Silver nanoparticle labeled immunoresonance scattering spectral assay for trace fibrinogen

Silver nanoparticles in size of 8.0 nm was prepared by the trisodium citrate and used to label goat anti-human fibrinogen. In the pH 5.8 Na2HPO4-NaH2O4 buffer solution (PBS) and in the presence of polyethylene glycol (PEG) and KCl, the immune reaction between silver-labeled goat anti-human fibrinogen and fibrinogen took place and led the resonance scattering intensity at 465 nm (I465) to decreasing. The I465 decreased intensity was linear to the fibrinogen concentration in the range from 0.067 to 1.67 μg/mL, with a detection limit of 0.024 μg/mL. This method was applied to determination of fibrinogen in human plasma, with satisfactory results.

免疫散射比浊法检测血清淀粉样蛋白A的性能验证及评价

目的对免疫散射比浊法检测血清淀粉样蛋白A(SAA)的性能进行验证及评价。方法参考美国临床和实验室标准协会(CLSI)相关文件(EP15-A2、EP6-A、C28-A3)对免疫散射比浊法检测SAA的性能(精密度、正确度、线性范围和生物参考区间)进行验证。结果精密度验证:应用Aristo系统进行检测,SAA低值和高值质控品批内精密度变异系数(CV)分别为3.35%、1.91%,批间CV分别为2.54%、3.52%,应用Astep PLUS系统进行检测,低值和高值质控品批内CV分别为2.23%、2.12%,批间CV分别为3.10%、4.09%,结果的变异系数均在试剂厂家声明的范围内;正确度验证:将Aristo系统SAA检测结果与西门子BN ProSpec系统SAA结果进行比对,两者之间差异无统计学意义,进行相关回归分析,相关系数r^(2)=0.992,预期相对偏倚11.79%;Astep PLUS系统与BN ProSpec系统比对结果差异无统计学意义(r^(2)=0.997),预期相对偏倚为5.5%。用两种系统分别对相同来源的血清样本和全血样本SAA进行检测,检测结果均无统计学差异(r^(2)≥0.95),预期相对偏倚分别为7.51%、2.06%。线性范围验证:用Aristo系统检测,血清样本SAA线性范围为2.72~323.48 mg/L(r^(2)≥0.99);用Astep PLUS系统检测,线性范围为2.88~314.00 mg/L(r^(2)≥0.99),均包含厂家声明的范围,线性验证通过;生物参考区间验证:两种系统SAA检测结果均只有1例超过参考区间,符合≤2例超出参考区间的规定。结论免疫散射比浊法检测SAA的性能良好,可用于临床常规检测。

免疫球蛋白G的免疫共振散射光谱分析

在pH7.0Tris-HCl缓冲溶液中及聚乙二醇-20000存在下，羊抗兔IgG与兔IgG的免疫复合物可聚集形成疏水的免疫复合物微粒，在330，400，520nm处有三个共振散射峰，在470nm有一个同步散射峰。IgG浓度在1．33～133．3 μg·mL^-1范围内与470nnm处的散射强度呈线性。借此用于定量分析血清IgG，结果满意。方法检出限为0．99μg·mL^-1.

高血压患者高敏C-反应蛋白及内皮素-1水平变化对脉压差的影响

目的:探讨高血压患者体内高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、内皮素-1(ET-1)与脉压差三者之间的关系。方法:按标准方法测定脉压差,通过免疫散射比浊法检测其血中hs-CRP、放射免疫法测定ET-1的含量,分析三者的关系。结果:在校正了平均血压及其他相关因素后,线性回归分析表明,脉压差与hs-CRP、ET-1均呈正相关。结论:高血压患者的脉压差与hs-CRP、ET-1密切相关,推测炎症可能是增加血压变异性的一个独立危险因素。

肺癌患者血清SAA水平及其临床意义

目的探讨肺癌患者血清淀粉样物质A(SAA)的表达,及在临床中的价值。方法采用免疫散射比浊法检测100例健康对照者及75例肺癌早期患者和53例中、晚期肺癌患者手术前后血清SAA的水平。结果健康对照组血清SAA([6.58±0.52)mg/L]、肺癌组血清SAA([88.36±5.23)mg/L]、肺癌早期组血清SAA([68.88±5.23)mg/L]、肺癌中、晚期组血清SAA([115.56±7.26)mg/L]均显著高于健康对照组(P<0.01),且中、晚期组较早期组升高(P<0.01);肺癌转移组手术前血清SAA水平([121.42±6.89)mg/L]明显高于术后3个月([45.6±3.65)mg/L(]P<0.01);肺癌无转移组手术后3个月血清SAA([21.6.6±2.89)mg/L]也明显较术前([73.82±5.69)mg/L]降低(P<0.01)。结论肺癌患者血清中SAA存在表达异常,测定肺癌患者血清SAA水平可以帮助肺癌临床分期、预后判断和作为病情监测的重要指标。

抗-转铁蛋白-纳米金探针的制备及对转铁蛋白免疫识别的光谱分析

利用碳二亚胺(EDC)将抗-转铁蛋白化学偶联到已修饰了半胱胺的纳米金表面,制备了抗-转铁蛋白-纳米金免疫探针,应用共振瑞利散射光谱,紫外-可见吸收光谱,透射电镜和激光散射等方法对其进行了表征。所制备的纳米探针具有良好的免疫活性。由于抗-转铁蛋白对转铁蛋白抗原具有特异性识别能力,借助免疫纳米探针在470nm处共振瑞利散射信号的放大作用,对转铁蛋白抗原进行特异性识别及免疫分析。转铁蛋白浓度在0.85～33.9×10-10mol.L-1范围内,470nm处共振瑞利散射相对强度与转铁蛋白浓度呈良好的线性关系,检测下限为8.5×10-11mol.L-1。

一种简便灵敏测定C反应蛋白的免疫共振散射光谱分析新方法

在pH6.0的柠檬酸-Na2HPO4缓冲溶液中及PEG-6000存在下,C反应蛋白(CRP)与羊抗人C反应蛋白可聚集形成免疫复合物微粒,在350,390,440 nm处有三个共振散射峰.激光散射法测得免疫复合物微粒的平均粒径为1720.0 nm.在最佳实验条件下,CRP浓度在0.03～1.80μg·mL-1的范围内与390,440 nm处共振散射强度都呈良好的线性关系,其回归方程、相关系数、检出限分别为△I390 nm=306.4c+17.3,△I440 nm=296.0c+10.7;0.9993,0.9996;0.011,0.012μg·mL-1.该方法选择性较好,操作简便,用于人血清中C反应蛋白的测定,结果与免疫透射比浊法结果一致,相对标准偏差在0.90%～4.12%.

基于免疫遗传和蚁群融合算法的散乱点云曲面拟合

对复杂型面物体的曲面拟合方法进行了研究,通过点云数据参数化、基于免疫遗传算法(IGA)的自适应节点计算、反求曲线控制顶点、点云数据分割以及曲面拼接5个步骤来进行曲面拟合。提出了一种基于免疫遗传和蚁群的融合算法,将其应用于曲面拟合中,利用免疫遗传算法的全局搜索能力,来提高蚁群的收敛速度。该算法通过免疫遗传算法的选择、交叉、变异操作、疫苗接种和疫苗选择,并将免疫遗传算法引入到蚁群系统的迭代中,有效地解决了蚁群系统易陷入局部最优和易退化的缺点。采用fender、fandisk、bunny、cow 4个实例,对其3D散乱点云分别采用融合算法、遗传算法(GA)和免疫遗传算法进行曲面拟合,实验表明该融合算法具有很好的收敛速度和全局最优解的搜索能力,通过该算法所拟合的曲面拟合精度较高,相比GA和IGA算法,其拟合精度分别提高18%和11%以上,可以满足复杂型面物体的曲面拟合要求。

氰戊菊酯的免疫共振散射光谱分析

在pH 7.2 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液及聚乙二醇-6000存在下,氰戊菊酯（Fen）与兔抗氰戊菊酯抗体（Fen-Ab）发生免疫反应,形成具有一定疏水性的免疫复合物微粒,在350,390,420,440,480 nm产生5个共振散射峰,其中390 nm处的共振散射峰最强。研究了pH、聚乙二醇-6000、Fen-Ab浓度、免疫反应温度和时间对测定Fen的影响。在最佳条件下,氰戊菊酯（Fen）浓度c在0.20-6.40μg·mL^-1范围内与390 nm处的散射强度ΔIRS呈线性,回归方程、相关系数、检测限分别为ΔIRS=23.05c-1.39,0.997 8,0.07μg·mL^-1Fen。干扰试验结果表明,该法具有较好的选择性。该法用于废水中Fen分析,回收率在92.91%-101.25%之间,相对标准偏差在1.71%-4.80%之间。

免疫透射和免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白及补体的比较

目的:比较免疫透射和免疫散射比浊法测定免疫球蛋白和补体时的准确性、精密度、偏离度及测定范围。方法:采用贝克曼LX-20与DELTA特定蛋白分析仪,分别以免疫透射和免疫散射比浊法,对同一临床标本测定血清中免疫球蛋白(IgGI、gAI、gM)和补体(C3、C4)的含量。结果:两种仪器测定IgG、IgA、IgM、C3、C4准确性、精密度均良好。两法各浓度值测定结果的预期偏差均在可接受范围。结论:贝克曼LX-20应用免疫透射比浊法与DELTA特定蛋白分析仪应用免疫散射比浊法测定免疫球蛋白和补体准确性、精密度均比较好,且散射比浊法优于透射比浊法。

基于性激素-肿瘤免疫微环境研究两种温阳法抑瘤作用机制区别与联系的理论探讨

肿瘤患者存在寒积内生和肾阳亏虚的病机特点,温阳法中的温阳散寒和温补肾阳是治疗肿瘤的2种重要方法;肿瘤的发生、发展与神经内分泌系统和免疫系统的双向调节作用紊乱密切相关,性激素-肿瘤免疫微环境是其中的重要内容。已有研究表明,温补肾阳能调节性激素水平,温阳散寒能提高抗肿瘤免疫功能,因此温阳散寒法可能通过影响肿瘤免疫微环境发挥抑瘤效应并调节性激素水平,温补肾阳法可能通过调节性激素水平继而影响肿瘤免疫微环境产生抑瘤作用。

血清游离轻链检测在肾脏相关疾病中的诊断意义和应用价值

目的定量检测血清游离轻链(serum free light chain,sFLCκ、λ)在慢性肾脏疾病(CKD)中的水平,分析在不同情况下肾损伤时血清游离轻链的变化,探讨其在肾脏疾病中的临床意义和应用价值。方法将慢性肾脏疾病患者分为3组,62例非骨髓瘤性慢性肾脏疾病患者,22例骨髓瘤性肾病κ型患者,12例骨髓瘤性肾病λ型患者,另选取40例健康体检人群作为对照,采用散射比浊法定量检测血清游离轻链(κ、λ)的含量并计算κ/λ,并对结果进行分析。结果 62例非骨髓瘤性慢性肾脏疾病患者sFLCκ和λ,κ/λ比值均升高,与健康对照组比较有显著性差异(P<0.05);22例骨髓瘤性肾病κ型患者sFLCκ和λ,κ/λ比值与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05);12例骨髓瘤性肾病λ型患者的sFLCκ的结果与对照组比较无显著性差异(P>0.05),sFLCλ结果与对照组比较有显著性差异(P<0.05),κ/λ比值下降,与对照组比较亦有显著性差异(P<0.05)。另外,随着CKD分期的进展,血清游离轻链κ、λ进行性地升高,尤其是在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的慢性肾脏疾病中,肾脏功能的损伤对血清游离轻链λ比对血清游离轻链κ的影响更显著。结论血清多克隆游离轻链(sFLCκ、λ)水平检测,尤其κ/λ比值可反映肾损伤程度,当用于多发性骨髓瘤疾病的辅助诊断时,可作为肾损伤情况的评估,提高临床诊断治疗的准确性。在CKD患者肾损伤程度评估中亦具有重要的临床意义。

免疫共振散射分析法测定人血清中痕量脂蛋白(a)

在pH为7.6的Tris-HCl缓冲溶液及聚乙二醇6000(PEG 6000)存在下,羊抗人脂蛋白(a)与脂蛋白(a)发生免疫反应形成疏水性免疫复合物微粒,导致体系的共振散射强度增强,在波长为340 nm处具有较强的共振散射峰。在选定条件下,脂蛋白(a)质量浓度在0.10～2.33μg/mL范围内与340 nm处的散射强度呈良好的线性关系,其回归方程为ΔIRS=110ρ-26.667,相关系数为0.996,检出限为0.067μg/mL。该法简便、灵敏、选择性好,用于人血清中脂蛋白(a)含量的测定,结果满意。

一种测定血清脂蛋白a的胶乳增强免疫共振散射法

在pH为7.2的Trls-Hcl缓冲溶液中,脂蛋白(a)抗体胶乳液与脂蛋白(a)发生免疫反应并在胶乳上聚集,导致体系的共振散射强度增强,在波长为580nm处有较强的共振散射峰。在选定条件下,脂蛋白(a)浓度在0.06～1.40ug.mL-1范围内与580nm处的散射强度呈良好的线性关系,其回归方程为△IRs=325.6-17.8,相关系数为0.996,检出限为0.0063ug.mL-1。用于血清中脂蛋白a测定,仪器简单,操作简便,选择性好,结果满意。

基于金/银纳米三明治结构SERS特性的超灵敏前列腺特异性抗原检测

基于金/银纳米三明治结构的表面增强拉曼散射(SERS)特性,实现了前列腺特异性抗原(PSA)高灵敏度免疫检测,检测结果具有特异性。采用化学还原法制备金、银纳米粒子,用4-巯基苯甲酸(4-MBA)及前列腺特异性抗体(Anti-PSA)链接金、银纳米粒子制备免疫探针,在硅片表面原位生长金、银纳米粒子并链接Anti-PSA制备得到免疫基底。将免疫探针、免疫基底以及PSA组成三明治结构,进行基于SERS特性的免疫检测。实验结果表明,纳米银免疫探针与纳米银免疫基底组成的三明治结构具有最佳的检测效果,PSA的检测灵敏度低至1.8 fg/m L(3.490×10-18mol/L),可应用于前列腺癌症的早期检测与诊断。

气溶胶等效复折射率反演的免疫进化算法

通过Mie散射理论公式构建目标函数,利用免疫进化算法对气溶胶等效复折射率的实部和虚部进行协同优化,据此创新性地提出了气溶胶等效复折射率反演的新途径.基于成都市2017年9～12月逐时的气溶胶散射系数和吸收系数观测数据以及该时段同时次GRIMM180大气颗粒物监测仪的连续监测资料,研究结果表明,气溶胶等效复折射率反演的免疫进化算法不仅是普适的,而且还具有收敛速度快?计算稳定和求解精度高等特点.通过与其它气溶胶等效复折射率反演方法的对比分析,进一步论证了新方法的优势,这为气溶胶等效复折射率演变机理以及气溶胶吸湿性增长模型的后续研究提供了算法保障.

免疫荧光法与免疫散射比浊法测定超敏C反应蛋白的相关性及其在感染中的重要意义

目的探讨分析免疫散射比浊法与免疫荧光法对超敏C反应蛋白(CRP)进行检测后的价值,研究其相关性。方法选取已经确诊的50例各类感染性疾病患者为试验组,另取50名健康人作为对照组,采用免疫散射比浊法和免疫荧光法来同时检测2组血液标本的C反应蛋白含量。结果试验组的C反应蛋白含量(86.3±20.3)mg/L明显高于对照组的C反应蛋白含量(4.3±1.1)mg/L,差异具有统计学意义(P<0.05);而用免疫散射比浊法和免疫荧光法同时检测各组C反应蛋白的含量[(86.3±20.3)mg/L和(85.8±19.4)mg/L;(4.3±1.1)mg/L和(4.3±1.0)mg/L]差异均无统计学意义(P>0.05);试验组患者用免疫散射比浊法和免疫荧光法检测C反应蛋白的阳性率分别为68%和72%,二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论免疫散射比浊法和免疫荧光法来检测各种急性感染性疾病的C反应蛋白差异无统计学意义,但检测C反应蛋白对感染性疾病的诊断及预后具有重要的意义,2种方法各有优缺点,在临床上应根据实际情况进行选择。

妊高症患者血清 CysC，HCY及 mALB 联合检测的临床意义

目的：探讨妊娠高血压综合症患者血清 Cys C，Hcy 及 mAlb 联合检测的临床意义。方法选取2011年6月-2014年6月广西贺州广济医院诊治的92例妊高症患者作为观察组，分为 A，B，C 三组（A 组为 HDCP 患者43例，B 组为轻度子痫前期患者32例，C 组为重度子痫前期患者17例），另选该院同期50例健康产妇作为对照组。测定血清 Cys C，Hcy （采用增强比浊法）以及尿 mAlb（采用免疫散射法），对结果进行统计分析。结果观察组血清 Cys C，Hcy 及尿 mAlb 水平随着肾功能受损害程度的加重而升高，以观察组 C 升高最为显著（F ＝4.567，P ＜0.001）；观察组血清 Cys C，Hcy 及尿mAlb 水平异常检出率随着肾功能受损害程度的加重而升高，以观察组 C 升高最为显著（χ^2＝12.842，P ＜0.001）；三项联合检测指标异常检出率显著高于单项检测（χ^2＝5.869，P ＜0.001），检测敏感度为95.70％，具有显著优势（χ^2＝15.992，P＜0.001）。结论HDCP 患者肾功能血清 Cys C，Hcy 及 mAlb 联合检测结果显著优于单项检测，有利于妊高症肾功能损伤的早期诊断，值得临床推广。

加减玉屏风散治疗紫癜性肾炎现代研究进展

文章通过对近几年国内外有关紫癜性肾炎(HSPN)及加减玉屏风散治疗HSPN临床并结合现代研究的文献资料进行分析,指出目前国际干预HSPN常采用各种免疫抑制剂、皮质类固醇及一些辅助疗法,但取得的疗效一般,而应用加减玉屏风散能够改善HSPN患者生化指标和症状,疗效明显,同时丰富了中医临床治疗HSPN的辨证思路和处方用药,但仍缺乏进一步的疗效及机制挖掘研究。文章对此进行分析探讨,以期深化创新传统方剂应用,推动中医药治疗HSPN研究的发展且为临床辨证选方用药提供新思路。

免疫进化算法反演均匀混合气溶胶吸湿增长因子

通过对大气消光系数进行组分分解,并借助米散射理论,构建了以均匀混合气溶胶吸湿增长因子为唯一变量的目标函数.进一步利用免疫进化算法优化该目标函数,提出了一种针对均匀混合气溶胶吸湿增长因子的反演算法.基于成都市2017年10-12月浊度计,黑碳仪和GRIMM180环境颗粒物监测仪的地面逐时观测资料以及该时段同时次的环境气象监测数据(大气能见度,相对湿度RH和NO2质量浓度),评估了算法的性能及其适用性.结果表明:对所有测试样本而言,反演均匀混合气溶胶吸湿增长因子的免疫进化算法均能快速收敛到全局最优解.建立了成都地区秋冬季均匀混合气溶胶吸湿增长模型,该模型显著提升了环境条件下气溶胶散射系数的模拟精度,其模拟值与实测值之间的平均相对误差仅为12.7%.该反演算法的普适性可为气溶胶吸湿性及其辐射强迫效应的后续研究提供算法保障.