菲油果嫁接和组培繁育初探

菲油果是一种具有较高发展前景的树种,但其种苗无性繁殖技术相对落后。试验以嫁接、组织培养为切入点,使用1 a生、2 a生菲油果实生苗为砧木,在3月、4月进行嫁接试验,得出适宜的砧木年龄和嫁接时间。以带芽茎段、叶片、花丝作为外植体,在WPM养基中进行培养,筛选适用的外植体种类。结果表明:1 a生和2 a生的菲油果实生苗均适合作为菲油果嫁接砧木,但1 a生实生苗培育成本低,更符合生产需要。3月为菲油果嫁接的适宜时间。

费约果茎解剖结构与插条不定根的形成

费约果（Feijoa sellowiana）是桃金娘科多年生亚热带常绿灌木,原产于巴西东南部和乌拉圭,因其果实香味类似凤梨（Ananas comosus）,又名凤梨番石榴（Thorp et al.,2002）。

费约果插条生根特征和解剖特性研究

以费约果品种尤力克当年生半木质化和木质化枝条为材料，研究了扦插时期对插条生根能力的影响，结果表明，生根结果（分别是根长、根数和生根率）半木质化枝扦插优于木质化枝扦插。采用常规石蜡切片法对费约果半木质化枝插条生根过程进行解剖结构观察，表明费约果插条无根原基存在，不定根原基为诱发型的，起源于维管形成层与髓射线的交叉区域，而在插条韧皮部连续排列成环状的厚壁细胞周围未见根原基的发生。不定根的发生主要经历了根原基的形成和不定根的产生2个过程，且大部分不定根产生于距插条基部切口0.1-2cm区域内。插条扦插过程中也形成愈伤组织.但未见愈伤组织中分化出根原基。

植物生长调节剂对菲油果嫩枝扦插生根的影响

采用L9(33)正交试验设计,研究了IBA、NAA、GGR这3种植物生长调节剂及其质量浓度(100、200、400 mg/L)和处理时间(1、2、4 h)对菲油果Feijoa sellowiana嫩枝插穗生根的影响。结果表明:3种植物生长调节剂、质量浓度和处理时间对菲油果嫩枝插穗生根的影响均达显著水平;影响生根率因素的主次顺序为植物生长调节剂种类>处理时间>植物生长调节剂质量浓度,影响根数因素的主次顺序为植物生长调节剂种类>植物生长调节剂质量浓度>处理时间,影响根长因素的主次顺序为植物生长调节剂种类>植物生长调节剂质量浓度>处理时间;以蛭石为基质,采用菲油果半木质化嫩枝插穗,经IBA(生长素)200 mg/L浸泡2 h生根效果最佳,其平均生根率为88.6%,平均根数为7.3条,平均根长为17.4 cm。

顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析费约果叶片挥发性香气成分条件优化

为了建立适合费约果叶片香气成分检测的顶空固相微萃取-气相色谱-质谱（ HS-SPME-GC-MS）分析方法，考察HS-SPME中不同萃取条件对香气萃取效果的影响，采用L9（34）正交试验，以出峰个数和总峰面积为考察指标确定最佳萃取条件。结果表明，萃取温度对出峰个数和总峰面积的影响较大，而加样量的影响较小。实验得出的较优萃取条件为：加样量0.6 g，萃取温度50℃，萃取时间50 min，解吸时间6 min。在此萃取条件下能够得到88种物质，这些物质能更真实地反映费约果叶片香气成分的化学构成，为费约果叶片的开发利用提供有价值的数据。

菲油果光合特性的日变化

利用Li-6400便携式光合测量系统对Coolidge菲油果的叶片净光合速率(Pn)等指标进行了测定,并通过多元逐步回归分析和通径分析方法探讨净光合速率与影响因子的关系.结果表明:菲油果叶片净光合速率日变化曲线为双峰型,在11:00和16:00分别出现1次高峰,具有典型的午休现象;影响菲油果叶片净光合速率的主要因子是空气相对湿度(RH)、蒸腾速率(TR)、气孔导度(GS)和胞间CO2浓度(Ci),叶面温度(Tl)、光合有效辐射(PAR)和大气CO2浓度(Ca)的影响相对较小.净光合速率与主要影响因子的多元回归方程为:Pn=22.63743-0.1651Tl-0.1622PAR-0.0016RH+0.2539Ca+8.18585GS+1.1276TR-0.04445Ci(R2=0.943).

费约果叶片提取物抗氧化活性研究

【目的】为深入了解费约果叶片在不同生长阶段的抗氧化特性,指导提取活性成分的最佳时期,【方法】以费约果叶片为材料,采用甲醇超声波辅助法对其嫩叶和成熟叶片类黄酮和多酚进行提取,并采用铁还原抗氧化力、过氧化氢清除能力以及自由基(O2-和DDPH.)清除能力等方法进行了抗氧化活性测定。【结果】结果显示,费约果成熟叶片中的类黄酮含量显著高于嫩叶,唯一的含量最高,为62.92μg.g-1。成熟叶中的多酚含量、铁还原抗氧化力、过氧化氢清除能力以及自由基(O2-和DDPH.)清除能力均低于嫩叶。【结论】研究结果说明,费约果成熟叶片可作为提取类黄酮的有效资源,而提取多酚可从费约果嫩叶着手。

费约果生物学特性及营养与药用价值研究

费约果是一种集食用、药用与观赏一体的经济价值较高的新兴果树。现介绍费约果的生物学特性,综述果实、叶片、果皮和花的营养成分与药用价值及其利用情况,并对费约果在食品、制药和化妆品等工业的应用和发展前景进行展望。

费约果叶片总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究

对费约果叶片总黄酮的提取工艺和抗氧化活性进行了研究。结果表明:费约果叶片总黄酮最佳提取工艺为温度50℃、料液比1∶30(g∶mL)、提取时间50 min和甲醇体积分数70%。根据最佳提取工艺,重复3次得到总黄酮量分别46.89、44.51、48.27 mg/g,具有稳定性和可操作性;另外,通过半抑制浓度IC50衡量费约果叶片总黄酮提取物抗氧化活性,其抗脂质过氧化能力(IC500.275 mg/mL)和DPPH.自由基的清除能力(IC500.798 mg/mL)均优于抗坏血酸(IC500.643、IC500.917 mg/mL),而超氧阴离子自由基的清除能力(IC500.774 mg/mL)和羟自由基的清除能力(IC500.278 mg/mL)均弱于抗坏血酸(IC500.537I、C500.275 mg/mL)。

菲约果果实主要营养成分及游离氨基酸分析

以引种至湖南的4个菲约果品种果实为试材,分别运用常规方法和氨基酸分析仪对其主要营养成分和游离氨基酸含量进行分析。结果表明:4个品种果实可溶性糖、Vc、可滴定酸含量差异显著,而可溶性固形物含量差异不显著;不同品种间苏氨酸、谷氨酸、丙氨酸和脯氨酸的含量差异较大,其他氨基酸差异不明显。其中,4个品种果实可溶性固形物都在11.19%～12.69%;可溶性糖含量以"Unique"最高;Vc含量从高到低依次为"Mammoth","Unique","Coolidge","Triumph";可滴定酸以"Mammoth"最高,"Coolidge"最小;总氨基酸含量以每100 g计量,最高为"Coolidge"(243.5 mg),其次为"Mammoth"(229.3 mg),最低为"Triumph"(113.8 mg)。

菲油果LEAFY基因的表达模式及启动子克隆

LEAFY(简称LFY)是植物花分生组织特征基因,在植物由营养生长向生殖生长转变过程中起着重要作用,是启动开花的枢纽。菲油果是一种新兴的果树资源,为研究菲油果LFY基因(FsLFY)的表达调控规律,本研究通过实时荧光定量PCR技术研究了FsLFY基因的时空表达模式,并通过染色体步移技术克隆了该基因的启动子序列。荧光定量PCR结果表明,FsLFY基因在菲油果花蕾不同发育阶段以及其他组织器官中均有表达。在花蕾中,小蕾期最高,中蕾期最低;组织器官中,营养枝茎段最高,花瓣最低。FsLFY基因启动子序列长度为2436 bp(GenBank登录号:KF766536),运用PLACE、PlantCARE等在线软件对其序列进行顺式作用元件分析,结果显示该序列不仅含有CAAT-box、TATA-box等核心启动子元件,而且还具有响应水分、光、赤霉素(GA)以及其他功能未知的顺式调控元件,表明FsLFY基因的表达受多种外界环境条件的调控。本研究为阐明菲油果的开花机理,以及通过分子育种手段使菲油果早花早果奠定了理论基础。

费约果叶片总黄酮的提取工艺研究

研究费约果叶片总黄酮提取工艺,优选最佳提取条件。以提取率、总黄酮收率和总黄酮纯度为指标,采用单因素试验法,考察提取溶剂、提取温度、提取时间和提取次数对费约果总黄酮收率的影响,再进行正交试验,优选出最佳提取工艺条件。最佳总黄酮提取工艺:90℃条件下,将费约果叶片粉用水回流提取3次,每次2 h,料液比分别为第1次1∶10(g/m L),第2次、第3次料液比为1∶5(g/m L)。提取率、总黄酮收率、总黄酮纯度分别为:16.23%、6.90%、42.51%。

树龄及扦插时期和采穗部位对费约果嫩枝扦插生根的影响

采用L9(34)正交试验设计,研究树龄、扦插时期和采穗部位对费约果嫩枝插穗生根的影响。结果表明:树龄、扦插时期和采穗部位对费约果嫩枝插穗生根状况的影响均达显著水平;各因素对根长影响的主次顺序为母株树龄>采穗部位>扦插时期,对根数影响的主次顺序为母株树龄>扦插时期>采穗部位,对生根率影响的主次顺序为母株树龄>扦插时期>采穗部位;以1 a生母株下部枝条作插穗,于6月20日扦插效果最佳,生根率为97.7%,插穗的平均根数为5.6条,平均根长为17.1 cm。

菲油果离体快繁再生无菌植株研究

为给菲油果离体快繁工厂化生产提供科学依据,分别以当年生菲油果嫩枝和无菌种子发芽的带芽茎段为外植体,在启动、增殖、生根等培养阶段以MS或1/2 MS为基本培养基,采用不同浓度的6-BA和IBA进行试验,筛选了适用于离体快繁的培养基组合。结果表明:无菌种子发芽的带芽茎段较容易离体快繁,且其增殖指数高达2.3;最适的启动培养基组合为MS+6-BA 0.5 mg/L,增殖壮苗培养基组合为MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L,生根培养基组合为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。

人工低温胁迫条件下菲油果各项生理指标的变化

为了探讨菲油果的抗寒特性,以引种的Coolidge和Mammoth 2个菲油果新品种成熟叶为试验材料,在人工低温胁迫条件下,对不同低温条件下叶片电导率、可溶性糖、游离脯氨酸(Pro)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)等几个生理指标的变化情况进行研究。结果表明:在一定的温度范围内,不同品种的菲油果叶片的电导率均随着温度的降低而增大;可溶性糖含量和游离脯氨酸(Pro)随着温度的降低而增加,人工越冬过程中不同品种的菲油果的游离脯氨酸(Pro)呈有规律的变化;细胞内的保护酶(SOD、POD)都表现为随着温度的降低,其活性增强;方差分析结果显示,不同品种的菲油果相对电导率、丙二醛(MDA)、游离脯氨酸(Pro)、过氧化物酶(POD)差异达到显著水平,不同温度间电导率、可溶性糖、丙二醛(MDA)、游离脯氨酸(Pro)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)差异达到极显著水平,不同品种间的超氧化物歧化酶(SOD)差异不显著。

种子贮藏方法和播种期对费约果出苗的影响

采用二因素随机区组试验设计,研究了种子贮藏方法和播种期对费约果出苗的影响。结果表明:种子贮藏方法和播种期对费约果出苗情况的影响较大,采果后立即取出种子,于清水中漂洗24 h后播种,播种至出苗天数为11 d,出苗率为93%,优于其余各处理出苗情况。

费约果果实发育过程中抗氧化物质含量与相关酶活性的关系

以费约果Coolidge果实为材料,研究了果实发育过程中总黄酮(TF)、总酚(TP)、抗坏血酸(氧化型DHAsA和还原型AsA)、谷胱甘肽(氧化型GSSG和还原型GSH)含量与相关酶活性的变化及其相互关系。结果表明,在整个果实发育过程中,TF、TP和谷胱甘肽的积累相互促进,存在极显著正相关,其含量在10月30日达到最大,分别为9.74 mg.g-1,10.41 mg.g-1和0.20 mg.g-1(总谷胱甘肽),同时三者的含量与多酚氧化酶(PPO)活性也存在极显著的正相关,其相关系数分别为r=0.934(P<0.01),r=0.900(P<0.01)和r=0.901(P<0.01);另外,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、愈创木酚过氧化物(G-POD)和抗坏血酸过氧化物酶(AsA-POD)活性在果实发育过程中下降趋势,其活性与4种抗氧化成分含量存在一定的负相关。

费约果花芽石蜡切片技术的改良

为获得用石蜡切片方法观察费约果花芽形成和分化的整个过程的最优条件,选择了3个不同发育时期的花芽进行石蜡切片技术研究。以常规石蜡切片方法为基础,在固定、软化、脱水、透明、包埋以及染色等具体方法上进行了适合费约果花芽特点的改良。结果表明:对材料进行24 h盐酸水溶液浸泡法进行软化后,采用优化后的一系列脱水、透明等步骤进行制片操作,可以得到连续的、完整的蜡带;最终获得切片通过显微观察,可见材料内部结构完整、染色清晰。优化后的石蜡切片技术,避免了常规制片过程中出现浸蜡不彻底、组织变硬变脆、蜡带不连续、内部结构不完整等问题。该研究为费约果石蜡切片技术提供了一套具体的操作步骤,同时也为与费约果花芽结构相似树种的研究提供技术参考。

费约果叶片槲皮素的提取工艺研究

[目的]研究费约果叶片槲皮素提取工艺,优选最佳提取条件。[方法]以提取率、槲皮素收率和槲皮素纯度为指标,采用单因素试验法,考察提取溶剂、提取温度、提取时间、料液比和提取次数对费约果叶片槲皮素收率的影响,优选出最佳提取工艺条件。[结果]最佳槲皮素提取工艺是在50℃条件下,将费约果叶片粉末置于10倍90%乙醇中回流提取4次,每次2 h,提取率、槲皮素收率、槲皮素纯度分别为3.486%、0.0334%、0.958%。[结论]此法高效、成本低、操作方便、工艺简单,为费约果叶片槲皮素提取工艺的进一步研究提供了依据。

菲油果研究进展

菲油果是近年来新兴起的一种集观赏、食用、美化环境于一身的树种。阐述了菲油果的主要品种、药用价值、营养价值以及经济价值,对菲油果的发展前景进行了展望,并提出了对菲油果引种栽培的意见。