海参体壁中α-1,4淀粉酶的分离纯化及性质

通过采用匀浆、硫酸铵盐析、透析、DEAE-52阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶层析等方法从海参体壁中分离纯化并得到了α-1,4淀粉酶。结果表明,该酶具有3条亚基链,分子质量约为420 k D;最适p H值为9.0,最适温度为80℃,90℃条件下保温30 min后仍有38%以上的相对酶活性,因此,该酶是一种具有较高热稳定性的碱性高温淀粉酶。K+、Fe3+和Mn2+对其有较强的抑制作用,Cu2+和Ca2+对其有较强的激活作用。

附着基的摆放方式对仿刺参幼体附着的影响

在水温17-20℃下，将仿刺参（Apostichopus japonicus）耳状幼体放入200cm×30cm×35cm的长方形水槽中，投喂盐藻（Dunaliella salina）和牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）的等比例混合液（密度为8000个·mL-1），常规管理。待耳状幼体后期，投放9组、每组由3层20cm×30cm的聚乙烯波纹板组成的附着基，其中3组与水槽底水平放置（0°），3组垂直（90°）于水槽底放置，3组与水槽底呈45°角倾斜放置，每种设置3个平行。经28d的饲养表明：仿刺参幼体的附着率随着附着基摆放深度的加深而增大，随倾斜角度的增大而减少。水平放置的附着基的附着率比45°倾斜放置的高253.43%，比垂直放置的高283.51%，差异极显著（P〈0.001）；但45°倾斜角放置的附着基比垂直放置的高8.51%，差异不显著（P〈0.05）。水平放置的附着基下层的附着率比中层高63.31%,差异不显著（P〉0.05）,比上层高170.23%，差异极显著（P〈0.01）。文中讨论了水平放置的附着基和附着基下层仿刺参幼体附着率高的机理。

同位素稀释液相色谱-串联质谱法快速测定海参中氯霉素

建立了利用同位素稀释-液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）快速检测海参（Holothuria）中氯霉素（chloramphenicol,CAP）残留量的分析方法。样品中加入氨水后,用乙酸乙酯提取,经浓缩后,正己烷去脂净化。采用C18反相色谱柱进行分离,以水-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,用配有电喷雾离子源的三重四级杆质谱进行多反应离子（MRM）监测,同位素稀释内标法定量。CAP在0.1~2.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数不低于0.999 3,以3倍信噪比（S/N）确定检出限（LOD）为0.06μg/kg,以10倍信噪比确定其定量限（LOQ）为0.1μg/kg。海参中CAP在0.1~3.0μg/kg加标范围内的回收率为88.2%~98.2%,批内相对标准偏差（Intra-RSD）为2.3%~4.1%,批间相对标准偏差（Inter-RSD）为3.6%~4.6%。该方法灵敏度高,操作简便,稳定性好,适用于海参中氯霉素残留量的定性和定量检测。