注射用水及腺病毒中阶输注对豚鼠听力的影响

目的观察注射用水和腺病毒中阶输注后对豚鼠听力的影响是否存在差别。方法将健康花色豚鼠16只分为A组7只和B组9只,通过耳蜗侧壁打孔中阶入路将注射用水(A组)和腺病毒(B组)分别注入内淋巴间隙。术后2周,通过基底膜铺片观察毛细胞损害情况,通过听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测其阈值变化情况。结果注射用水组ABR阈移为(35.00±12.91)dB SPL,而腺病毒组ABR阈移为(33.33±11.69)dB SPL,两者间差异无统计学意义(t=-0.21,P=0.837)。基底膜铺片鬼笔环肽染色显示注射用水和腺病毒对毛细胞损害的范围和程度没有明显差别,都表现为朝向灌注的方向毛细胞损失严重,而在灌注的反方向上损失轻微。结论向豚鼠耳蜗内淋巴间隙中输注的药物成分对其听力造成的影响在2周时没有差别,损害只与灌注的机械性损伤有关。

腺病毒载体经豚鼠耳蜗中阶导入内淋巴系统的实验观察

目的探讨经豚鼠耳蜗中阶将腺病毒载体导入内淋巴系统的方法。方法 100只豚鼠采用颈前切口,暴露耳蜗,在中阶外侧壁钻一小孔,微电极插入中阶将腺病毒载体经耳蜗中阶导入内淋巴。观察手术对豚鼠的影响和术后感染情况;应用携带绿色荧光蛋白的腺病毒作为指示药物观察注入的位置和效果。结果大多数豚鼠手术后可以长期存活。病毒可以进入内淋巴,但同时外淋巴也有病毒进入。结论经豚鼠耳蜗中阶将腺病毒载体导入内淋巴系统是有效和可行的。

耳蜗中阶记录总和电位（SP）频率选择性的实验观察

用不同频率的短纯音（０．５、１、２、４、８、１０ｋＨｚ）诱发，从豚鼠不同耳蜗圈的中阶记录总和电位（ＳＰ），同时记录蜗内直流电位（ＥＰ），观察其ＳＰ幅度变化，结果提示，在基底圈记录时，ＳＰ的最大幅度出现在８ｋＨｚ，在第二回、第三回记录时，ＳＰ的最大振幅分别出现在４ｋＨｚ、２ｋＨｚ，似说明ＳＰ变化在耳蜗内遵循Ｂｅｋｅｓｙ行波原理进行。

一种单纯毛细胞缺失豚鼠耳聋模型的建立

目的建立一种较为简单的仅造成毛细胞丧失同时具有内淋巴灌注通路的豚鼠耳聋模型。方法利用耳蜗侧壁打孔经中阶进行内淋巴灌注注射用水或腺病毒液来造成正常豚鼠耳蜗毛细胞损害,引起耳聋。通过基底膜铺片phalloidin染色和Dapi核染色来观察基底膜受损的情况。利用脑干诱发电位进行致聋效果的判定。结果内淋巴灌注可以造成早期单纯的毛细胞丧失,而基底膜结构和支持细胞没有发现形态上的改变。并且毛细胞在基底膜上缺失的分布与灌注的方向相关,在灌注方向上损失严重,而逆向的毛细胞几乎没有损伤,同时损害呈现远离灌注部位,程度减轻的趋势。脑干诱发电位click测试阈值变化也与灌注方向一致。结论这种耳聋模型的方法造成了单纯的毛细胞特别是外毛细胞损害,有利于药物的同期灌注,并且较以往的耳聋模型对耳蜗的损害轻。但是造成毛细胞损害的机理尚不明确,可能和膜迷路的压力增加有关。