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杂交诱捕实时荧光PCR检测番茄环斑病毒 被引量:8
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作者 赵文军 陈红运 +1 位作者 朱水芳 谭天伟 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期666-669,共4页
A new virus detection method was developed by combining hybridization capture and real-time PCR technology with the sample of Tomato ringspot nepovirus.High purified DNA or RNA was crucial for the real-time PCR detect... A new virus detection method was developed by combining hybridization capture and real-time PCR technology with the sample of Tomato ringspot nepovirus.High purified DNA or RNA was crucial for the real-time PCR detection as the inhibitors of PCR reaction in template and might cause the false-negative cases.A probe was covalent bound to the surface of PCR tube for the DNA capture followed by real-time PCR detection.The steps of nucleic acids preparation and detection were both done in one the same tube.This method reduced the possibility of contamination as well increased the detection efficiency.It can be applied in plant virus detection especially for the sample with many inhibitors of PCR reaction. 展开更多
关键词 实时荧光PCR检测 番茄环斑病毒 杂交 检疫性有害生物 PCR产物 特异性检测 诱捕 电泳技术
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HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中应用价值的Meta分析 被引量:20
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作者 梁馨元 谢杏美 肖小敏 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期454-458,共5页
目的:评价HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的临床应用价值。方法:检索数据库并筛选英文文献,对纳入文献进行质量评估,提取纳入研究的特征信息。以宫颈组织病理诊断为金标准,研究HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中应用价值的相关文献进... 目的:评价HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的临床应用价值。方法:检索数据库并筛选英文文献,对纳入文献进行质量评估,提取纳入研究的特征信息。以宫颈组织病理诊断为金标准,研究HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中应用价值的相关文献进行Meta分析。结果:共纳入10篇文献,纳入文献稳定性好,研究对象共计44477例。对参与筛查人群诊断级别CINⅡ及以上(CINⅡ^+)的宫颈病变,HPV E6/E7 mRNA检测和HPV DNA二代杂交捕获检测(HC2)的合并敏感度分别为0.89(95%CI 0.85~0.91)及0.92(95%CI 0.90~0.95);合并特异度分别为0.93(95%CI0.93~0.93)及0.90(95%CI 0.90~0.90)。诊断级别CINⅢ及以上(CINⅢ^+)的宫颈病变,两者合并敏感度无明显差异,HPV E6/E7 mRNA检测的合并特异度较高。结论:与HC2检测相比,HPV E6/E7 mRNA检测CINⅢ^+的宫颈病变表现出较高的特异度。HPV E6/E7 mRNA检测可作为宫颈癌病变启动监测指标,可提早发现高级别病变,提早进行临床干预,改善患者临床结局。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 E6/E7 MRNA检测 HPV DNA二代杂交捕获检测 宫颈癌筛查 META分析
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实时荧光PCR在人乳头瘤病毒临床检测中的应用 被引量:5
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作者 胥文 《中国当代医药》 2013年第7期76-77,79,共3页
目的分析和探讨实时荧光PCR技术在人乳头瘤病毒(HPV)中的检测价值。方法随机选取2010年10月~2011年10月于本院妇产科接受诊治的人乳头瘤病毒感染患者102例,分别使用第二代杂交捕获法(HCⅡ)和实时荧光PCR对102例患者的标本进行检测,结... 目的分析和探讨实时荧光PCR技术在人乳头瘤病毒(HPV)中的检测价值。方法随机选取2010年10月~2011年10月于本院妇产科接受诊治的人乳头瘤病毒感染患者102例,分别使用第二代杂交捕获法(HCⅡ)和实时荧光PCR对102例患者的标本进行检测,结合患者的病理资料对两种检测方法的结果进行比较分析。结果病理资料显示本组病例中宫颈上皮内瘤变(CIN)的有38例,慢性宫颈炎和鳞状上皮病变的36例,HCⅡ和实时荧光PCR对CIN的HPV阳性检出率分别为86.84%和94.74%,对慢性宫颈炎和鳞状上皮病变的阳性检出率分别为36.11%和58.33%;HCⅡ的HPV总阳性检出率为62.75%,实时荧光PCR为71.57%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05),两种方法的总符合率为82.35%;两种手段在高危型宫颈病变的检测具有较好的相关性,实时荧光PCR的灵敏性和特异性要略好于HCⅡ。结论实时荧光PCR和第二代杂交捕获法是临床上检测人乳头瘤病毒的有效方法,实时荧光PCR具有较好的灵敏性和特异性,为宫颈类疾病的早发现和治疗提供可靠的依据。 展开更多
关键词 实时荧光PCR 第二代杂交捕获法 人乳头瘤病毒 检测
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免提核酸的高通量DNA检测技术
4
作者 赵亚玲 郑直 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第6期881-886,共6页
目的介绍一种基于捕获的高通量DNA检测技术,无需核酸提取,适用于不同样品的各种应用,以提供遗传分析有力的技术手段。方法全血、唾液、干血斑和口腔拭子等样品裂解后释放DNA,经热变性后,通过与一系列特异探针杂交使靶DNA被捕获至96孔板... 目的介绍一种基于捕获的高通量DNA检测技术,无需核酸提取,适用于不同样品的各种应用,以提供遗传分析有力的技术手段。方法全血、唾液、干血斑和口腔拭子等样品裂解后释放DNA,经热变性后,通过与一系列特异探针杂交使靶DNA被捕获至96孔板;洗去未结合探针后,直接利用特异性引物进行荧光定量扩增(qPCR),或用酶连接连续排列的杂交探针,形成两端为特定序列的单链DNA模板,最后用通用引物进行qPCR分析;以全血中P16基因为靶标评估免提核酸技术的DNA检测效果,并将其应用于全血、血清及干血片样品中寄生虫DNA的检测,评估其灵敏度和特异性,同时评估了不同储藏方法下唾液及口腔拭子DNA检测的稳定性。结果成功应用于全血、干血斑、唾液、口腔拭子等多种样品的DNA检测;无需核酸提取,唾液及拭子样品在室温及4℃下保存15d后检测仍具有较高的稳定性;该方法对疟原虫的检测下限低至0.06个疟原虫/μL,较传统镜检具有更高的灵敏度,可准确检测到被感染样品中的寄生虫DNA。结论建立了无需核酸提取的高通量DNA检测技术,适用于不同样本类型及靶标检测,为大规模基因筛查分析提供一个灵敏、高效的工具。 展开更多
关键词 DNA检测 杂交捕获 高通量 核酸提取
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国产高危型人乳头瘤病毒杂交捕获定量分型技术筛查子宫颈癌/癌前病变的效果分析 被引量:5
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作者 潘俊泉 黄韬 +2 位作者 吴钦生 张莲香 吴新良 《基层医学论坛》 2019年第34期4890-4892,共3页
目的探讨国产高危型人乳头瘤病毒(HPV)杂交捕获定量分型技术(DH3)筛查子宫颈癌/癌前病变的效果。方法选取我院2018年5月-2019年5月行宫颈癌筛查者3068例,均行国产高危型HPV DH3、TCT检查及病理检查,以病理结果作为金标准,计算国产高危型... 目的探讨国产高危型人乳头瘤病毒(HPV)杂交捕获定量分型技术(DH3)筛查子宫颈癌/癌前病变的效果。方法选取我院2018年5月-2019年5月行宫颈癌筛查者3068例,均行国产高危型HPV DH3、TCT检查及病理检查,以病理结果作为金标准,计算国产高危型HPV DH3、TCT诊断的准确度、灵敏度、特异度、阴性预测值。结果3068例患者经宫颈组织病理诊断为正常或炎症的有2995例,宫颈上皮内瘤变CIN Ⅰ级19例,CIN Ⅱ级21例,CIN Ⅲ级29例,鳞状细胞癌4例,阳性率为2.38%;DH3阳性检出率为95.89%(70/73),其中2种高危型19例,12种高危型51例;TCT诊断癌前病变及宫颈癌阳性检出率为60.27%(44/73);DH3诊断准确度、灵敏度、特异度、阴性预测值均较TCT高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论国产HPV DH3在子宫颈癌及癌前病变的筛查中具有显著效果,可有效提升诊断灵敏度及特异度,值得临床推广。 展开更多
关键词 子宫颈癌/癌前病变 国产高危型HPV杂交捕获定量分型技术 宫颈液基薄层细胞学检测 诊断效果
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宫颈脱落细胞高危型人乳头状病毒核酸扩增微板杂交捕获检测的临床意义
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作者 赵春辉 常月琴 《实用医技杂志》 2007年第5期548-549,共2页
目的:探讨核酸扩增(PCR)微板杂交捕获检测宫颈脱落细胞内高危型人乳头状病毒(HPV)感染的临床意义,建立快速、灵敏的检测方法。方法:采用PCR微板杂交捕获检测140例宫颈脱落细胞高危型HPV(HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59/68)感... 目的:探讨核酸扩增(PCR)微板杂交捕获检测宫颈脱落细胞内高危型人乳头状病毒(HPV)感染的临床意义,建立快速、灵敏的检测方法。方法:采用PCR微板杂交捕获检测140例宫颈脱落细胞高危型HPV(HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59/68)感染状况。结果:细胞学诊断低度鳞状上皮内病变(LSIL)56例,高危型HPVDNA阳性18例(阳性率为32.5%);细胞学诊断高度鳞状上皮内病变(HSIL)42例,高危型HPVDNA阳性25例(阳性率为59.5%);未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)31例,高危型HPVDNA阳性11例(阳性率为35.5%);鳞状细胞癌9例,高危型HPV阳性8例(阳性率88.9%)。结论:PCR微板杂交捕获检测宫颈脱落细胞内高危型HPV感染,具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,适用于大规模筛查和临床常规工作。 展开更多
关键词 宫颈脱落细胞 人乳头状病毒 微板杂交捕获法
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宫颈细胞学联合HC-Ⅱ-HPV DNA检测对宫颈病变诊断价值 被引量:2
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作者 纪巧云 郑朝晖 《社区医学杂志》 2019年第4期220-224,共5页
目的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染具有普遍性,但绝大部分感染是暂时性的,可被机体清除掉,只有极少数人持续性或反复性HPV感染导致细胞向恶性转化,发生宫颈癌前病变及宫颈癌的风险大大增加。本研究探讨高危型人乳头瘤病毒... 目的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染具有普遍性,但绝大部分感染是暂时性的,可被机体清除掉,只有极少数人持续性或反复性HPV感染导致细胞向恶性转化,发生宫颈癌前病变及宫颈癌的风险大大增加。本研究探讨高危型人乳头瘤病毒(high risk human papilloma virus,HR-HPV)检测在宫颈异常细胞学中的临床诊疗价值。方法收集2017-12-01-2018-12-31在深圳市龙岗中心医院妇产科门诊进行宫颈液基细胞学检查、TBS细胞分类诊断和第二代杂交捕获检测(hybrid caprureⅡ,HC-Ⅱ)HPV-DNA的结果,筛选出细胞学异常者2 734例,其中HPV阳性1 934例,阴道镜下宫颈活检1 676例。将宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ(cervical intraepithelial neoplasiaⅠ,CINⅠ)及以上病变列为组织病理学诊断阳性病变,以组织病理学诊断为"金标准",通过对HC-ⅡHPV DNA检测结果分析,评价该筛检方法在宫颈细胞学异常中的临床诊疗价值。结果细胞学异常病例2 734例中,包括意义不明确的非典型鳞状细胞(atypical squamous cell of undetermined significance,ASCUS)1 006例、低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)1 094例、不能排除高级别鳞状上皮内病变的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cell,cannot exclude high-grade squamous intraepithelial lesion,ASC-H)156例、高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)436例、鳞状细胞癌/腺癌(squamous cell carcinoma/adenocarcinoma,SCC/AC)19例和非典型腺上皮细胞(atypical glandular cells,AGC)23例,其中HPV阳性1 934例,HPV检出率依次为51.8%、82.3%、69.9%、86.5%、94.7%和39.1%,HPV检出率比较差异有统计学意义,χ~2=313.32,P<0.001。HPV检出率随宫颈病变程度加重呈趋势性升高,且HPV阳性组的病理诊断阳性率高达51.8%。阴道镜下宫颈活检病例1 676例,病理诊断为无上皮内病变或恶性病变(negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM)894例、LSIL 269例、HSIL 447例、SCC/AC66例,HPV阳性率依次为72.5%、88.5%、88.8%和92.4%,HPV阳性率的差异有统计学意义,χ~2=72.202,P<0.001,HPV阳性率也随宫颈病变程度加重呈趋势性升高,且病理诊断阳性组的HPV阳性率高(89.0%)。以组织病理诊断作为"金标准",评价HC-ⅡHPV-DNA诊断效能,新柏氏液基细胞学检测(thinprep cytologic test,TCT)诊断为ASCUS、LSIL、ASC-H、HSIL组的HC-ⅡHPV-DNA检测结果中,HPV阳性的病理阳性率与HPV阴性的病理阳性率比较差异均有统计学意义,P<0.001;TCT诊断为ASCUS、ASC-H、LSIL、HSIL、SCC/AC组HC-ⅡHPV-DNA检测灵敏度依次为:78.3%、87.5%、93.4%、87.5%、90.7%和94.7%;TCT诊断为ASCUS、ASC-H、LSIL和HSIL组的约登指数依次为0.168、0.109、0.282和0.182;Kappa值依次为0.14、0.08、0.29和0.21。结论宫颈细胞学联合HC-ⅡHPV-DNA检测对宫颈病变的诊断虽有一定的灵敏度,但特异度较差,与金标准诊断的一致性较差。 展开更多
关键词 液基细胞学检测 第二代杂交捕获试验 人乳头瘤病毒 宫颈病变
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高危型人乳头瘤病毒含量检测对宫颈上皮内瘤变筛查的意义 被引量:15
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作者 陆妹英 易驰喆 +2 位作者 张雪梅 李婷 以敏 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 2022年第1期9-11,共3页
目的探讨三代杂交捕获定量分型技术(DH3)检测人乳头瘤病毒(HPV)含量联合宫颈液基薄层细胞检测(TCT)对宫颈上皮内瘤变筛查的作用。方法选择2019年11月至2021年3月于广西医科大学第四附属医院、柳州市工人医院病理科同时进行DH3和TCT宫颈... 目的探讨三代杂交捕获定量分型技术(DH3)检测人乳头瘤病毒(HPV)含量联合宫颈液基薄层细胞检测(TCT)对宫颈上皮内瘤变筛查的作用。方法选择2019年11月至2021年3月于广西医科大学第四附属医院、柳州市工人医院病理科同时进行DH3和TCT宫颈筛查的女性患者4013例,以病理学检查结果为金标准,对结果进行比较分析。结果在4013例患者中,DH3检测阳性1666例,阴性2347例;TCT阳性1066例,阴性者2947例;病理学检查阳性237例,阴性1431例。DH3定量检测中,HPV含量高于10的病例与病理学检查高级别鳞状上皮内瘤变相符,低级别鳞状上皮内病变诊断病例上稍有偏差,多数病例HPV含量处于临界值。结论HPV病毒含量检测联合TCT筛查宫颈癌可以降低单项检查的误诊率和漏诊率,定量检测有助于对误诊和漏诊病例进行重新审查,对宫颈上皮内瘤变分流和级别筛查具有较高的临床意义。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 液基薄层细胞检测 杂交捕获定量分型 病毒含量
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人乳头瘤病毒分型联合宫颈液基薄层细胞学检测在宫颈癌筛查中的应用 被引量:9
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作者 易驰喆 陆妹英 +2 位作者 苏讷敏 李菲凡 以敏 《上海预防医学》 CAS 2022年第1期73-76,共4页
【目的】探讨第三代人乳头状瘤病毒核酸检测杂交捕获定量分型技术(DH3)分型检测人乳头瘤病毒(HPV)联合宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)在宫颈癌筛查中的应用价值。【方法】选择2020年10月—2021年3月在广西医科大学第四附属医院柳州市工人... 【目的】探讨第三代人乳头状瘤病毒核酸检测杂交捕获定量分型技术(DH3)分型检测人乳头瘤病毒(HPV)联合宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)在宫颈癌筛查中的应用价值。【方法】选择2020年10月—2021年3月在广西医科大学第四附属医院柳州市工人医院进行HPV分型和TCT宫颈筛查的女性患者进行回顾性分析,共1 582例,以病理学检查结果为金标准,对结果进行分析比较。【结果】在1 582例患者中,HPV检测结果阳性334例,阴性1 248例;TCT检测结果阳性234例,阴性1 348例;病理学检查结果阳性180例,阴性1 402例。HPV分型联合TCT检测中,极度高危型和高危型HPV双重阳性检测结果与病理检查结果无差异,其他HPV单一分型阳性检测结果与病理检查结果有差异,分别检出TCT漏诊病例。HPV分型检测的灵敏度为100.0%,阳性预测值为53.9%,特异度为89.0%,阴性预测值为100.0%。HPV分型检测中,高危型HPV16和18的阳性预测值高达94.8%,其他12种高危型HPV的阳性预测值为73.8%,低级别鳞状上皮内病变诊断病例稍有偏差,高级别鳞状上皮内病变与鳞状上皮癌的诊断基本一致。【结论】HPV分型联合TCT筛查宫颈癌可降低单项检查的误诊率和漏诊率,HPV分型检测有助于对患者进行分层管理,对检查分流和级别筛查具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 液基薄层细胞检测 杂交捕获定量分型 筛查 分型检测
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高危型HPV/TCT检测在宫颈疾病筛查中的临床价值 被引量:1
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作者 李旺群 《临床急诊杂志》 CAS 2012年第4期254-255,258,共3页
目的:探讨高危型HPV(HR-HPV)检测联合宫颈液基细胞学(TCT)检查(HR-HPV/TCT)在宫颈疾病筛查中的临床价值。方法:回顾性分析2008-01-2011-01来我院就诊的自愿接受HR-HPV/TCT检测的患者2140例。对TCT异常和TCT阴性而HR-HPV阳性的患者386例... 目的:探讨高危型HPV(HR-HPV)检测联合宫颈液基细胞学(TCT)检查(HR-HPV/TCT)在宫颈疾病筛查中的临床价值。方法:回顾性分析2008-01-2011-01来我院就诊的自愿接受HR-HPV/TCT检测的患者2140例。对TCT异常和TCT阴性而HR-HPV阳性的患者386例进行阴道镜加活检检查。结果:TCT异常者327例,ASCUS(意义不明宫颈不典型鳞状上皮细胞)196例,LSIL(低度宫颈上皮内病变)93例,HSIL(高度上皮内病变)38例。病理报告炎症156例,宫颈癌前病变(CIN)160例(其中CINⅡ级和Ⅲ级共60例),宫颈癌11例。HR-HPV检出率随宫颈病变级别的增高而上升(P<0.005)。TCT阴性而HR-HPV阳性的患者59例,病理报告炎症29例,CIN27例(CINⅡ级和Ⅲ级共12例),宫颈癌3例。结论:HR-HPV/TCT检测可有效检出宫颈CIN和宫颈癌,减少漏诊率。 展开更多
关键词 HR-HPV检测 宫颈不典型鳞状细胞 二代杂交捕获
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