升高的重要分子机制之一。

珠子参皂苷合成途径3个关键酶基因CAS、DS和β-AS时空表达分析

旨在明确环阿屯醇合成酶(CAS)、达玛烯二醇合成酶(DS)和β-香树酯合成酶(β-AS)基因在珠子参中的时空表达情况及其与总皂苷含量的关系。以珠子参叶、茎、花和根状茎为材料,采用实时荧光定量技术检测了3个酶基因在不同时期的表达情况,并分析了基因表达与总皂苷含量之间的关系。CAS、DS和β-AS均在珠子参地上部分高表达,在根状茎中低表达;5—9月间CAS在根状茎中的表达呈现出"高—低—高"的趋势,而DS和β-AS则表现出相反的趋势;珠子参总皂苷含量变化呈"S"型曲线,其前期含量与DS和β-AS的表达呈正相关关系。推测珠子参皂苷最初和主要的合成部位为叶,根状茎可能是后期部分皂苷合成的场所。

珠子参药材中皂苷类成分的薄层色谱及HPLC特征图谱研究

目的:建立和完善珠子参药材的薄层色谱及HPLC特征图谱鉴别方法。方法:采用薄层色谱法鉴别珠子参药材中皂苷类成分;采用HPLC法对同一产地不同地块的10批次珠子参药材皂苷类成分进行指纹图谱分析,选用Waters XTerra MS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,分析时间为55 min,检测波长为203 nm。结果:珠子参药材的薄层色谱中皂苷类成分分离度好,斑点清晰,专属性强,同时建立了珠子参皂苷类成分的HPLC特征图谱方法。结论:薄层色谱及HPLC特征图谱方法稳定、可靠、重复性好,为珠子参药材的质量控制提供了科学依据。

珍稀药用植物珠子参的转录组测序及分析

药用植物珠子参的根茎在中国西南区域已有上千年的药用历史,三萜皂苷为珠子参最主要的活性成分。为了探索珠子参根茎中皂苷物质生物合成的分子基础,该文采用Illumina Hi Seq 2000高通量测序获得珠子参根茎的转录组数据;使用Trinity和TGICL软件实现Unigene的de novo拼接;基于BLAST完成Unigene的蛋白功能注释、KOG功能注释、GO分类和KEGG代谢通路分析。最终获得了短读序15.6 Gb,通过de novo拼接注释得到Unigene 62 240个。研究发现,珠子参根茎部表达的19个Unigene与三萜碳环骨架合成相关;69个Unigene与介导三萜碳环骨架的氧化和羟基化等修饰的CYP450相关,18个Unigene与负责三萜碳环骨架的糖基化的糖基化转移酶相关。该研究发现的三萜皂苷合成相关候选基因对于阐明珠子参三萜皂苷合成方式研究提供了重要的基础。

珠子参叶化学成分研究

研究珠子参叶的化学成分。采用硅胶，Sephadex LH-20，ODS柱色谱和半制备型高效液相色谱等方法进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据分析鉴定了7个化合物的结构5，7．二羟基-8-甲氧基黄酮（1）、人参皂苷Rs2（2）、西洋参皂苷R1（3）、人参皂苷Rs。（4）、三七皂苷Fe（5）、人参皂苷Rd：（6）和gypenosiden IX（7）。化合物1为首次从人参属植物中分离得到，2—7均为首次从该植物中分离得到。