A New Nitro Alkaloid from Corydalis saxicola Bunting

A new nitro tetrahydronprotoberberins alkaloid, 1-nitro-apocavidine was isolated from Corydalis saxicola Bunting. The structure was established by spectroscopic methods.

民族药岩黄连生物碱提取与分离工艺研究进展

岩黄连是我国民族药材之一,广泛应用于医药行业,有较长的使用历史。生物碱是岩黄连主要活性成分,具有清热解毒、消炎止痛、抗病毒、抗氧化、抗肝硬化及纤维化等多种药理活性作用。随着提取、分离技术的飞快发展,开发利用岩黄连的活性成分已成为近年的研究热点。通过梳理文献信息,综述岩黄连中生物碱的提取、分离与鉴定方法。目前,岩黄连生物碱的提取方法可归纳为乙醇提取法、盐酸-甲醇提取法、甲醇提取法和氯仿提取法,其中乙醇提取法、盐酸-甲醇提取法最为常用;分离方法包括色谱法、有机试剂萃取法、沉淀法、结晶法和树脂吸附法;鉴定方法有薄层色谱法及紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振光谱等波谱法,但目前一些较为先进的提取、分离方法未见应用于岩黄连生物碱的生产。通过综述岩黄连生物碱提取与分离工艺研究进展,旨在为保护、研究与合理开发利用岩黄连药材提供参考依据。

杀菌与苗龄协同作用对岩黄连假植苗成活率和生长势的影响

【目的】探明岩黄连假植过程中杀菌与苗龄协同作用对其成活率和生长的影响,为岩黄连高效假植生产提供理论依据。【方法】以岩黄连幼苗为试验材料,研究杀菌与不同假植苗龄(真叶数2片、3片、4片、5片和6片)对黄连假植苗成活率和生长势的影响。【结果】各苗龄试验组杀菌处理较未杀菌处理的假植苗成活率显著(P<0.05)提高7.10~42.75百分点,平均提高26.07百分点;是否杀菌处理对相同苗龄假植苗各生长指标的影响差异均不显著。真叶数与假植苗成活率呈显著正相关,幼苗真叶数为3~6片且经杀菌处理黄连假植苗的死苗率≤10%;杀菌处理下苗龄(真叶数)与假植苗的根重(0.63)、根粗(0.73)、叶绿素相对含量(0.55)和地上部分重量(0.69)呈显著正相关,适宜生长的真叶数为3~6片。通过全株相对生长势指数(RGI)分析,真叶数与岩黄连假植苗全株RGI呈显著正相关,进一步确定岩黄连幼苗最适宜假植苗龄为4片真叶期。【结论】4片真叶期岩黄连假植苗经杀菌处理后的成活率和生长最佳。

覆膜和遮阴对岩黄连生长及产量的影响

通过探索岩黄连对覆膜和光照的需求,为昭通地区岩黄连高效栽培提供技术指导。以岩黄连幼苗为试验材料,对不同覆膜处理(覆膜、未覆膜)和遮阴度处理(0%、30%、50%、70%、90%)下岩黄连的生长及产量进行测定,并进行综合评价。结果表明,覆膜处理的平均移栽成活率达到94.44%,比未覆膜处理组提高9.67%。覆膜处理的全株鲜重、全株干重分别达到0.728、0.150 kg/m^(2),比未覆膜处理组分别提高65.45%、40.59%。50%遮阴度处理的全株鲜重、全株干重、根鲜重、根干重、株高、蒴果长度、花序数、蒴果数、种子数均达到最大值。通过逐步回归分析和通径分析发现,株高、蒴果数、蒴果长度、花序数是种子数的决定性因素,且对种子数的正相关作用依次增强。综合分析,覆膜和50%遮阴度对岩黄连的移栽、生长和产量最佳,研究结果可为昭通地区岩黄连高效栽培提供理论依据。

岩黄连化学成分

目的：研究岩黄连（Corydalis suxicola Bunting）的化学成分。方法：采用、硅胶低压柱层析、制备性薄层层析和重结晶等方法进行分离纯化，根据化舍物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果：从岩黄连中分离得到14个化舍物，分别为：去氢岩黄连碱（dehydrocavidine，1）、黄连碱（coptisine，2）、齐墩果酸（oleanolic acid，3）、刺檗碱（oxvacanthine，4）、胡萝卜苷（daucosterol，5）、别隐品碱（allocryptopine，6）、β-谷甾醇（β-sitosterol，7）、白桦脂醇（betulin,8）、环桉烯醇（cycloeucalenol，9）、白桦脂酸（betulinic acid，10）、β-香树脂醇乙酸酯（β-amyrinacetate，11）、小檗碱（berberlne，12）、四氢掌叶防己碱（tetrahydropalmatine，13）、巴马汀（palmatine，14）。结论：化合物3—11、14为首次从该植物中分离得到。

岩黄连中生物碱的分离和结构鉴定

目的对中草药岩黄连中的生物碱类成分进行研究。方法运用高效制备液相色谱技术对岩黄连总碱进行分离纯化,通过波谱数据结合理化性质对所得化合物进行结构鉴定。结果从岩黄连总碱中分离得到6个单体生物碱,分别是去氢碎叶紫堇碱(1)、脱氢甲卡维丁(2)、药根碱(3)、脱氢卡维丁(4)、盐酸巴马汀(5)和盐酸小檗碱(6)。结论药根碱为首次从岩黄连中分离得到。

岩黄连引种栽培研究

岩黄连 ( Corydalis saxicola Bunting)为石山特有的多年生草本药用植物 ,局限分布裸露石山 ,生于石缝、石穴 ,资源稀少且濒于枯竭。通过近四年的引种栽培研究 ,表明其对丘陵区酸性土壤亦有较强的适应性 ,能正常生长发育 ,种子发芽率可达 4 0 %～ 50 % ,药材产量 (干品 ) 90 0～ 12 0 0 kg/hm2 。报道了其生物学特性和主要的栽培技术。

分光光度法测定岩黄连不同部位总生物碱的含量

目的建立一种简单快速的方法来测定岩黄连总生物碱含量,为岩黄连质量控制提供依据。方法采用氯仿超声提取岩黄连不同部位样品,依据酸性染料比色法的原理,以盐酸小檗碱为对照,溴甲酚绿为指示剂,在416 nm波长下比色测定样品中总生物碱含量。结果吸光度值与生物碱含量线性关系良好(r=0.999 1);回收率为101.91%,RSD为1.75%;测定结果在3 h内稳定,RSD为1.09%;岩黄连根部生物碱含量最高,达到48.77 mg/g,叶和夹果其次,花和茎中最低。结论该测定方法简便可靠,可用于岩黄连质量控制;部位不同总生物碱含量也不同。

岩黄连注射液的高效液相色谱质谱联用指纹图谱研究

目的建立岩黄连注射液的指纹图谱。方法色谱部分采用高效液相色谱梯度洗脱法,色谱柱为Kromasil10010C18柱(250mm×4.6mmID,5μm);流动相为乙腈和水;流速为0.5mL·min-1;在254nm波长下进行分析。质谱部分采用电喷雾离子阱质谱分析,正离子扫描方式。结果通过LC/MS对其中的11种主要成分进行了指认,LC/UV对其中的2种成分进行了定量评价。结论所建指纹图谱能体现岩黄连注射液的特点,相似度评价和方法学考察结果良好,可用于质量控制及定量测定。

利用光纤光谱仪量化和分析鸟类的卵色

在国内首次利用光纤光谱仪对乌卵的颜色进行量化和分析。通过对灰林鸥（Saxicola ferrea）和矛纹草鹛（Babax lanceolatus）2种鸟的卵色300～700nm的光谱测量，表明这2种鸟除蓝色色度外，二者卵色在亮度、绿色、黄色以及红色色度上均存在显著差异。灰林鸥和矛纹草鹛卵色的可见光反射光谱反射比值呈现很相似的平行关系，拥有共同的高峰和低峰；而其卵色的紫外光部分呈现从差异大到差异小的变化。用主成分分析光谱的反射和形状，结果对于灰林瞎和矛纹草鹛，前3个主成分分别解释了99．9％和99．8％的光谱变量，其中代表鸟卵亮度的第1主成分分别解释了93．7％和89．3％的变量，代表卵色饱和度的第2主成分分别占总变量的5．5％和9．1％。利用光纤光谱仪对鸟卵的颜色进行定量分析，可为鸟类的区系分类、系统进化和行为生态学等方面的研究提供更客观和科学的数据，同时也拓展了新的研究领域和视角。

制备色谱系统从岩黄连中分离岩黄连碱

目的采用制备色谱系统从岩黄连中分离纯化其活性单体岩黄连碱,建立其纯化工艺和技术。方法用醇-酸水-氯仿的方法从岩黄连中提取出总生物碱,然后采用制备色谱系统AKTA Exp lorer 100从中分离出岩黄连碱。结果产品经HPLC检测质量分数达99%以上。结论该方法先进,重复性好,可用于分离纯化岩黄连碱。

岩黄连提取物主要药效学及急性毒性试验

目的:研究岩黄连提取物与主治功能相关的主要药效学指标及安全性。方法:通过岩黄连提取物对四氯化碳和对乙酰氨基酚所致急性肝损伤的保护作用,对大鼠胆汁流量、免疫功能的影响进行了研究,同时进行急性毒性试验。结果:岩黄连提取物大剂量能明显减轻肝组织受损程度,对对乙酰氨基酚所致的急性肝损伤也有一定的保护作用,能明显提高细胞吞噬功能;岩黄连提取物的LD50为298.5mg.kg-1。结论:岩黄连提取物有显著的保护肝脏等作用,且毒性较小。

不同外植体类型诱导岩黄连愈伤组织和再分化的初步研究

为探讨不同外植体对岩黄连在组织培养中愈伤组织诱导和植株再生的影响,从而筛选出较适合岩黄连组织培养的外植体材料,为建立岩黄连无性繁殖体系提供参考。以岩黄连的茎尖、茎节(带侧芽)、叶柄、叶片为试验材料,采用不同方式进行消毒,并接种于不同配方培养基上进行培养。结果表明:岩黄连不同类型外植体在诱导愈伤组织和植株再生上有较大的差异,叶柄和叶片的愈伤组织诱导率明显高于茎节和茎尖,其中叶片诱导率最高、为46.67%,而茎尖愈伤组织的再分化率最高、为66.7%。叶片为岩黄连诱导愈伤组织较好的外植体材料,茎尖较适合于诱导岩黄连植株再生。

不同产地岩黄连中总生物碱和脱氢卡维丁的比较研究

目的建立岩黄连中总生物碱和脱氢卡维丁的含量测定方法,并探讨不同产地岩黄连二者含量。方法以脱氢卡维丁为对照,分光光度法测定总生物碱含量;RP-HPLC法测定脱氢卡维丁含量,以Lichrosopher-C18柱为分析柱,0.01mo1/LKH2PO4水溶液(用磷酸调pH=3)-乙腈(75∶25)为流动相,检测波长347 nm,柱温30℃,流速1.0 ml/min。结果广西和贵州产的岩黄连药材总生物碱和脱氢卡维丁含量较高,且广西产的药材两者含量较稳定。结论所建立的方法操作简便快速,结果准确可靠。测定的不同产地样品中,以广西产的药材质量较好且稳定。

大孔吸附树脂分离岩黄连总生物碱的研究

利用大孔吸附树脂分离岩黄连中的总生物碱,采用静态和动态吸附-解吸附方法,以总生物碱和脱氢卡维丁含量为指标,考察了6种大孔吸附树脂对岩黄连总生物碱的吸附能力,其中D101型大孔吸附树脂的比吸附量和比洗脱量均较高。优化后的提取工艺为:上样药液原药材浓度0.2g/ml,吸附流速为2BV/h,解吸附溶剂为60%乙醇(3BV),所得岩黄连提取物中总生物碱含量大于60%。

不同干燥方法对岩黄连中脱氢卡维汀及总生物碱含量的影响

目的:研究探讨不同干燥方法对岩黄连药材不同部位(根、茎、叶、花序)中主要有效成分脱氢卡维汀及其总生物碱含量的影响。方法:对不同干燥方法所得岩黄连药材不同部位中脱氢卡维汀(HPLC法)和总生物碱(紫外分光光度法)的含量进行测定和统计分析。结果:与传统干燥方法(阴干、晒干、60℃烘干)相比,常温真空干燥法和真空冷冻干燥法所得岩黄连药材中脱氢卡维汀含量相对较低,而阴干法所得药材中脱氢卡维汀的含量较高,其中根和花序中脱氢卡维汀含量最高,分别为冻干法所得药材的相应部位中含量的3.4倍和2.2倍。不同干燥方法对药材各部位中总生物碱含量的影响与对脱氢卡维汀含量的影响基本一致。结论:岩黄连采收后,干燥方法对所得干燥药材中脱氢卡维汀及总生物碱的含量有较大影响,以阴干法所得药材中二者的含量最高。

岩黄连规范化种植标准操作规程(SOP)

该操作规程明确规定了岩黄连的种质特征、产地环境、种子标准、育苗技术、栽培技术措施、采收加工、外观品质、成分含量、农药残留以及包装、储运方法等。基地生产应用表明：生长一年采收，平均每株鲜重0．2～0．3kg平均每株产品约0．02～0．03kg；产品以干燥品计岩黄连总碱含量茎叶部不低于0．1％、根部不低于0．2％；产品各项卫生质量均达到国家相关规定。

反相高效液相色谱法测定岩黄连药材中脱氢卡维汀的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定岩黄连药材中脱氢卡维汀的含量,并用该方法测定不同采收时间、不同部位岩黄连药材中脱氢卡维汀的含量。方法:采用 Phenomenex Gemini-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.02mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(74:26),二元等度洗脱系统;流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长346 nm;柱温为室温。结果:脱氢卡维汀浓度在8.4～84μg·mL^(-1)范围内线性良好,回归方程为 Y=8.550×10~4X-1019(r=0.9998),低、中、高3个加入量的平均回收率分别为101.3%,102.0%,105.3%;RSD 分别为2.8%,2.3%,2.4%;不同采收时间岩黄连全草中脱氢卡维汀的含量为1.72%～2.07%,在根、茎、叶、花中的含量分布为花>根>叶>茎。结论:本方法简便、准确,重复性好,适用于岩黄连药材的质量控制研究。

岩黄连药材的提取工艺研究

目的正交实验优选岩黄连药材的最佳提取工艺。方法以岩黄连中总生物碱、脱氢卡维丁的含量为指标,比较乙醇和酸水两种不同提取溶媒以及回流、渗漉两种不同提取方法,采用L9(34)正交设计,对影响岩黄连提取工艺中的溶剂浓度、溶剂用量、提取时间、提取次数等4个因素进行优化筛选。结果乙醇提取优于酸水提取,回流法提取效果优于渗漉法。醇提最佳工艺条件为:用75%乙醇提取,每次加醇量10倍,提取3次,每次提取时间2h。结论优选得到的工艺简便、稳定、可行。

高速逆流色谱法分离岩黄连中的生物碱类成分

目的:从岩黄连的粗提物中快速分离生物碱类成分。方法:采用高速逆流色谱技术,以正丁醇-乙酸乙酯-水-甲酸(5∶1∶5∶0.01)和正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(5∶5∶1∶9∶0.05)作为两相溶剂系统分离岩黄连中的主要生物碱。结果:经过连续三次色谱分离,从岩黄连的正丁醇粗提物(300 mg)中得到6个纯度较高的生物碱,分别为:scoulerine(3.6 mg,质量分数:71%)、isocorydine(9.2 mg,质量分数:92%)、dehydrocheilanthifoline(5.5 mg,质量分数:85%)、dehydrocavidine(7.5 mg,质量分数:76%)、palmatine(20.4 mg,质量分数:90%)、berberine(20.9 mg,质量分数:97%)。结论:采用高速逆流色谱法制备分离岩黄连中的生物碱,省时、方便、产物得率和纯度较高。