Selenoprotein W cDNAs From Five Species of Animals

The nucleotide sequences of the open reading frames of cDNAs for selenoprotein W from skeletal muscle of rat, mouse, sheep, rhesus monkey and human are reported. Theoretical translation of the coding sequences indicated highly similar proteins of 88 (mouse and rat) or 87 (human, monkey and sheep) amino acids. In 73 of 88 positions the specified amino acids are identical for all five proteins. TGA encoding selenocysteine is the 13th codon of all the cDNAs. The rnouse, rat and sheep open reading frames terminate with TGA but the human and rhesus monkey coding regions terminate with TAA. The encoded amino acid sequences are identical for the rat and mouse proteins, and for the human and monkey proteins. The similarity of the cDNAs continues in the 3' noncoding regions through the putative selenocysteine insertion sequence (SEClS) elements which are required for correct interpretation of the selenocysteine codon. The region between the SECIS elements and the polyadenylation signals showed much lower similarity. The cloned rat gene for selenoprotein W is 5000 bases long,with the 663 bases of the cDNA in six exons. The transcription start site was identified by nuclease protection assay to be 16 bases upstream of the longest cDNA clone. A canonical TATA box occurs 150 bases upstream, but the assay did not indicate the presence of longer mRNAs

大鼠脱碘酶、硒蛋白P和硒蛋白W正常表达所需的最低饲料硒水平

目的 研究能满足大鼠脱碘酶、硒蛋白 P和硒蛋白 W合成所需的饲料硒水平。方法 以低硒酵母合成饲料加不同剂量的亚硒酸钠配成硒水平分别为 0 .0 1、0 .0 2、0 .0 3、0 .0 4、0 .0 5、0 .0 6、0 .1 0和 0 .2 0 mg/kg的 8种饲料喂养雄性 wistar断乳大鼠。 2 0周时杀死大鼠取其组织 ,分别对各种组织中的 型、 型和 型脱碘酶、硒蛋白 P的 m RNA以及硒蛋白 W的 m RNA的水平进行测定。结果 能满足大鼠各组织 型、 型和 型脱碘酶发挥最佳活性时的最低饲料硒水平为0 .0 5mg/kg,而硒蛋白 P的 m RNA以及硒蛋白 W的 m RNA正常表达所需的最低饲料硒水平分别为 0 .0 5和 0 .0 6mg/kg。结论 饲料硒水平达到 0 .1 mg/kg可满足大鼠脱碘酶、硒蛋白 P和硒蛋白 W的合成。

人脑中硒蛋白W与鞘脂激活蛋白原相互作用的筛选与验证

硒蛋白W(SelW)是人脑中一种重要的硒蛋白.在缺硒的条件下,SelW在脑中具有优先储备的特性,但其具体机制和在脑中的功能至今尚不清楚.本文以SelW突变体SelW′为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人胎脑文库进行筛选,获得与SelW相互作用的蛋白,其中一种为鞘脂激活蛋白原(PSAP).采用荧光共振能量转移技术中的受体漂白和敏化发射两种方法,验证了SelW与PSAP的相互作用.构建表达载体在大肠杆菌中成功表达出SelW′,利用Pull-down技术验证了SelW′与PSAP在细胞外的直接相互作用.采用免疫共沉淀的方法验证了上述两种蛋白在昆明小鼠脑组织中的内源性相互作用.基于SelW和PSAP的已知生物功能,推测SelW可能在脑部发育和神经退行性疾病形成过程中发挥着重要作用.

鲤鱼硒蛋白W基因的克隆、序列分析及其组织表达

硒蛋白是一类含有硒代半胱氨酸（Selenocysteine,Sec）的蛋白质,具有抗氧化和免疫调节等多种生物学功能。尽管目前已知硒对鱼类生长发育、抗氧化和免疫等方面有着重要的作用,但是有关鱼类硒蛋白的研究还不全面,特别是对鱼类硒蛋白W（Selenoprotein W,Sel W）的结构和功能还知之甚少。为了深入研究鱼类硒蛋白的结构特征和生理作用,本文利用RT-PCR和RACE技术从肝胰脏中克隆获得了鲤鱼Cyprinus carpio Sel W的c DNA全长序列（cc Sel W）。cc Sel W c DNA全长704 bp,含有261 bp的开放阅读框,编码86个氨基酸。预测的cc Sel W分子量为9.5 k D,在其N-端含有特征序列C-X-X-U基序,且第13位氨基酸为13Sec。在cc Sel W c DNA 3’-UTR区域含有一个89 bp的Sec插入序列（Sec-insertion sequence,SECIS）,形成经典的AUGA-AA-GA型SECIS。由于在其SECIS二级结构的顶环上有一个额外的小茎-环结构,所以鲤鱼SECIS属于Ⅱ型SECIS结构。cc Sel W与斑马鱼Danio rerio和热带爪蟾Xenopus tropicalis的同源性最高,均为84.7%,与其他物种的同源性在54%~60%之间。系统发育树结果显示,cc Sel W和斑马鱼、两栖类位于同一分支上。RT-PCR结果显示,cc Sel W mRNA在所检测的11个组织中均有表达,其中以精巢中的表达量为最高,下丘脑和肠中表达量次之,其余组织中表达量大致相当,低于精巢、下丘脑和肠。这些结果丰富了鱼类Sel W的研究内容,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。

硒蛋白W生物学功能及其与疾病关系的研究进展

硒蛋白是人和动物必需微量元素硒的主要功能表现形式,硒蛋白W(selenoprotein W,Sel W)是其中比较特殊的一种,近年来对硒蛋白W的研究越来越多,尤其是硒蛋白W的生物学功能与疾病的关系日益受到关注。本文从硒蛋白W的结构特点、生物学功能及其与疾病关系的研究进展进行综述,以期为缺硒性地方病的研究提供新的思路。