Efficacy of Sea Buckthorn Therapy in Patients with Nonalcoholic Fatty Liver Disease

Aim: To evaluate the clinical efficacy of the traditional Chinese medicine sea buckthorn (SBT) in the treatment of patients with nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). Method: 94 patients with NAFLD were randomly divided into two groups: 48 cases of patients received oral sea buckthorn 1.5 g (3 times a day) for three months as the treated group, and 46 cases received only the vehicle for three months as the control group. Serum lipids, transaminase and serum liver fibrosis indices were assessed at baseline and after SBT treatment. All patients underwent liver CT and Fibroscan examination at baseline and after treatment. Results: SBT treatment resulted in a significant decrease in the serum levels of alanine aminotransferase (ALT), LDL-C, hyaluronic acid and collagen type IV. The liver stiffness measurement (LSM) of the treated patients was significantly lower than that in the control or baseline. The CT liver/spleen ratio of the treated patients was also significantly increased. Conclusion: The results of our study demonstrated the beneficial effects of SBT on serum lipids, transaminase, and liver/spleen ratio and liver stiffness in patients with NAFLD, which may be further developed as a promising therapy for the treatment of NAFLD.

锰胁迫和性别竞争交互处理下沙棘雌雄幼苗生理响应特征

沙棘(Hippophae rhamnoides)是重要的雌雄异株人工林防护树种,但对其环境胁迫的性别响应差异研究不足,性别竞争与胁迫因子的交互效应响应特征尚不清楚。为了探讨锰胁迫和性别竞争交互处理下沙棘雌雄植株的生理响应特征和耐受能力,旨在为沙棘修复土壤重金属污染提供实践指导,该文研究了锰胁迫(4000 mg·kg^(-1))和3种不同性别组合模式(雌雄、雌雌、雄雄)处理下沙棘的生理响应,分别测定雌雄沙棘叶片中叶绿素、过氧化物酶(peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总酚(total phenols,TP)、游离脯氨酸(free proline,Pro)、可溶性糖(soluble sugar,SS)、甜菜碱(glycine betaine,GB)以及锰含量。结果表明:(1)锰胁迫下,在所有竞争组合中,性间竞争的雄株(M/FM)SOD活性最高,而MDA含量与对照相比未有明显升高,表明雄株的抗氧化能力更好,膜氧化损伤程度更小。(2)锰胁迫时M/FM积累了更多的游离脯氨酸,表现出更好的渗透调节能力和耐受能力。(3)交互效应分析显示性别互作和锰胁迫交互处理显著影响了沙棘雌雄叶片的光合色素、抗氧化酶活性和渗透调节能力;主成分分析显示SOD、POD、MDA、叶绿素b(chlorophyll b,Chlb)、SS、Pro可作为重要的生理响应指示参数。该研究结果对于利用沙棘修复土壤重金属污染可提供一定的参考。

沙棘叶片表面形态特征与抗旱性的关系

观察比较了抗旱性不同的4个沙棘品种的叶片大小、叶片表皮毛和气孔的形态特征。结果表明,抗旱性强的中国沙棘叶片小,表皮毛层数多,气孔小,气孔密度大;抗旱性差的俄罗斯大果沙棘叶片大,叶表皮毛层数少,气孔大,气孔密度小;两个杂交品种介于两者之间,更趋近于母本。说明叶片大小、叶表皮毛层数和气孔大小、气孔密度等指标与沙棘抗旱性密切相关。

不同土壤水分条件下中国沙棘雌雄株光合作用、蒸腾作用及水分利用效率特征

采用LI-6400便携式光合系统对野外不同生境(沟底、坡面)和田间不同土壤水分条件下中国沙棘雌雄株的净光合速率和蒸腾速率及水分利用效率特征进行了观测,结果表明,中国沙棘雌雄株在水分条件较好的生境中均表现较强的生活力,净光合速率和蒸腾速率主要受光照强度和大气温度的影响,雄株表现出更高的光合、蒸腾、水分利用效率;在水分条件较差的生境中,雌雄株均通过降低蒸腾和提高水分利用效率来适应逆境,净光合速率和蒸腾速率的影响因子增多,雄株的光合速率大幅度下降,雌株仍保持较高的光合速率,雌株的水分利用效率高于雄株。可见,在反映植物瞬时生理变化的性状方面,雌株对土壤水分减少表现出了更强的适应性,雄株对土壤水分变化表现出了更大的敏感性。

大果沙棘黄酮对糖尿病小鼠血脂与抗氧化水平的影响

目的:研究大果沙棘黄酮对四氧嘧啶(ALX)诱导的糖尿病小鼠的血脂及抗氧化水平的影响。方法:用ALX制造糖尿病小鼠模型,大果沙棘黄酮(SBPF)分为低(3.0(mg/kgbw·d))、中(30.0mg/(kgbw·d))、高(90.0(mg/kgbw·d))3个剂量组,连续灌胃4周。结果:与模型组相比,BFH能极显著地降低ALX诱导的糖尿病小鼠血糖水平、血脂水平、丙二醛(MDA)和尿素氮(BUN)含量,提高胰岛素水平、肝(肌)糖元含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、麦芽糖酶(CAT)活性,增强机体抗氧化能力,同时可调节糖尿病小鼠的饮食水平。结论:SBPF能有效的控制糖尿病小鼠血糖水平、血脂水平,提高小鼠机体抗氧化能力。

沙棘酸凝乳的研制

以沙棘汁和牛乳为主要原料,配以蔗糖、稳定剂等辅料,研制出了富有营养和保健功能的沙棘果汁酸牛乳。通过发酵条件和物料配比的正交试验、稳定剂品种试验,优选出最佳工艺和配方。

沙棘籽原花色素组成和结构的研究

采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术分析鉴定沙棘籽原花色素单体和寡聚体组分,采用SephadexLH-20柱色谱按聚合度大小对沙棘籽多聚体组分进行分级,并通过苄硫醇酸降解反应(简称硫解)对各分级组分的组成结构特征进行分析。共检测到4种单体和8种二聚体:4种单体分别为儿茶素、表儿茶素、棓儿茶素和表棓儿茶素;二聚体包括3种原花青素二聚体、1种原飞燕草素二聚体和4种混合二聚体。并根据ESI提供的质谱信息,分析确定了混合二聚体组成单元的连接顺序。棓儿茶素是构成多聚体各分级组分末端单元的主要组成成分,棓儿茶素和表棓儿茶素(合并计算)是构成各分级组分延伸单元的主要组成成分;平均聚合度为9.1、13.2和17.0,原飞燕草素比例为69.2%、84.6%、87.4%的三个分级组分是多聚体的主要成分,占多聚体总量的74.7%。

5个大果沙棘新品种在山西引种试验初期的成活表现

大果沙棘为我国从俄罗斯和蒙古引进的沙棘优良品种，已在我国东北高纬度地区获得较好的引种效果。本研究于2006年在山西（37°30′N，112°35′E）引种栽培了5个大果沙棘品种，目的是观察引种栽培初期的成活表现，研究其适应性特征，为扩大引种栽培区域提供基础依据。试验结果表明，不同沙棘品种的成活率有很大差异。及时除草管理的条件下，壮圆黄、深秋红和无刺丰的成活率分别为75％～85％、62．5％～95％、57．5％～77．5％，绿洲2号和辽阜1号的成活率较低，分别为27．5％～47．5％和20％～37．5％。秋末冬初定植后，用湿润土覆盖苗木地上部分，可提早发芽展叶时间，提高成活率。生长期杂草竞争和虫害对大果沙棘的初期生长表现有很大影响，在大果沙棘的引种栽培中应予以重视。

沙棘籽粕原花青素制备、体外抗氧化及细胞活力评价

本实验优化了沙棘籽粕原花青素的提取方法,条件为80%乙醇,提取温度35℃,液料比8∶1 m L/g,时间1.5 h,p H3.0,在该条件下的原花青素提取率为(97.31±0.48)mg/g沙棘籽粕;对提取得到的原花青素提取物进行了DPPH自由基和羟自由基清除能力实验,并分析得到IC_50,发现沙棘籽粕原花青素提取物的DPPH自由基清除能力较维生素C强;羟自由基清除能力较弱;MTT法测定了沙棘籽粕原花青素提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞活力的抑制作用,分析得到24、48、72 h处理时间下提取物IC_50分别为542.78、199.25、82.58μg/m L。结论:沙棘籽粕提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞具有一定的抑制作用,随着剂量和时间的增加,呈逐渐增强的趋势。

生物酶法提取沙棘果渣总黄酮工艺的优化

用生物酶法提取沙棘(Hippophae rhamnoides)果渣中的总黄酮,通过单因素试验和正交试验优化提取工艺。结果表明,酶解体系各因素对总黄酮提取率影响的大小顺序为酶用量、酶解温度、酶解时间、pH,最佳提取条件为生物酶用量占沙棘果渣质量的4%、pH 5、酶解温度60℃、酶解时间120 min,料水质量比1∶30,此条件下总黄酮提取率可达到0.796%。与有机溶剂回流法和超声波法相比,生物酶法所得沙棘果渣的总黄酮提取率分别提高了51.91%和48.51%。

酶法转化糖苷型沙棘叶黄酮生成苷元工艺优化

为提高聚半乳糖醛酸酶(Pectinex Ultra SP-L)转化沙棘叶黄酮苷元得率,在单因素分析的基础上进行响应面试验。选择酶解时间、酶解温度和pH值为自变量,转化得到的黄酮苷元总质量为响应值。结果显示,酶解时间为显著影响因素,酶解温度和pH值影响不显著。确定了酶解转化的最佳条件为:酶解温度50.8℃,酶解pH值5.16,酶解时间2.5h,在此条件下15mg沙棘叶提取物得到黄酮苷元0.1801mg,转化率为62%。

西藏沙棘叶片黄酮含量与生态因子的相关性

西藏沙棘(Hippophae tibetana Schlecht.)是分布于青藏高原的一种人工造林先锋树种和重要资源植物,其叶片富含生物活性物质黄酮,阐明西藏沙棘叶片黄酮含量及其与生态因子之间的关系对西藏沙棘资源开发具有指导意义。以甘肃、青海和四川分布的26个西藏沙棘(Hippophae tibetana Schlecht.)自然种群为研究对象,通过野外调查取样及室内分析,测定了西藏沙棘叶片4种黄酮含量,采用冗余分析(Redundancy Analysis,RDA)方法分析了西藏沙棘叶片黄酮与11个生态因子(包括海拔、纬度、经度、年均降雨量、年均温度、年最高气温、年最低气温、1月气温、7月气温、风速和水蒸汽压)的关系。结果表明:西藏沙棘叶片中杨梅素、槲皮素、山奈酚、异鼠李素和总黄酮平均含量分别为0.13、2.00、1.08、3.51和6.73mg·g^(-1),各类黄酮平均含量排序为:异鼠李素>槲皮素>山奈酚>杨梅素。RDA分析表明,环境变量对沙棘黄酮总解释量为59.9%,西藏沙棘叶片总黄酮含量随纬度(F=8.632,P=0.004)的增加而降低,随海拔(F=9.723,P=0.006)、1月气温(F=5.525,P=0.014)、年均降雨量(F=5.425,P=0.022)和水蒸汽压(F=3.682,P=0.048)的增加而增加,说明高海拔地区生态环境条件有利于叶片黄酮的富集;杨梅素、槲皮素、异鼠李素随空间和生态因子显示出一致的变化规律,但山奈酚含量无显著变化规律。

不同尾矿库沙棘生长状况研究

通过对承德铜矿、铁矿、银矿3种尾矿库栽植的沙棘生长状况进行研究发现,沙棘对土壤的要求不严格,不覆土成活率可达到60%,覆土可以达到95%以上。3种尾矿沙都严重缺氮,沙棘本身具有固氮作用,能增加尾矿沙中氮的含量。种植在覆土铜矿、铁矿、银矿尾矿沙上的沙棘,株高年均增长量、地径年均增长量以及根长年均增长量铁矿最大,铜矿次之,银矿最小。因此,沙棘是尾矿库绿化的优良先锋树种。

沙棘半家系及果实不同成熟期果肉含油量变化

沙棘（Hippophae rhamnoides L.）油富含100多种对人体有益的生物活性物质,但沙棘果肉与种子的含油量均较低,所以提高沙棘含油量的遗传改良一直是沙棘育种的目标。利用微量提取法分别测定了1个沙棘半家系和2个沙棘品种果实不同成熟期的果肉含油量。结果表明,BHi727115半家系不同F1代个体间干果肉含油量存在显著差异,介于12.64%～26.94%,平均值为20.15%（n=59）;BHi72715和BHi72782品种的干果肉含油量分别介于21.08%～25.09%与20.43%～25.72%;在果实不同成熟期,果肉含油量变化在不同品种间存在明显差异。首次分析了沙棘半家系果肉含油量的变异,可为沙棘育种提供科学依据;不同成熟期的研究结果则可为沙棘果实的采收与加工利用提供参考。

植物生长调节剂对沙棘硬枝扦插成活率的影响

为创新沙棘苗木繁殖技术,使用ABT生根粉和GGR生长调节剂研究其对沙棘硬枝扦插成活率的影响。结果表明:ABT生根粉和GGR生长调节剂都可以有效提高沙棘硬枝扦插成活率,其中扦插成活率与移栽成活率最高的是GGR生长调节剂处理的深秋红品种,分别为96.77%、88.70%;在同一种生长调节剂处理下,成活率由高到低依次为深秋红>芬兰>TF2-28>久黄。

沙棘7个亚种与26个重要品种的遗传多样性

利用14个微卫星标记分析了沙棘Hippophae rhamnoides 7个亚种和26个大果沙棘品种的遗传多样性,采用系统发育树和贝叶斯聚类方法分析了这些个体的聚类情况。结果显示:中国沙棘H.rhamnoides subsp.sinensis和云南沙棘H.rhamnoides subsp.yunnanensis遗传多样性水平最高,高加索沙棘H.rhamnoides subsp.caucasica最低。系统发育树将所有个体聚为2个大支:亚洲分支和欧洲分支。大部分大果沙棘品种与亚洲的蒙古沙棘H.rhamnoides subsp.mongolica聚为1支,少量个体位于亚洲分支和欧洲分支之间。贝叶斯聚类分析将所有个体划分为3组或7组:分3组时,中国沙棘和云南沙棘为一组,蒙古沙棘和大部分大果沙棘品种为一组,溪生沙棘H.rhamnoides subsp.fluviatilis,高加索沙棘和海滨沙棘H.rhamnoides subsp.rhamnoides为一组;分7组时,除海滨沙棘由溪生沙棘组和高加索沙棘组共同构成外,其他亚种和大果沙棘品种各自为一组,并发现少量组间混合基因型。表明沙棘种下亚种间分化明显,亚洲和欧洲分布的沙棘亚种间的分化尤为明显;大果沙棘品种大部分源于蒙古沙棘亚种,个别品种可能为蒙古沙棘和欧洲沙棘亚种间的杂交后代。

沙棘SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

为建立适合沙棘(Hippophae rhamnoides L.)的SRAP-PCR反应体系,对影响SRAP-PCR的Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、模板DNA浓度进行了优化。优化后的反应体系为Mg2+3.0 mmol/L、Taq DNA聚合酶2U/25μL、引物0.8μmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、模板DNA 30 ng/25μL,反应总体系25μL。利用此体系从30对引物组合中筛选出17对适合沙棘SRAP-PCR的引物,有助于沙棘的分子标记辅助育种研究。

沙棘UGT基因家族的全基因组鉴定与表达分析

[目的]本研究通过系统检测沙棘UGT基因家族成员,探讨其结构特征及潜在功能,为解析沙棘类黄酮糖苷生物合成机制及其积累模式奠定基础。[方法]利用BLASTP和hmmsearch搜索沙棘基因组,并通过Pfam、CDD和SMART数据库验证保守结构域。使用Prot-Param、MUSCLE、MAGA7.0、MEME、MCScanX等工具分析蛋白理化性质、系统发育、蛋白基序和基因结构及基因复制事件。利用转录组数据和实时荧光定量PCR分析沙棘UGT基因在果实发育过程中的表达模式。[结果]本研究从沙棘基因组中鉴定出89个沙棘UGT基因,全部包含UGT基因家族保守结构域PSPG box。通过分析发现:沙棘UGT蛋白长度为266~533氨基酸,平均分子量50.00 KDa,平均等电点5.89。根据系统发育关系,可将89个沙棘UGT分为16个组,其中,A组包含最多的沙棘UGT基因家族成员。除7号染色体外,UGT基因共分布在11条沙棘染色体上。研究发现,串联重复是导致沙棘UGT基因家族扩张的主要复制事件。转录组分析和实时荧光定量PCR表明,大部分基因具有广泛的果实发育阶段特异性表达。[结论]本研究提供了沙棘UGT基因家族的完整信息,为进一步研究沙棘基因家族成员的生物学功能提供了数据参考和理论依据。

发芽鹰嘴豆多肽/沙棘复合饮料配方优化

以发芽鹰嘴豆蛋白为原料制备发芽鹰嘴豆多肽,通过单因素和响应面试验,优化酶解发芽鹰嘴豆蛋白制备发芽鹰嘴豆多肽的最佳工艺、发芽鹰嘴豆多肽复合饮料的配方并分析发芽鹰嘴豆多肽/沙棘复合饮料的抗氧化活性。结果表明,酶解发芽鹰嘴豆蛋白制备发芽鹰嘴豆多肽的最佳工艺条件为底物浓度1%,加酶量12000 U/g,酶解时间1.5 h。响应面法优化分析该饮料的最佳配方参数为可溶性固形物含量9.0%,多肽添加量25.0%,沙棘浓缩汁添加量2.0%,饮料对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别为95.31%、94.53%。

沙棘种子油中脂肪酸组成的微量分析

以3个沙棘品种(亚历山大12号、实优1号和丘伊斯克×中国无刺雄)的果实为材料,通过气-质联用法建立了沙棘种子油中脂肪酸组成的微量分析技术。脂肪酸用标准品结合质谱进行定性确证分析,脂肪酸组成用峰面积归一法计算。结果表明,沙棘种子油中富含不饱和脂肪酸(71.2%～76.0%),其中亚油酸(C18∶2n-6)含量最高(35.6%～39.0%),α-亚麻酸(C18∶3n-3)含量次之(27.8%～33.4%)。