带Se基因籼型品种的间接鉴别方法

籼粳亚种间杂种优势利用中,籼型品种带有Se感光基因是造成生育期起超长的主要原因。研究表明,带Se的籼型品种与不带Se的籼型品种在(1)品种来源;(2)生育期表现;(3)同工酶;(4)对野败型不育系的恢保关系;(5)粒型、叶色等方面存在着不同。在籼型亲本选择和新材料选育时,可以此作为鉴别、选择的依据。

龙牙楤木SE基因克隆与植物表达载体构建

采用RT-PCR的方法,从龙牙楤木中克隆到鲨烯环氧酶(SE)基因,该基因的cDNA全长为1 682 bp,含有1 644 bp的开放阅读框(ORF),编码547个氨基酸,将所得的序列提交GenBank数据库,登录号为GU354314。序列分析结果表明:龙牙楤木SE基因的氨基酸序列与人参、三七、绞股蓝的同源性>90%,并构建了该基因的植物表达载体pAeSE。

利用遗传突变基因改良特用玉米 Ⅴ.甜玉米胚乳突变基因的效应与利用

简要说明甜玉米突变基因由来以及研究近况。甜玉米在碳水化合物中形成的隐性突变基因占有相当大的比例,其种源丰富,已育成多个品种。在育种技术方面,着重介绍新方法——转座子育种技术。

茯苓鲨烯环氧酶基因克隆与表达分析

目的:从茯苓中克隆参与茯苓三萜合成路径中的潜在关键限速酶鲨烯环氧酶(SE),并对其进行生物信息学及表达分析。方法:采用试剂盒提取总RNA,反转录为cDNA,设计特异性引物,以cDNA为模板,进行SE基因的克隆,对该基因进行生物信息学分析。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检查茯苓鲨烯环氧酶基因(PcSE)在茯苓神舟10号、湘靖28、5.78菌株中的表达。结果:PcSE的基因全长为1 571 bp,包含4个外显子,3个内含子。获得编码区域(CDS)序列长为1 413 bp,编码470个氨基酸。该蛋白为疏水性蛋白,无信号肽,有2个跨膜结构域,具有FAD/NAD(P)结合域和鲨烯环氧酶结构域,定位于线粒体或质膜上。与多孔菌科真菌的同源序列比对一致性为80.92%;系统进化树显示PcSE蛋白与美国茯苓的亲缘关系最近。Real-time PCR结果显示,PcSE基因在3个菌株中均有表达,在5.78菌株中的表达量最高,3个菌株的PcSE表达差异不存在统计学意义。结论:首次从茯苓中克隆并分析茯苓PcSE基因,为进一步研究茯苓PcSE的功能及解析茯苓三萜生物合成途径提供了基础。

金黄色葡萄球菌肠毒素基因与MLST及spa分子克隆相关性研究

目的检测不同来源金黄色葡萄球菌18种肠毒素基因(se)携带率,并进行spa分型,研究se基因在MLST、spa分子克隆中的分布特征。方法对518株不同来源金黄色葡萄球菌分离株进行spa分型及肠毒素基因测定,同时对其中250株进行MLST分子分型并分析其与spa型别的关系。结果 518株金黄色葡萄球菌中,有7个基因sea、seb、seg、seo、sem、seq和sel出现的频率最高,共形成115个不同基因簇(谱)。人源、动物源和食源性菌株se基因携带状况与环境源菌株有较大差异。食源和人源分离株经典se基因sea、seb、sec、sed、see携带率显著高于动物源分离株,而人源、动物源和食源株的egc基因簇基因seg、sei、sem、sen、seo和/或selu携带率相似。大约78%的菌株可以spa分型并产生103种spa型。所有克隆复合体(CC)239菌株主要的spa型为t030和t037,与sea-sek-seq基因簇高度相关。而CC630菌株主要spa型为t4547、t2196和t377,只携带少数se基因。egc基因簇主要存在于CC5、CC9、CC1281、CC1301和ST25中。结论不同来源金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带状况及多样性与其分子克隆ST克隆、CCs、spa型别高度相关;非经典肠毒素基因是人类食物中毒的新的潜在危害。

刺五加鲨烯环氧酶基因DNA和启动子的克隆与分析

本研究以刺五加鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)基因的c DNA序列为基础设计特异性引物,利用PCR和TAIL-PCR扩增SE DNA的全长序列,结合Plant CARE等软件,对启动子中的作用元件进行生物信息学分析。克隆得到长6 307 bp的刺五加SE DNA和启动子序列,包含8段外显子、7段内含子及两端的非翻译区,编码554个氨基酸;上游启动子序列长1 907 bp,含36个TATA-box,27个CAAT-box,此外还有茉莉酸甲酯调控元件、脱落酸调控元件以及光调控元件等多种顺势作用元件,表明SE基因表达受植物激素、光照以及温度等多种因素的调控。