UPLC-Q-TOF-MS法鉴定五酯胶囊中化学成分和大鼠入血成分

目的 基于血清药物化学技术对五酯胶囊中成分和大鼠入血成分进行鉴定。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS法对五酯胶囊成分组、给药组和空白组样品进行分析,通过MassLynx V4.1软件对所得图谱进行数据解析,对五酯胶囊中成分及其入血成分进行鉴定。结果 鉴定出五酯胶囊中15个化合物,其中五味子甲素含量最高。大鼠血清中含有五酯胶囊2个原型成分五味子酯丁、长南酸,筛选得到代谢物8个,主要以Ⅰ相代谢反应中的水解、氧化、去甲氧基化反应和Ⅱ相代谢反应中的葡萄糖醛酸化结合为主。结论 建立了五酯胶囊中活性成分和代谢产物的鉴定方法,为五酯胶囊的临床应用提供依据。

HPLC测定安神补心胶囊7个有效成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定安神补心胶囊中7个木脂素类有效成分的含量,以制定安神补心胶囊的质量控制标准。方法:采用Brava BDS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温30℃;水(A)-乙腈(B)为流动相,以0.8 mL.min-1梯度洗脱;检测波长为225 nm。结果:在65 min内安神补心胶囊中戈米辛H、五味子醇乙、戈米辛F、五味子酯甲、五味子酯丁、五味子甲素和五味子乙素被完全分离;峰面积与其浓度呈良好的线性;加样回收率(n=6)分别为101.2%,99.7%,100.1%,100.9%,101.8%,99.5%,99.6%;RSD分别为1.1%,0.76%,2.2%,0.53%,1.8%,0.66%,1.8%。结论:本方法操作简便、可靠,重复性好,可作为安神补心胶囊的定量测定方法。

响应面法优化酒蒸南五味子炮制工艺

目的:优选酒蒸南五味子的炮制工艺参数。方法:以皂苷类、木脂素类及多糖类成分含量的综合评分为因变量,运用Box-Behnken试验考察加酒量、闷润时间、蒸制时间对酒蒸南五味子炮制工艺的影响,运用Design Expert 8.05软件对试验数据进行分析,建立综合评分与各自变量的多元二次回归方程的数学模型,通过响应面分析确定工艺参数。采用UV测定各指标成分含量,检测波长分别为540,560,484 nm。结果:最佳酒蒸工艺参数为每100 g药材加酒量11 g,闷润时间1 h,蒸制时间6.5 h;皂苷类、木脂素类及多糖类成分的质量分数平均值分别为6.386%,12.297%,4.659%,RSD分别为2.31%,3.22%,1.46%;综合评分95.58,与理论预测值(96.28)偏差0.72%。结论:从多化学组分含量综合评分优选的炮制工艺能更科学、合理地控制酒蒸南五味子的饮片质量。

基于多元统计分析和网络药理学的五味子醋制前后质量标志物预测分析

目的 基于多元统计分析和网络药理学分析预测五味子醋制前后潜在的质量标志物。方法 采用UPLC-Q/TOF-MS解析生、醋五味子饮片中主要的木脂素类成分,并运用多元统计方法筛选出炮制前后潜在的差异化学成分,即化学标记物。进一步通过网络药理学以及生物信息学分析显著差异成分相关的主要作用靶点和通路,构建“成分-靶点-通路”网络关系,预测生、醋五味子潜在的质量标志物。结果 筛选了五味子醋制前后差异性成分40个,其中8个为生、醋五味子之间显著性差异成分(即化学标记物)。鉴定并确认了其中的5个化学成分,分别是5-羟甲基糠醛、五味子甲素及其同分异构体、五味子乙素和五味子酯丁。而其余3个化学标记物通过解析一级、二级质谱信息,推测它们很可能也属于木脂素类成分。网络药理学分析结果表明,鉴定并确认的5个潜在质量标志物与五味子的主要药理作用密切相关。最终五味子乙素和5-羟甲基糠醛被确定为最具代表性的潜在质量标志物。结论 五味子醋制前后其化学成分发生了一系列复杂的变化,经研究分析确定五味子乙素和5-羟甲基糠醛可作为五味子醋制前后代表性的潜在质量标志物,并推测木脂素类成分可能为五味子醋制保肝的重要效应物质基础。

基于指纹图谱分析和多成分同时定量的护肝片质量评价研究

目的:建立护肝片的HPLC指纹图谱,并测定其主要成分的含量,为护肝片的质量控制提供可靠方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～6 min,6%A;6～9 min,6%A→40%A;9～30 min,40%A→50%A;30～45 min,50%A;45～65 min,50%A→75%A),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长250 nm,柱温30℃;建立护肝片HPLC指纹图谱,并对(R,S)-告依春、柴胡皂苷a、五味子醇甲、柴胡皂苷d、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量测定方法进行方法学考察。结果:在指纹图谱研究中,共确定护肝片HPLC指纹图谱20个共有峰,通过与混合对照品比较,指认其中7个指标成分,分别是(R,S)-告依春(1号峰)、柴胡皂苷a(3号峰)、五味子醇甲(5号峰)、柴胡皂苷d(6号峰)、五味子酯甲(8号峰)、五味子甲素(17号峰)和五味子乙素(20号峰),利用相似度软件对23批样品指纹图谱进行分析,各批样品相似度均在0.95以上。在建立的色谱条件下测定7个成分,分离度良好,方法精密度和重复性的RSD均<1.5%,供试品溶液在24 h内稳定,各成分具有良好的线性关系和较宽线性范围;6批护肝片中(R,S)-告依春、柴胡皂苷a、五味子醇甲、柴胡皂苷d、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素质量分数分别为0.07～0.12、0.13～0.20、0.51～0.58、0.06～0.13、0.07～0.14、0.10～0.17和0.18～0.23 mg·片^(-1)。结论:所建立的护肝片HPLC指纹图谱检测和定量测定分析方法快速、准确,可以有效地评价护肝片的质量。