癞葡萄籽油的脂肪酸分布分析及共轭亚麻酸的鉴定

柱色谱法测定癞葡萄籽油中甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯含量分别为2.64%、0.66%和85.43%。研究发现猪胰脂酶定向水解法及其改进方法不适于癞葡萄籽油的脂肪酸分布分析;根据RP-HPLC/ESI-MS、紫外光谱及红外光谱的分析结果,鉴定出癞葡萄籽油所含的主要共轭亚麻酸为α-桐酸(9c,11t,13t-C18∶3),次要的2个共轭亚麻酸可能分别为石榴酸(9c,11t,13c-C18∶3)和β-桐酸(9t,11t,13t-C18∶3)。

采用大孔吸附树脂对癞葡萄酶解物进行脱盐

通过测定7种树脂对癞葡萄蛋白酶解物的吸附率和解吸率,选择DA201-C型大孔吸附树脂对癞葡萄酶解物进行脱盐。结果表明,在酶解物以60 mg/mL、0.5 BV/h流速上样,采用75%乙醇解吸的条件下,酶解物的脱盐率为92.49%,回收率为78.38%;酶解物中蛋白的含量从脱盐前的76.67%提高至脱盐后的85.69%。脱盐后的酶解物仍有显著的降血糖作用,且降血糖作用较脱盐前稍有提高。

超滤分离癞葡萄水溶性降糖活性物质

采用超滤法从癞葡萄水提物中初步分离降血糖活性物质。考察了进料流量、操作压力、操作温度及料液质量浓度等工艺参数对超滤过程中膜通量的影响,并对超滤后两组分的相对分子质量分布及降血糖活性进行了测定。结果表明:用截留相对分子质量为10 000的中空纤维膜对癞葡萄水提物进行超滤分离的最适工艺条件为:进料流量200 L/h、温度25℃、压力0.10 MPa、料液质量浓度20 g/L。超滤有效地将癞葡萄水提物分成两个组分,其中相对质量较小的组分具有显著的降血糖活性,而相对质量较大的组分不具有降血糖活性。

癞葡萄籽油脂肪酸组成的GC/MS分析

采用2-氨基-2-甲基丙醇(AMP)衍生化,GC/MS法分析癞葡萄籽油的脂肪酸组成。测定结果为:软脂酸1.65%,硬脂酸31.78%,油酸5.52%,亚油酸3.86%,十八碳共轭三烯酸55.13%,未定出成分2.07%。癞葡萄籽油的主要成分为十八碳脂肪酸,其中十八碳不饱和脂肪酸占64.51%。AMP衍生化GC/MS法可对不饱和脂肪酸双键的位置准确定位,将癞葡萄籽油中的3种共轭三烯酸的顺反异构体分开。

癞葡萄籽油的特异甘油三酯的酶法酯交换制备

采用癞葡萄籽油(MCVO)或桐油和硬脂酸甲酯作为底物,在Lipozyme TL.IM的催化下进行酯交换反应制备具有较强抗肿瘤活性的Sn-1,3-二硬脂酸-2-共轭亚麻酸甘油酯(SCLnS)。响应面试验获得最优的酶法酯交换反应条件为:在无溶剂体系里,硬脂酸甲酯4.92 g(以2 g MCVO为底物),酶量为底物质量的20%,搅拌速度204 r/min,反应温度52.4℃,反应时间4 h,得到SCLnS含量的理论值为20.03%;以MCVO为原料,实际得到SCLnS含量为19.73%;以桐油为原料,实际得到SCLnS含量为18.95%。