经皮腔内血管成形术血运重建治疗糖尿病严重肢体缺血

目的探讨膝下动脉经皮腔内血管成形术治疗糖尿病患者严重肢体缺血(CLI)的疗效。方法2006年10月—2007年10月对21例糖尿病严重肢体缺血患者采用DEEP球囊行膝下动脉成形术。结果对69条病变血管进行球囊扩张,支架植入12枚,PTA成功率82.61%(57/69),其中2例术后行高位截肢,其余有效。结论经皮腔内血管成形术血运重建可作为治疗糖尿病严重肢体缺血患者的首选治疗方法。

脑缺血过程中B细胞淋巴瘤-2基因家族基因的表达及与细胞死亡的关系

为了了解Ｂ细胞淋巴瘤－２基因（ｂｃｌ－２）家族基因在脑缺血后表达规律及其调节细胞死亡的作用，通过阻塞大鼠双侧颈总动脉和椎动脉建立全脑缺血模型，观察了Ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ及ｂｃｌ－２基因表达变化以及与细胞死亡的关系。在缺血再灌流６ｈ，Ｂａｘ免疫染色增加，２４～４８ｈ达到高峰，ｂｃｌ－ｘＬｍＲＮＡ在２４ｈ后表达下降，ｂｃｌ－ｘＬ蛋白在４８ｈ可见明显降低，并且在缺血敏感神经元Ｂａｘ和ｂｃｌ－ｘＬ表达变化显著，与细胞凋亡发生的部位一致，相反，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和蛋白表达未见明显变化。提示ｂｃｌ－ｘＬ和Ｂａｘ可能参与脑缺血再灌流中神经细胞死亡的调节。

西洋参茎叶皂苷对局灶性脑缺血后大鼠血清中GFAP表达的影响

目的:观察西洋参茎叶皂苷对脑缺血大鼠血清中GFAP蛋白的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,采用酶联免疫法检测西洋参茎叶皂苷(PQS)对大鼠血清中GFAP蛋白表达的影响。结果:PQS能改善神经功能缺损的症状,降低血液中GFAP蛋白的表达情况。结论:西洋参茎叶皂苷对实验动物脑缺血组织具有保护作用,其作用机理可能与星形胶质细胞的内源性保护作用有关。

大鼠失血性休克及再灌注后小动脉的形态学改变

目的:探讨失血性休克和再灌注对大鼠小动脉形态结构的影响。方法:70只大鼠随机分为正常对照组、缺血45min组和缺血再灌注1、3、6、12、24h组,达到各预定时间点后,迅速取大鼠的脑、肾、四肢腓肠肌制作切片,采用光镜和透射电镜观察各组大鼠各组织小动脉内皮、平滑肌细胞的形态学改变。结果:缺血45min组大鼠小动脉轻微损伤,小动脉内皮细胞肿胀,异染色质增多,染色质边积,平滑肌细胞轻微水肿,线粒体肿胀。再灌注后各组损伤加重,小动脉部分内皮坏死、脱落,内皮细胞胞浆内出现空泡,血管平滑肌细胞严重水肿,平滑肌细胞向内膜迁移,线粒体肿胀,空泡样变,核周隙增宽,胞质内可见髓样小体。以再灌注3h损伤最显著,与其它组织相比,脑组织小动脉在缺血及再灌注后不同时点的损伤较轻,再灌注6h后逐渐恢复。结论:失血性休克和再灌注可引起大鼠小动脉内皮、平滑肌细胞损伤。

苏木素—碱性复红—苦味酸染色法对诊断早期心肌缺血的意义

本文应用苏木素-碱性复红-苦味酸染色法(HBFP)对家兔实验性心肌缺血的早期改变及急死案例的尸检材料进行了研究,实验性心肌缺血材料均作电镜观察。结果表明,冠状动脉结扎后15min,缺血心肌显复红色,呈散在分布,与正常心肌对比明显。随缺血时间延长,显复红色之心肌纤维数目增多,缺血区扩大。HBFP 染色法不受常规组织处理及死后自溶的影响,可用于临床病理及法医病理诊断。

螺内酯对缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨螺内酯对心肌缺血再灌注损伤(I/R)时细胞凋亡的影响。方法:30只新西兰家兔随机分为3组:假手术(SHAM)组、缺血再灌注(I/R)组和制备I/R模型前应用螺内酯组(SPI)。测量左心室功能、光镜及电镜观察标本病理形态改变,免疫组化观察Bcl-2和Bax表达,缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡程度。结果:1.I/R组心功能较SHAM组明显下降,SPI组较I/R组改善;2.SHAM组心肌结构完整,I/R组心肌结构损害严重,SPI组心肌结构损害较轻;3.SPI组Bcl-2表达阳性率高于SHAM组与I/R组,I/R组Bax阳性表达率高于SHAM与SPI组;4.TUNEL结果显示,I/R组细胞凋亡程度高于SHAM与SPI组。结论:螺内酯减轻I/R中心肌细胞凋亡程度。

超微细粉小复方等对大鼠心肌缺血/再灌注损伤能量代谢的影响研究

目的:观察具有益气活血通痹作用的中药超微细粉小复方对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法:63只大鼠随机分假手术组(Sham)、模型组(Model)、中粉组(Z)、超微细粉组(X)、煎剂组(J)、麝香保心丸组(SX)等7组,灌胃14天,冠脉结扎60min联合Langendroff灌流120min复制心肌缺血/再灌注模型,采用生化方法检测各组大鼠心肌Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、FFA含量。结果:与模型组相比,益气活血通痹小复方各组均能降低心肌FFA含量(P<0.01),其中以中粉组、超微细粉组效果最佳。中粉组、超微细粉组能升高心肌Na+-K+-ATPase含量、Ca2+-Mg2+-ATPase含量(P<0.01),煎剂组能升高Ca2+-Mg2+-ATPase含量(P<0.05)。结论:益气活血通痹小复方可能通过改善心肌能量代谢减轻心肌缺血/再灌注损伤,以中粉组、超微细粉组效果最佳。

全脑缺血再灌注大鼠脑组织水通道蛋白-4mRNA的表达及药物对其影响

目的观察实验药物对大鼠脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)mRNA表达的影响,探讨芳香开窍药对缺血性中风的作用机理,为临床上运用芳香开窍法提供实验依据。方法按Pulsinelli的4-VO法改良后建立大鼠全脑缺血再灌注模型,采用半定量RT-PCR方法检测大鼠脑组织中AQP-4mRNA表达。结果芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量;模型组AQP-4mRNA表达显著增加,其次是尼莫通组,芳香开窍中药组轻微减少。结论AQP-4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生发展过程,AQP-4抑制剂可减轻脑水肿。尼莫通对AQP-4mRNA表达影响不大,芳香开窍药可降低AQP-4表达,从而减少脑水肿,这可能是其芳香开窍的机理之一。

辛伐他汀预处理对脑缺血再灌注损伤Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:随机将48只雄性SD大鼠分为4组:空白对照组、假手术组、缺血再灌注组和辛伐他汀预处理组。辛伐他汀预处理组在模型制备前用辛伐他汀20mg/kg连续灌胃10d,1次/d;假手术组及缺血再灌注组用相同体积的等渗盐水连续灌胃10d。以线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,于缺血2h再灌注24h后行5分制神经功能评分,并断头取脑分别测定脑梗死体积、凋亡细胞数及Bcl-2、Bax表达。结果:与空白对照组和假手术组比较,缺血再灌注组和辛伐他汀预处理组神经功能缺损较为严重,脑梗死体积增大,凋亡细胞数目增多,Bcl-2、Bax表达增加(均P<0.01)。与缺血再灌注组相比,辛伐他汀预处理组神经功能有不同程度改善,脑梗死体积明显减小,凋亡细胞数及Bax表达降低,Bcl-2表达增高,比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:辛伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与辛伐他汀上调脑组织中Bcl-2、下调Bax表达,抑制细胞凋亡有关。

蜂胶黄酮对小鼠缺血再灌注后心肌线粒体损伤的保护作用

目的:探讨蜂胶黄酮对小鼠力竭游泳后心肌线粒体缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将70只小鼠随机分为安静组(A组)、力竭对照组(B组)和力竭给药组(C组)。A、B组常规喂养,C组灌喂蜂胶黄酮液。B、C组进行4周递增负荷游泳训练,并于最后一次训练至力竭,测定其安静时、力竭后即刻、6小时和24小时心肌线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总-抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、Ca2+、磷脂酶A2(PLA2)等指标。结果:缺血再灌注后B组小鼠心肌线粒体中抗氧化物质(SOD、GSH-Px、T-AOC)活性显著下降,MDA含量、PLA2活性显著升高,心肌钙离子明显超载,尤以力竭运动后6h最为显著;而补充蜂胶黄酮的C组与B组相比,抗氧化物质活性显著提高,自由基MDA含量、PLA2活性显著下降,钙离子明显减少。结论:蜂胶黄酮对缺血再灌注损伤的心肌线粒体有积极的保护作用。

辛伐他汀对缺血再灌注损伤大鼠肾脏的保护作用

目的探讨辛伐他汀(Simvastatin)对肾缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用。方法建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,随机将动物分为Simvastatin组,缺血再灌注(IR)组,锌原卟啉(ZnPP)组,假手术(sham)组。测定各组大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的含量,并进行肾组织光镜形态学观察和免疫组化分析血红素加氧酶-1(HO-1)的表达情况。结果 IR组和ZnPP组BUN、Cr值升高,HO-1的表达少或几乎不表达,肾组织结构紊乱;Simvastatin组除HO-1表达明显增多外,还显著逆转上述改变,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Simvastatin可上调HO-1的表达,减轻大鼠肾脏的IRI。

XRCC1与脑缺血再灌注DNA单链断裂

目的 观察脑缺血再灌注损伤中XRCC1表达、DNA单链断裂、神经元凋亡的变化 ,探索它们的关系。方法 应用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 :免疫组化检测XRCC1蛋白表达 :单细胞凝胶电泳检测细胞DNA单链断裂 :流式细胞检测细胞凋亡。结果 XRCC1在缺血再灌注 10min后即出现降低 ,1h后整个大脑中动脉供血皮质和基底节区XRCC1进一步下降 ,一直持续到 4 8h。单细胞凝胶电泳示缺血再灌注 10min基底节区出现DNA单链断裂 ,12h达到高峰 ,4 8h仍有DNA单链断裂。流式细胞显示缺血再灌注 4h出现大量细胞凋亡 ,2 4h达到高峰 ,4 8h仍保持较高的水平。结论 在脑缺血再灌注中 ,XRCCl早期降低是DNA单链断裂无法修复的机制之一 ;大量DNA单链断裂和细胞凋亡相关。

mitoK_(ATP)通道在瑞舒伐他汀联合缺血后处理减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的观察瑞舒伐他汀后处理联合缺血后处理是否能减轻2型糖尿病大鼠缺血再灌注损伤并探讨其相应机制。方法建立2型糖尿病大鼠模型,并随机分成7组(每组9只):假手术组、缺血再灌注损伤组(IRI组)、瑞舒伐他汀后处理+缺血后处理组(RPO+IPO组)、瑞舒伐他汀后处理+缺血后处理组+5-羟基喹酸盐组(5-HD组)、瑞舒伐他汀后处理+缺血后处理组+二氮嗪组(二氮嗪组)、瑞舒伐他汀后处理+缺血后处理组+HMR-1098组(HMR-1098组)、瑞舒伐他汀后处理+缺血后处理组+克罗卡林组(克罗卡林组)。进行45 min缺血和120 min再灌注,观察心肌梗死区面积及心肌细胞线粒体超微结构和血清心肌肌钙蛋白T水平。结果 RPO+IPO组、二氮嗪组、HMR-1098组和克罗卡林组心肌梗死面积较IRI组明显减小(P<0.05),5-HD组心肌梗死面积明显大于RPO+IPO组、二氮嗪组、HMR-1098组及克罗卡林组(P<0.05)。IRI组和5-HD组心肌细胞线粒体超微结构损伤重,RPO+IPO组、二氮嗪组、HMR-1098组及克罗卡林组心肌细胞线粒体超微结构基本完整。RPO+IPO组、二氮嗪组、HMR-1098组及克罗卡林组血清心肌肌钙蛋白T水平较IRI组明显减少(P<0.05),5-HD组血清心肌肌钙蛋白T水平与IRI组无明显差异,但明显高于RPO+IPO组、二氮嗪组、HMR-1098组及克罗卡林组(P<0.05)。结论瑞舒伐他汀后处理联合缺血后处理可明显减轻2型糖尿病大鼠缺血再灌注损伤,mitoKATP通道开放在此作用中起主导地位。

超微细粉小复方对心肌缺血/再灌注损伤大鼠AMPK、GLUT4 mRNA的影响

目的:观察具有益气活血通痹作用的中药超微细粉小复方对心肌缺血/再灌注损伤大鼠AMPK、GLUT4mRNA影响。方法:63只大鼠随机分假手术组(Sham)、模型组(Model)、中粉组(Z)、超微细粉组(X)、煎剂组(J)、麝香保心丸组(SX)等7组,灌胃14天,冠脉结扎60min联合Langendroff灌流120min复制心肌缺血/再灌注模型,Real time RT-PCR法检测心肌GLUT4、AMPKmRNA表达水平。结果:与模型组比较,益气活血通痹小复方可升高AMPK、GLUT4 mRNA表达(P<0.05),其中以中粉组、超微细粉组效果最佳。结论:益气活血通痹小复方可能通过调节AMPK、GLUT4 mRNA表达改善心肌能量代谢减轻心肌缺血/再灌注损伤。

预处置及ACEI对缺血－再灌注损伤大鼠心肌局部ATⅡ和肾上腺素能受体的影响

本研究旨在通过测定不同条件下离体大鼠心肌局部ＡＴⅡ含量和肾上腺素能受体的变化，阐明预处置和ＡＣＥＩ是否对缺血—再灌注损伤心肌具有保护作用。结果表明，心肌缺血４０ｍｉｎ再灌注２０ｍｉｎ后ＡＴⅡ含量明显升高。α＿１和β受体的Ｂｍａｘ在缺血４０ｍｉｎ再灌注４ｍｉｎ即明显升高，延长再灌注时间至２０ｍｉｎα＿１受体呈恢复趋势，而β受体仍保持在高水平，ＡＴⅡ的时相性变化与β受体相似。两种肾上腺素能受体变化的直接对比显示二者受完全不同的机制所调节。经预处置和灌流液中加入ＡＣＥＩ后ＡＴⅡ含量和两种受体的Ｂｍａｘ与未预处置和未加ＡＣＥＩ组均有不同程度的降低。

丹参川芎嗪注射液治疗糖尿病合并椎基底动脉供血不足疗效观察

目的观察丹参川芎嗪注射液对糖尿病合并椎基底动脉供血不足的疗效。方法选择糖尿病并椎基底动脉供血不足者80例,随机分为治疗组和对照组,治疗组静脉滴注丹参川芎嗪注射液10ml,对照组静脉滴注灯盏细辛注射液30ml;两组患者均每日1次,疗程为2周。结果丹参川芎嗪注射液可显著改善糖尿病并椎基底动脉供血不足患者症状,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论丹参川芎嗪注射液对糖尿病合并椎基底动脉供血不足有明显疗效。

宽胸逐瘀汤对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:探讨宽胸逐瘀汤对离体和在体家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:32只在体家兔结扎冠状动脉造成心肌缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、缺血再灌注组、宽胸逐瘀汤组和复方丹参片组。每组动物均在末次给药后1h开胸,暴露心脏,于冠状动脉左室支中1/2处穿线,放置硅胶管后,以备一起结扎,假手术组不结扎,放置60min,其余各组均结扎30min,解除结扎再灌注30min。实验过程中动态观察心电图(ECG),以结扎后出现心电图ST段呈弓背向上抬高,T波高耸,放松结扎后拾高的ST段下降1/2以上为缺血再灌注成功。记录心电图肢体II导联ST段抬高情况,并检测各组血清中超氧化物歧化酶(SOD)和肌酸激酶(CK)的活性。结果:宽胸逐瘀汤和复方丹参片均可降低心电图II导联抬高的ST段,与缺血再灌注组比较,ST段抬高程度较轻(P<0.01),宽胸逐瘀汤的作用优于复方丹参片(P<0.0l);宽胸逐瘀汤和复方丹参片均可降低血清CK含量,升高血清SOD含量,与缺血再灌注组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05),且宽胸逐瘀汤的作用优于复方丹参片(P<0.05)。结论:宽胸逐瘀汤具有保护心肌缺血再灌注损伤的作用,其机制可能与改善心肌能量代谢,减轻氧自由基损伤有关。

伊贝沙坦对缺血再灌注心律失常的作用实验研究

目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂伊贝沙坦对缺血再灌注心律失常的作用及其机制。方法:32只Sprague-Dawley雄性大鼠分为缺血/复灌对照组,缺血/复灌+伊贝沙坦(100umol/L)组,缺血/复灌+伊贝沙坦(50umol/L)组,缺血/复灌+伊贝沙坦(100umol/L)+CsA(1umol/L)组,每组8只。观察各组心脏离体灌注下左室发展压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)、心率(HR)、最大收缩/舒张速率(±dP/dtmax)、冠脉流量(CF)、灌流液乳酸脱氢酶(LDH)及心律失常评分。结果:单用伊贝沙坦组LVDP、LVEDP、LDH及心律失常评分显著低于缺血/复灌对照组(P<0.01);±dP/dtmax、CF显著高于缺血/复灌对照组(P<0.05),合灌环胞菌素A可以部分甚至全部逆转伊贝沙坦的作用。结论:伊贝沙坦对离体大鼠缺血/再灌注心肌有保护作用,减少再灌注心律失常发生,部分可能是通过激活钙调神经磷酸酶起作用。

NGAL对大鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用及机制研究

目的:观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutropil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury,IRI)后肾功能的保护作用及机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(I/R组)及缺血再灌注联合NGAL治疗组(I/R+N组),通过夹闭双侧肾动脉法建立大鼠I/R-AKI模型,NGAL干预组于造模前30min、再灌注0、0.5、1 h予外源性重组NGAL蛋白(12.5 ug/ml)预处理,检测三组大鼠再灌注24 h的血清肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)表达,HE染色观察三组大鼠肾组织病理改变,电镜观察自噬小体形成,Western-blotting检测肾组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达改变。结果:与对照组及I/R+N组相比,I/R组再灌注24 h后的Scr及BUN均显著升高(P<0.05);病理可见I/R组术后小管排列稀疏、紊乱,上皮细胞坏死脱落,肾小管刷状缘消失;I/R+N组病变与之相似,但程度相对较轻;Western-blotting结果示:I/R+N组自噬相关蛋白LC3表达较对照组及I/R组显著增强(P<0.05),电镜可见相应条件下自噬小体形成。结论:NGAL可通过增强自噬改善缺血再灌注肾损伤肾功能减退。