慢性肾衰竭血液透析患者IL-13、FGF23、SOST水平变化与血管钙化的关系

目的分析慢性肾衰竭(chronic renalfailure,CRF)血液透析患者血清白介素13(interleukin-13,IL-13)、成纤维细胞生长因子23(fibroblast growthfactor 23,FGF23)、骨硬化蛋白(sclerostin,SOST)水平变化与血管钙化的关系。方法纳入2021年1月至2022年12月郑州大学第一附属医院收治的126例行维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)的CRF患者临床资料,所有患者使用X线正位片及腹部平片观察血管钙化情况,采用Adragao钙化评分法,分为0分(无钙化)、1~3分(轻度钙化)、4~6分(中度钙化)、7~8分(重度钙化),使用受试者工作特征(receiver operatingcharacteristic,ROC)曲线评估血清IL-13、FGF23、SOST对患者血管钙化的诊断价值,并使用Pearson相关系数评估存在血管钙化者的血管钙化评分与血清IL-13、FGF23、SOST的相关性。结果行MHD治疗的CRF患者中,合并血管钙化者且有糖尿病患病史的比例高于无血管钙化者(P<0.05),血清IL-13、FGF23、SOST水平均高于无血管钙化者(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清IL-13、FGF23、SOST对MHD治疗的CRF患者血管钙化的诊断均具有价值(AUC_(IL-13)=0.827,P<0.05;AUC_(FGF2)=0.781,P<0.05;AUC_(SOST)=0.746,P<0.05),且3项联合诊断价值更高(AUC=0.906,P<0.05)。重度血管钙化者血清IL-13、FGF23、SOST水平显著高于中度钙化与轻度钙化者(P<0.05),中度钙化者高于轻度钙化者(P<0.05);Pearson相关系数分析显示,合并血管钙化患者的血管钙化评分与血清IL-13、FGF23、SOST均呈正相关(r_(IL-13)=0.532,P<0.05;r_(FGF23)=0.504,P<0.05;r_(SOST)=0.511,P<0.05)。结论IL-13、FGF23、SOST可能参与了MHD治疗的CRF患者血管钙化发生、发展过程,监测三者血清水平变化具有重要的临床诊疗价值。

创伤性骨关节炎患者血清SOST、SFRP5水平变化及其对预后的预测价值

目的探讨创伤性骨关节炎(PTOA)患者血清骨硬化蛋白(SOST)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平变化及其对预后的预测价值。方法选取2020年1月至2022年1月该院收治的84例PTOA患者作为疾病组,另选取同期在该院体检的健康者84例作为健康组。采用酶联免疫吸附试验检测疾病组和健康组血清SOST、SFRP5水平。对疾病组随访1年并采用Lysholm膝关节功能评分评估PTOA患者预后情况。采用Spearman相关性分析法分析PTOA患者血清SOST、SFRP5水平与Lysholm膝关节功能评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析PTOA患者预后影响因素;并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SOST、SFRP5水平对PTOA患者预后不良的预测价值。结果与健康组比较,疾病组血清SOST、SFRP5水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果表明,疾病组血清SOST、SFRP5水平均与Lysholm膝关节功能评分呈正相关。多因素Logistic回归分析结果显示,体重指数>25 kg/m^(2)、入院时凯尔格伦-劳伦斯分级为Ⅲ/Ⅳ级、软骨Outerbridge分级为Ⅲ/Ⅳ级均为PTOA患者预后不良的独立危险因素(P<0.05);术后长期锻炼、SOST、SFRP5水平为保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析表明,血清SOST、SFRP5水平联合预测PTOA患者预后不良的ROC曲线下面积(AUC)均高于SOST、SFRP5水平单独预测PTOA患者预后不良的AUC(Z=2.316,P=0.021;Z=2.356,P=0.019)。结论PTOA患者血清SOST、SFRP5水平较健康者降低,二者均与PTOA患者的不良预后相关,对患者预后具有一定的预测效能。

硬化蛋白(sclerostin)在软骨代谢与骨关节疾病中的分子机制研究进展

硬化蛋白(SOST基因编码蛋白)是一种分泌型跨膜糖蛋白,在骨骼发育与骨矿物质密度(BMD)调节过程中发挥着关键作用,主要由关节软骨中的软骨细胞和软骨下骨中的骨细胞表达。在骨形成过程中,SOST通过抑制Wnt信号通路,调节炎症诱导的软骨代谢,发挥了关键的调控作用。本文从硬化蛋白与其调控基因SOST在关节软骨发育中的作用出发,对硬化蛋白参与关节疾病发展的相关机制进行综述,并探讨其作为关节软骨防治的分子及其在临床应用中的前景。

压应力激活SOST/Wnt/β-catenin 通路诱导软骨终板细胞退变

背景:在许多可以导致椎间盘退变的因素中(衰老、营养匮乏、机械因素等),力学负荷被认为是极其重要的因素,但其机制尚不清楚。目的:探讨硬骨素和Wnt/β-catenin信号通路在压应力诱导终板软骨退变中的作用。方法:提取4周龄雄性SD大鼠软骨终板细胞,体外利用力学加载仪器对终板软骨细胞施加压应力,于压缩细胞1,3,5,7 d,采用CCK-8法测定细胞活力;Western blot、RT-qPCR及细胞免疫荧光等检查终板软骨细胞内软骨标记物(聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原)、钙化相关因子(Runx2、骨钙素)、细胞外基质降解酶及信号通路基因(硬骨素、β-catenin)等表达。结果与结论:①压应力作用下,终板软骨细胞活力会随着压应力时间、强度增加而降低;②终板软骨细胞的软骨标记物(聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原)表达下降,而钙化相关因子(Runx2、骨钙素)表达上升;③压应力能促进终板软骨细胞的细胞外基质降解,基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13表达量增加;④细胞内Wnt/β-catenin信号通路表达出现异常,其特异性抑制因子硬骨素伴随着β-catenin的异常积累而表达下降。结果说明:在压应力作用下,终板软骨细胞内硬骨素的表达下降,导致Wnt/β-catenin信号通路激活,促进软骨终板的钙化、退变与细胞外基质的降解,进而促进椎间盘退变。

血清SOST、ALP水平及TyG指数对维持性血液透析患者冠状动脉钙化的预测价值

目的 探讨血清骨硬化蛋白(SOST)、碱性磷酸酶(ALP)水平及三酰甘油葡萄糖(TyG)指数对维持性血液透析患者冠状动脉钙化的预测价值。方法 选取2021年12月至2023年2月于合肥市妇幼保健院就诊的110例维持性血液透析患者作为研究对象,按照患者冠状动脉钙化积分将患者分为无钙化组(n=43)和钙化组(n=67)。对比两组的血清SOST、ALP水平及TyG指数差异,分析患者冠状动脉钙化的独立影响因素及对冠状动脉钙化的预测价值及相关性。结果 钙化组的SOST、ALP水平、TyG指数高于无钙化组(t=7.438、4.012、4.279,P<0.05)。Spearman分析显示,血清SOST、ALP水平及TyG指数与维持性血液透析患者冠状动脉钙化发生呈正相关(r=0.584、0.356、0.351,P<0.001)。Logistic分析显示,血清SOST、ALP水平及TyG指数、年龄、糖尿病是维持性血液透析患者冠状动脉钙化不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清SOST、ALP水平及TyG指数联合预测维持性血液透析患者冠状动脉钙化的效能更高,其曲线下面积(AUC)为0.922。结论 血清SOST、ALP水平及TyG指数与维持性血液透析患者冠状动脉钙化密切相关,其表达对维持性血液透析患者冠状动脉钙化具有良好的预测价值。

强直性脊柱炎患者髋关节滑膜组织中SOST、u-PA、β-catenin表达水平及临床意义

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者髋关节滑膜组织中骨硬化蛋白(SOST)、尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)、β-连环蛋白(β-catenin)表达水平及临床意义。方法选取2018年7月至2023年6月在河南省人民医院诊治的80例AS患者作为病例组,并选取同期80例创伤骨折患者作为对照组,比较病例组和对照组、不同强直性脊柱炎疾病活动度评分(ASDAS)、Bath强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)、Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)髋关节滑膜组织中SOST、u-PA、β-catenin表达,并分析髋关节滑膜组织中SOST、u-PA、β-catenin表达对AS的预测价值。结果病例组髋关节滑膜组织中SOST、u-PA、β-catenin表达高于对照组(P<0.05)。极高疾病活动度、高疾病活动度患者髋关节滑膜组织中SOST、u-PA表达高于缓解期患者(P<0.05),极高疾病活动度患者髋关节滑膜组织中β-catenin表达高于缓解期患者(P<0.05);BASDAI≥5分患者髋关节滑膜组织中SOST、u-PA、β-catenin表达高于BASDAI<5分患者(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,SOST、u-PA、β-catenin及三者联合预测AS的曲线下面积分别为0.861、0.818、0.860、0.905,最佳临界值对应的敏感度、特异度SOST为78.8%、88.7%,u-PA为95.0%、56.2%,β-catenin为68.8%、91.2%,三者联合为92.5%、83.8%。结论AS患者髋关节滑膜组织中SOST、u-PA、β-catenin表达升高,与疾病活动度、病情严重程度有关,髋关节滑膜组织中SOST、u-PA、β-catenin联合对AS具有较高的预测价值。

表观遗传修饰介导抑制SOSTDC1表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为

目的:探究含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)对宫颈癌细胞恶性生物学行为的调控及其分子机制。方法:收集2020年8月至2022年5月间在福建省肿瘤医院活检或手术切除的53例宫颈癌组织和相应的癌旁组织标本,免疫组化法检测SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织及相应癌旁组织中的表达,qPCR法检测正常宫颈细胞、宫颈癌细胞中SOSTDC1 mRNA表达;将SOSTDC1过表达慢病毒(OE-sostdc1)和对照空病毒(NC)感染宫颈癌细胞SiHa及CaSki,将其分为SiHa-OE-sostdc1、SiHa-NC、CaSki-OE-sostdc1、CaSki-NC组,采用WST-1法、细胞集落形成实验、Transwell实验和WB法检测转染各组SiHa及CaSki细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力和BMP、Wnt/β-catenin信号途径相关蛋白及上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达。用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂2'-脱氧胞苷(5'-Aza-CdR)处理宫颈癌细胞后采用qPCR和WB法检测SOSTDC1 m RNA及蛋白的表达变化,用甲基化特异性PCR(MSP)检测5例配对宫颈癌组织与癌旁组织中SOSTDC1基因启动子区甲基化水平,同时qPCR检测其SOSTDC1 mRNA水平。结果:与癌旁组织比较,SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织中呈低表达(P<0.01),且与淋巴结转移与FIGO分期有关联(均P<0.05);与正常宫颈HUCEC细胞比较,SOSTDC1 mRNA在宫颈癌C33A、HeLa、SiHa、CaSki细胞中均呈低表达(均P<0.01)。过表达SOSTDC1显著抑制SiHa及CaSki细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。WB法结果检测显示,过表达SOSTDC1显著抑制SiHa及CaSki细胞中磷酸化Smad、Dvl2/3、β-catenin、VIM、N-cadherin、Snail蛋白的表达(均P<0.05),5'-Aza-CdR处理后的SiHa及CaSki细胞中SOSTDC1 mRNA和蛋白水平均显著增加(均P<0.05),MSP检测结果显示,相较于癌旁组织,宫颈癌组织中SOSTDC1基因启动子区呈高度甲基化,且SOSTDC1 mRNA水平降低(P<0.01)。结论:SOSTDC1在宫颈癌组织中呈低表达且与肿瘤的恶性进展关联,其表达下调与其基因启动子区高度甲基化有关,过表达SOSTDC1可能通过阻断BMP及Wnt/β-catenin信号通路从而抑制SiHa、CaSki细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

血清IL-32γ、SOST及H2S与老年慢性心力衰竭患者骨质疏松的关系

目的探讨血清白细胞介素(IL)-32γ、骨硬化蛋白(SOST)及血清硫化氢(H2S)与老年慢性心力衰竭(CHF)患者骨质疏松(OP)的关系。方法选取2019年1月至2022年12月收治的老年CHF患者122例,根据OP情况分为OP组(n=66)和非OP组(n=56)。比较两组一般资料和血清IL-32γ、SOST及H2S水平,采用logistic回归模型分析老年CHF患者合并OP的影响因素。绘制受试者操作特征(ROC)曲线分析血清IL-32γ、SOST及H2S水平对老年CHF患者合并OP的预测效能。结果OP组血清IL-32γ和H2S水平均低于非OP组(t=5.446,4.254,均P<0.05),而其女性占比、年龄、吸烟史占比、慢性心力衰竭病程、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇及血清SOST水平则高于非OP组(χ^(2)/t=5.611,6.169,5.855,5.283,4.576,5.805,5.380,均P<0.05)。logistic回归分析结果显示,血清IL-32γ和H2S水平是老年CHF患者合并OP的独立保护因素,而年龄、吸烟史、慢性心力衰竭病程及血清SOST水平则是老年CHF患者合并OP的独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清IL-32γ、SOST联合H2S水平对老年CHF患者合并OP预测价值较高,曲线下面积为0.849(95%CI:0.776~0.921)。结论血清IL-32γ、SOST及H2S均与老年CHF患者骨质疏松密切相关,三者联合检测可作为老年CHF患者合并OP早期预测指标。

MHR、LPR-5和SOST对2型糖尿病骨质疏松患者发生骨折的预测价值

目的观察单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值(MHR)、低密度脂蛋白相关蛋白(LRP)-5和硬化蛋白(SOST)对2型糖尿病骨质疏松患者发生骨折的预测价值。方法选择2020年1月至2021年12月在该中心诊断为2型糖尿病骨质疏松患者109例为骨质疏松组,另选择同期在该中心诊断为2型糖尿病骨量下降患者65例和2型糖尿病骨量正常患者45例分别为骨量下降组和骨量正常组。观察各组MHR、LPR-5和SOST水平的变化及其与骨折严重程度的关系;采用二元Logistic回归分析骨质疏松患者发生骨折的影响因素;采用受试者工作特征曲线分析MHR、LPR-5和SOST水平对2型糖尿病骨质疏松患者发生骨折的预测效能。结果骨质疏松组患者MHR和LPR-5水平明显高于骨量减少组和骨量正常组(P<0.05),且骨量减少组明显高于骨量正常组(P<0.05)。骨折组MHR和LPR-5水平明显高于非骨折组(P<0.05),并随着骨折严重程度的升高而明显升高(P<0.05)。骨质疏松组血清SOST水平明显低于骨量减少组和骨量正常组(P<0.05),且骨量减少组明显低于骨量正常组(P<0.05)。骨折组血清SOST水平明显低于非骨折组(P<0.05),并随着骨折严重程度的升高而显著降低(P<0.05)。多因素分析发现,BMI、FBG、MHR、LPR-5和SOST是2型糖尿病患者发生骨折的独立影响因素(P<0.05)。MHR、LPR-5和SOST对2型糖尿病骨质疏松患者骨折的预测效能明显优于BMI和FBG(P<0.01),联合检测MHR、LPR-5和SOST对诊断2型糖尿病骨质疏松患者发生骨折的灵敏度为87.5%,特异度为83.6%,曲线下面积(AUC)为0.909,明显高于MHR(Z=3.182,P<0.01)、LPR-5(Z=3.154,P<0.01)和SOST(Z=3.684,P<0.01)单项检测的AUC,而各指标单项检测的AUC之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论MHR、LPR-5和SOST参与了2型糖尿病骨质疏松的发生、发展过程,是发生骨折的独立影响因素,上述3个指标联合检测对2型糖尿病骨质疏松患者发生骨折具有较高的预测价值。

sclerostin在2型糖尿病伴牙周炎大鼠牙槽骨骨重建过程中的表达及意义

目的:观察2型糖尿病(T2DM)伴牙周炎大鼠牙槽骨骨重建过程中骨硬化蛋白(sclerostin)的表达。方法:将54只SD大鼠随机分为健康组、牙周炎组、T2DM伴牙周炎组,每组各18只。牙周炎组建立牙周炎大鼠模型,T2DM伴牙周炎组先建立T2DM模型,再建立牙周炎模型。腹腔注射STZ后1、5、10 d,检测糖代谢指标。结扎后8周,检测牙周指标。建模成功后1、3、6个月,免疫组织化学染色检测牙槽骨组织中sclerostin的表达。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与未建模大鼠相比,T2DM建模大鼠腹腔注射STZ后1、5、10 d空腹血糖(FBG),腹腔注射STZ后10 d空腹胰岛素(FINS)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均显著升高(P<0.05)。与未建模大鼠相比,牙周炎建模大鼠牙龈出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)、探针深度(PD)均显著增加(P<0.05)。与健康组相比,牙周炎组、T2DM伴牙周炎组建模成功后1、3、6个月牙槽骨组织中sclerostin表达显著增加(P<0.05),且T2DM伴牙周炎组显著高于牙周炎组(P<0.05)。与建模成功后1个月相比,牙周炎组、T2DM伴牙周炎组建模成功后3、6个月牙槽骨组织中sclerostin表达显著增加(P<0.05)。与建模成功后3个月相比,牙周炎组、T2DM伴牙周炎组建模成功后6个月牙槽骨组织中sclerostin表达显著减少(P<0.05)。结论:sclerostin在牙周炎中表达增加,且合并T2DM进一步上调sclerostin的表达,但在骨重建过程中逐渐下调。

膝关节骨性关节炎患者血清sST2、SOST表达水平及对患者疾病转归的影响

目的 分析膝关节骨性关节炎患者血清可溶性生长刺激表达因子2(soluble growth stimulating express gene2, sST2)、骨硬化蛋白(sclerostin,SOST)表达水平及对患者疾病转归的影响。方法 将2021年5月至2022年5月陕西中医药大学附属医院收治的72例膝关节骨性关节炎患者纳入研究组,58例同期健康体检者纳入对照组。根据膝关节骨性关节炎患者疾病转归情况分为预后良好组(n=42)和预后不良组(n=30)。所有纳入对象入院后24 h内采用酶联免疫吸附法检测血清sST2、SOST表达水平。比较各组血清sST2、SOST表达水平。采用受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC)评估血清sST2、SOST对膝关节骨性关节炎患者疾病转归的预测价值,同时采用单因素及多因素Logistic回归分析影响膝关节骨性关节炎患者疾病转归的相关因素。结果 研究组血清sST2水平高于对照组,血清SOST水平低于对照组(P<0.05)。预后不良组血清sST2水平高于预后良好组,血清SOST水平低于预后良好组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清sST2曲线下面积为0.768,截断值为33.6 ng/mL,灵敏度以及特异性分别为91.66%、59.62%;血清SOST曲线下面积为0.859,截断值为26.8 pg/mL,灵敏度以及特异性分别为92.67%、65.22%;二者联合曲线下面积为0.902,灵敏度以及特异性分别为87.33%、86.64%。多因素Logistic回归分析发现,K-L分级及血清sST2、SOST均为影响膝关节骨性关节炎患者疾病转归的危险因素(OR>1,P<0.05)。结论 膝关节骨性关节炎患者血清sST2水平升高,SOST表达水平降低,且二者表达水平与疾病转归密切相关,均是影响患者疾病转归的独立危险因素。

老年肌少症患者血清硬骨素和n-3脂肪酸表达水平及临床价值研究

目的探讨血清硬骨素、n-3脂肪酸在老年肌少症患者中的表达水平及临床意义。方法收集2021年5月—2023年5月新疆医科大学第五附属医院老年病科收治的老年肌少症患者118例为病例组,根据病情程度分为肌少症前期(n=39)、肌少症期(n=46)和重度肌少症期(n=33),选取同期医院健康体检者60例为健康对照组。酶联免疫吸附法检测血清硬骨素,气相色谱法检测n-3脂肪酸水平;人体成分分析仪和生物电阻抗体法检测体脂百分比、上臂围、内脏脂肪面积、蛋白质质量;6M步行法测量步速,Jamar握力计测量双手握力,双能X线吸收仪测量全身及四肢骨骼肌质量,计算相对四肢骨骼肌质量指数(RSMI);硬骨素和n-3脂肪酸与病情严重程度及上述指标的相关性用Pearson积矩相关或Spearman秩相关分析;采用Logistic回归分析老年肌少症的影响因素,ROC曲线评估血清硬骨素和n-3脂肪酸对老年肌少症的诊断价值。结果病例组患者血清硬骨素、n-3脂肪酸水平低于健康对照组(t/P=13.342/<0.001、13.116/<0.001);血清硬骨素、n-3脂肪酸水平比较,肌少症前期>肌少症期>重度肌少症期(F/P=59.138/<0.001、79.217/<0.001);病例组患者体脂百分比、内脏脂肪面积大于健康对照组(t/P=8.732/<0.001、5.124/<0.001),上臂围、蛋白质质量、步速、握力、全身骨骼肌质量、四肢骨骼肌质量、RSMI水平低于健康对照组(t/P=3.859/<0.001、8.459/<0.001、5.758/<0.001、12.492/<0.001、7.006/<0.001、10.334/<0.001、11.813/<0.001);老年肌少症患者血清硬骨素、n-3脂肪酸与体脂百分比、内脏脂肪面积呈负相关(硬骨素:r/P=-0.537/<0.001、-0.612/<0.001;n-3脂肪酸:r/P=-0.498/<0.001、-0.523/<0.001),与上臂围、蛋白质质量、步速、握力、全身骨骼肌质量、四肢骨骼肌质量、RSMI呈正相关(硬骨素:r/P=0.593/<0.001、0.624/<0.001、0.639/<0.001、0.597/<0.001、0.601/<0.001、0.607/<0.001、0.638/<0.001;n-3脂肪酸:r/P=0.569/<0.001、0.611/<0.001、0.570/<0.001、0.592/<0.001、0.549/<0.001、0.534/<0.001、0.587/<0.001);年龄、体脂百分比、内脏脂肪面积升高是老年肌少症危险因素[OR(95%CI)=1.702(1.115~2.600)、1.551(1.052~2.287)、1.387(1.006~1.913)],BMI、上臂围、蛋白质质量、步速、握力、全身骨骼肌质量、四肢骨骼肌质量、RSMI、硬骨素、n-3脂肪酸升高是老年肌少症的保护因素[OR(95%CI)=0.728(0.539~0.982)、0.768(0.593~0.995)、0.845(0.723~0.986)、0.815(0.668~0.995)、0.585(0.382~0.897)、0.746(0.573~0.972)、0.733(0.559~0.964)、0.713(0.541~0.940)、0.822(0.695~0.973)、0.803(0.664~0.971)];血清硬骨素、n-3脂肪酸及二者联合诊断老年肌少症的AUC分别为0.822、0.818、0.894,二者联合诊断老年肌少症的AUC大于其各自单独诊断(Z=2.205、2.328,P=0.002、0.001)。结论老年肌少症患者血清硬骨素和n-3脂肪酸降低,两指标与病情严重程度密切相关,早期联合检测可辅助临床诊断老年肌少症。

SOST基因的表达调控

硬化蛋白(Sclerostin,SOST)主要由骨细胞特异性表达,是骨形成的负性调节因子。甲状旁腺激素和雌激素抑制SOST基因表达,转录因子Osterix、Runx2和Mef2c促进SOST基因表达,而转录因子Sirt1负调控SOST表达。此外,SOST基因表达还受DNA甲基化和microRNA等表观遗传学调控。SOST基因突变可引起骨硬缩症和Van Buchem病,与骨质疏松症相关联。Wnt和BMP是骨代谢调节的两个重要信号途径,SOST可通过结合BMP的Ⅰ型或Ⅱ型受体和Wnt的共受体LRP5/6分别抑制BMP和Wnt信号途径来调控成骨细胞分化和骨形成。抑制SOST为骨质疏松症的治疗提供了新的途径。文章综述了SOST基因的结构、功能、表达调控、与人类疾病的关系、调节骨代谢的机制及其临床应用前景。

血清sclerostin水平与维持性血液透析患者血管钙化的关系

目的探讨血清sclerostin水平与慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)血液透析患者血管钙化(vascular calcification,VC)的关系。方法选取2017年3月至5月于我院行维持性血液透析的94例CRF患者,收集相关临床资料,采用酶联免疫吸附法测定血清sclerostin水平,采用胸部计算机断层扫描(computed tomography,CT)明确血管钙化(包括主动脉钙化和冠状动脉钙化)情况,分析血清sclerostin水平与血管钙化的关系。结果钙化组患者与非钙化组患者相比,血清sclerostin水平显著升高[(121.23±53.13)vs.(81.84±30.20)pmol/L,P<0.05]。多因素Logistic回归分析显示血清sclerostin(OR=1.038,P<0.01)与透析患者VC发生相关。当sclerostin水平为91.27pmol/L时,灵敏度和特异度均为0.71,此时灵敏度和特异度之和最大,因此,预测VC的最佳截断值为91.27pmol/L;联合年龄、糖尿病、钙和全段甲状旁腺激素时预测VC的灵敏度为0.91,特异度为0.74。结论血清sclerostin水平在透析患者中显著升高,并与透析患者VC发生相关,对VC有一定的预测价值。

沉默DKK1、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63细胞增殖、ALP活性和钙离子浓度影响研究

目的构建Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因沉默重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和钙离子浓度影响作用。方法设计出特异性针对DKK1、Sost和无关对照序列(Scr),构建DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,用q PCR法和蛋白印记(Western blot)法选出沉默效率最好的扩增DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,并用荧光显微镜观察计算病毒滴度。MG63细胞被分成空白对照组、沉默DKK1(Ad-sh DKK1)组、沉默Sost(Ad-sh Sost)组、沉默DKK1+Sost(Ad-sh DKK1+Ad-sh Sost)组4组,分别用优选出的沉默效率最好的sh DKK1和sh Sost腺病毒载体转染MG63细胞,采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)检测观察细胞增殖、考马斯亮蓝蛋白定量法测定ALP活性、流式分析法测定钙离子浓度。结果 1DKK1 p Ad-sh DKK1-1和Sost p Ad-GFP-shRNA-2沉默效率最高;2与空白对照组对比,沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默DKK1+Sost组的细胞光吸收值(OD)、ALP活性测定值均升高,而钙离子浓度均降低,以沉默DKK1+Sost组变化最明显,组间比较具有统计学差异(P<0.01和P<0.05)。结论 DKK1、Sost沉默可促进MG63细胞增殖、提高ALP活性,降低钙离子浓度,尤以二者同时沉默时的作用最强。

过表达DKK1、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63细胞和相关蛋白的影响

【目的】针对Wnt信号通路抑制因子Dickkopf(DKK)1、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因构建过表达重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞和相关蛋白的影响。【方法】构建DKK1、Sost过表达重组腺病毒载体,将培养好的MG63细胞分为空白对照组、空载病毒组(NC对照组)、过表达DKK1组、过表达Sost组、过表达DKK1+Sost组5组,根据组别不同分别用上述过表达重组腺病毒感染MG63细胞,观察细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙离子浓度和骨调节蛋白表达情况。【结果】与空白对照组比较,过表达DKK1组、过表达Sost组、过表达DKK1+Sost组的细胞光密度值、ALP活性值均显著降低,而钙离子浓度显著升高,以过表达DKK1+Sost组变化最明显(P<0.01)。与空白对照组比较,过表达DKK1组、过表达Sost组、过表达DKK1+Sost组的骨保护蛋白(OPG)、低密度脂蛋白受体相关蛋白(Lrp)5、骨形态发生蛋白(BMP)2、结缔组织生长因子(CTGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)2、骨桥蛋白(OPN)表达量均降低,而肿瘤坏死因子(TNF)-α表达量则升高,以过表达DKK1+Sost组变化最明显,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】过表达DKK1、Sost可降低MG63细胞增殖和ALP活性,升高钙离子浓度,对骨调节蛋白有一定影响,尤以两者同时过表达时的作用最强。

ERβ通过抑制SOST表达补偿ERα部分功能促进对成骨细胞增殖分化

目的观察ERα和ERβ调控前体成骨细胞增殖和分化中的相互作用及当ERα表达降低时,ERβ的激活能否通过抑制SOST信号传递补偿ERα部分功能调控成细胞增殖。方法利用RNA干扰技术,以小鼠前体成骨细胞株MC3T3-E1为对象,采用随机分层设计的对照研究,将细胞随机分层设计分组为4个组,根据研究需要再将相关组再进一步分为7个亚组,进行相关干预处理。检测各组细胞周期、MTT法绘制细胞生长曲线、检测SOST、OPG和Run X2等细胞因子的表达。应用SPSS16.0进行统计分析各组间差异,显著性差异定为P<0.05。结果 ERα表达正常,单独沉默ERβ的表达(D组),细胞增殖稍增加,但与空白对照组(F组)比较,没有显著性差异,P>0.05。同时沉默ERα和ERβ(E组),细胞增殖明显减少,SOST基因表达反而增强,但是OPG和Run X2的表达相对于空白对照组显著减弱,与空白对照组和B组比较,有显著性差异,P<0.05。沉默ERα表达而保持ERβ正常表达(B组),成骨细胞增殖能力明显减弱,SOST基因表达减弱,OPG和Run X2的表达相对于空白对照组明显减弱,和空白对照组比较差异有显著性P<0.05。相反,沉默ERα表达,但应用ERβ激动剂使ERβ过表达(A组),与B组和E组比较,细胞增殖能力反而明显增强,但是SOST基因表达显著降低,OPG和Run X2的表达反而升高,有显著性差异,P<0.05。在E组细胞的培养液中加入SOST抗体(G组),和E组比较,OPG和Run X2蛋白表达明显增强,两组间差异有显著性,P<0.05;这一结果与A组中应用ERβ激动剂有相似作用。结论 ERβ对ERα调控成骨细胞增殖过程中起着平衡作用,当ERα正常表达或活性增高时,ERβ抵抗ERα在骨形成中的刺激作用;当ERα活性减弱或丧失后,ERβ的激活补偿ERα刺激成骨细胞的增殖和分化,并且这一过程是通过ERβ抑制SOST表达而增强成骨细胞增殖相关细胞因子OPG和Run X2等而独立发挥作用。

慢性肾脏病5期患者sclerostin与桡动脉钙化的关系

目的探讨慢性肾脏病5期患者桡动脉及血清sclerostin表达情况,以及sclerostin与桡动脉钙化的关系。方法取52例初次行动静脉内瘘桡动脉-头静脉端端吻合术患者的桡动脉标本,硝酸银染色(von Kossa法)观察桡动脉钙化情况,免疫组织化学法观察桡动脉sclerostin表达情况。收集患者基本资料及动静脉内瘘术前清晨空腹静脉血,测定血红蛋白(Hb)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(AKP)、白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C反应蛋白(CRP)以及全段甲状旁腺激素(iPTH)浓度;用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测患者血清sclerostin水平。根据桡动脉钙化与免疫组织化学结果,将患者分为非钙化组和钙化组,以及染色阴性组和染色阳性组,比较组间临床指标差异,并行logistic回归分析明确血管钙化与染色阳性危险因素。同时,将患者血清sclerostin水平与临床资料行相关性分析。结果钙盐染色阳性的20例患者桡动脉均有sclerostin阳性表达,钙盐染色阴性的32例患者桡动脉中有10例(31.3%)存在sclerostin阳性表达。桡动脉钙化及sclerostin免疫组织化学阳性表达患者年龄、血清AKP及sclerostin水平均高于非钙化及sclerostin阴性表达组(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示年龄和血清sclerostin水平是桡动脉钙化的主要危险因素(P<0.05),而血清sclerostin水平是桡动脉表达sclerostin的唯一相关因素(P<0.01)。结论 Sclerostin参与慢性肾脏病5期患者桡动脉钙化的过程。骨-血管轴可能通过sclerostin相互调控血管钙化。

Sclerostin与骨质疏松研究进展

骨质疏松症是一种低骨量、骨组织微结构破坏为特征导致骨骼脆性增加和易骨折的全身性疾病，发病率高，给患者带来巨大的身心痛苦，给家庭和社会带来了沉重的经济负担。治疗骨质疏松症最理想的方法是促进成骨（直接增加骨量），而目前骨质疏松症的治疗大多采用抑制破骨细胞这种间接的方法。SOST／Sclerostin的发现为研究开发促进成骨的药物提供了崭新的思路。本文就Sclerostin与骨质疏松症的研究进展做一综述。

血清中Sclerostin、RANKL及OPG在老年股骨转子间骨折早期的含量改变及其临床意义

目的观察正常成年男女、老年男女及低外力作用下发生髋部骨折的老年男女血清中sclerostin、RANKL及OPG的含量变化并分析其临床意义。方法收集正常成年男女、老年男女及在2010年10月至2011年10月我院收治的低外力作用下发生股骨转子间骨折的老年患者血清样本。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各血清样本中sclerostin、RANKL及OPG的水平。数据均以均数±标准差表示。采用SPSS13.0对数据进行统计分析。结果正常成年组(A组):sclerostin 76.6±10.5 pmol/l、RANKL 0.58±0.18 ng/ml、OPG 17.3±4.6 pmol/l;正常老年组(B组):sclerostin 102.0±12.3 pmol/l、RANKL 0.25±0.12 ng/ml、OPG 12.1±3.5 pmol/l;老年骨折组(C组):sclerostin 90.8±11.0 pmol/l、RANKL 0.23±0.13 ng/ml、OPG 11.7±3.5 pmol/l。结论由以上结果经统计分析后得出,sclerostin,RANKL及OPG在不同年龄层次其表达水平具有明显差异,与年龄有相关性。在老年骨折的早期阶段(骨折后3天内)血清中sclerostin的含量已出现显著变化。而RANKL及OPG的含量在骨折早期阶段并无明显改变。由此我们认为,骨折早期血清sclerostin的水平下降在促进骨折愈合的过程中可能起到一定作用,通过人为干涉抑制sclerostin的水平对预防老年髋部骨折可能存在一定的价值。