超细粉碎联合半仿生技术处理的没食子残留物物理性质和生物活性分析

目的探讨经半仿生技术提取的没食子残留物(RTG)的物理性质和活性成分的变化,以及RTG的抗氧化能力。方法通过超细研磨机处理RTG,按颗粒粒径分为A组(<100µm RTG)、B组(100~300µm RTG)和C组(>300µm RTG),检测其水分、总灰分、水溶性、休止角、滑动角、崩溃角、体积密度、振实密度等物理特性;RTG经水和盐酸缓冲液的半仿生技术处理后,检测对人齿根膜韧带成纤维细胞增殖的影响及抗氧化能力。结果随着粒径的增加,RTG的水分含量显著降低(P<0.05),总灰分显著增加(P<0.05),体积密度显著升高(P<0.05),休止角、滑动角和崩溃角均显著降低(P<0.05),振实密度显著升高(P>0.05)。颗粒粒径相同时,RTG的水溶性随温度的升高而升高(P<0.05);温度相同时,水溶性随颗粒粒径的增加而减小(P<0.05)。盐酸缓冲液组总多酚含量显著高于水处理组(P<0.05),且A组显著高于B组和C组(P<0.05)。盐酸缓冲液组的OD510值显著高于水处理组(P<0.05);粒径越小,对细胞增殖作用越明显(P<0.05)。盐酸缓冲液组的DPPH、羟基自由基清除活性显著优于水处理组(P<0.05);粒径越小,RTG的抗氧化活性增加(P<0.05)。结论RTG再利用在生物技术产品开发方面具有巨大潜力,可为提高没食子的质量和临床应用提供理论依据。

基于GC-MS分析蕲艾挥发油成分及其抑菌活性研究

目的:分析半仿生法提取-水蒸气蒸馏法提取蕲艾挥发油的主要化学成分,对蕲艾挥发油抑菌活性进行研究。方法:采用半仿生法提取-水蒸气蒸馏法提取蕲艾挥发油,运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对其化学成分进行鉴定,用面积归一化法计算各组分的相对百分含量。通过平板涂布法和二倍梯度液体稀释法考察蕲艾挥发油的抑菌效果。结果:蕲艾挥发油检测到52种化学成分,初步鉴定了20种化合物,占总挥发性成分的95.95%,其化学成分主要为蒿醇(55.49%)、3,3,6-三甲基-1,4-庚二烯-6-醇(15.37%)、桉油精(11.87%)和4-萜烯醇(3.50%)等,以醇类居多。蕲艾挥发油对金黄葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和白色念珠菌、黑曲霉、黄曲霉有显著的抑菌作用。结论:蕲艾挥发油主要由醇类组成,并具有较好的抑菌活性。

沙田柚种子黄酮类物质半仿生提取及体外抗氧化能力研究

本试验采用超声波辅助,半仿生法提取沙田柚(Citrus maxima)种子黄酮类物质,并评价其抗氧化能力。沙田柚种子中类黄酮化合物有11类,数量和含量占比例较高是黄酮醇类。用模拟酸性,中性和碱性环境的溶液提取,得到类黄酮物质含量与70%甲醇提取含量没有显著差异。半仿生法提取液具有较高的Fe^(3+)还原能力、DPPH清除率和羟基自由基清除率,分别具有类黄酮浓度正相关效应。柚种子提取物具有一定的抗氧化活性,实践中可以用半仿生法提取代替有机溶剂提取柚种子活性成分,并且可以重点关注含量较多的黄酮醇类物质。

超声辅助半仿生酶法制备大豆多肽及其抗氧化活性研究

以大豆分离蛋白为原料,采用超声辅助半仿生酶法制备大豆多肽。以多肽得率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化制备工艺,并评价其抗氧化活性。结果表明:最优工艺为大豆分离蛋白1 g、胃蛋白酶量2.5 g、胃蛋白酶酶解时间85 min、胃蛋白酶酶解温度35℃、胃蛋白酶反应pH3.3,在此条件下,多肽得率为13.18%±0.38%;多肽对DPPH·和·OH清除率的EC50分别为26.14、13.22 mg/mL;多肽对洋葱细胞氧化损伤的保护效果优于维生素C。

超声波-半仿生法提取桑叶黄酮及其活性的研究

【目的】对桑叶黄酮的提取工艺及其自由基清除能力,对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性抑制作用进行研究,旨在获得充分保持桑叶黄酮活性的新型制备方法,为桑叶资源开发利用提供理论依据。【方法】采用超声波–半仿生法提取桑叶黄酮,考察液料比、超声时间、超声温度、超声功率4个因素对桑叶黄酮得率和DPPH·以及OH·的平均清除率的影响,通过响应面试验优化桑叶黄酮提取工艺,评价桑叶黄酮对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。【结果】桑叶黄酮最佳提取工艺为液料比30 mL/g、提取总时间97 min(3个阶段的时间比例为1∶2∶2)、超声温度49℃、超声功率400 W,黄酮得率为(38.23±0.42) mg/g,自由基平均清除率为(57.04±0.97)%。桑叶黄酮对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性抑制的IC_(50)值为(1.081±0.130) g/L和(1.204±0.190) g/L。超声波–半仿生法比单一超声波法提取桑叶黄酮的自由基清除能力强,比单一半仿生法提取桑叶黄酮的得率高。【结论】采用超声波辅助半仿生法提取的桑叶黄酮具有良好的自由基清除能力,且对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶有抑制作用,与单一提取法相比,超声波–半仿生法提取桑叶黄酮具备更高的生物活性和得率。桑叶黄酮可开发为高糖人群调节血糖的产品,超声波–半仿生法可为工业制备桑叶黄酮提供良好的技术储备。

大黄芩鱼散半仿生提取物对鹅沙门氏菌生长的影响

本研究旨在探讨大黄芩鱼散半仿生提取物(SEDQS)对鹅沙门氏菌的体外抗菌活性。采用微孔-平板法测定最小抑菌浓度(MIC),分光光度法和试剂盒法测定不同浓度SEDQS对鹅沙门菌生长曲线、呼吸代谢系统、可溶性蛋白的影响。结果显示:SEDQS对鹅沙门菌的MIC为(9.10±0.11)mg/mL,1/4 MIC~2 MIC的SEDQS均能显著抑制鹅沙门氏菌的正常生长,且最高抑制率为68.4%;能显著升高碱性磷酸酶(AKP)的含量(P<0.01),升高率达到88.2%;使细菌的核酸、蛋白质等大分子物质显著泄漏(P<0.01),且最高泄漏率为92%;还能显著地抑制琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)的活性(P<0.01),并呈现剂量依赖性。由此表明,SEDQS通过破坏鹅沙门氏菌的细胞壁和细胞膜结构,影响其呼吸代谢而发挥体外抗菌活性。

正交试验优化半仿生提取刺梨果渣中黄酮的研究

目的:优选半仿生法提取刺梨果渣黄酮的工艺条件。方法:采用单因素结合正交试验,考查乙醇体积分数、料液比、提取温度、提取时间对刺梨果渣黄酮提取率的影响。结果:半仿生法提取刺梨果渣中黄酮的最佳工艺条件为:乙醇体积分数60%、料液比1∶15(g∶mL)、提取温度80℃、提取时间分别是70,35,35 min,该工艺条件下刺梨果渣黄酮提取率为0.58%。结论:所建立的提取工艺操作简单、提取率高,可用于刺梨果渣中黄酮的提取,为综合开发刺梨加工副产物刺梨果渣提供了参考依据。

均匀设计法优选甘草的半仿生提取工艺条件

目的:优选甘草的半仿生提取的最佳工艺条件。方法:以甘草酸含量、总黄酮含量、总多糖含量、HPLC总面积、浸膏得率等为指标,采用均匀设计优选其半仿生提取法(简称SBE法)的条件。结果:优化条件为:三煎用水的PH值依次为5.88,7.50,8.90;煎煮总时间为3.93 h。结论:结合工业生产实际,确定其SBE法工艺条件为:三煎用水的PH值依次为6.0,7.5,9.0;煎煮时间依次为2,1,1 h。

黄连-吴茱萸药对化学成分的HPLC-DAD-MS分析

建立黄连-吴茱萸药对半仿生提取液化学成分的HPLC-DAD-MS分析方法,研究黄连-吴茱萸配伍机制的物质基础。以Hypersil BDS C18为色谱柱,梯度洗脱后,综合分析不同样品的色谱峰保留时间、紫外光谱,一级和二级全扫描质谱图,归属了黄连-吴茱萸(6∶1)半仿生提取液中的17个色谱峰,8个来自吴茱萸,其他9个均来自黄连,确认了4个色谱峰分别为药根碱、羟基吴茱萸碱、巴马汀和小檗碱;推断了3个色谱峰分别为表小檗碱、非洲防己碱和黄连碱,同时测定了小檗碱和巴马汀的含量。黄连配伍吴茱萸后半仿生提取无新物质生成,但小檗碱和巴马汀的溶出量降低。

正交实验优选葛根复方的半仿生提取工艺

目的 :为葛根复方 (葛根 ,川芎 ,山楂 ,槐花米 ,麦冬、甘草等 )研究半仿生提取工艺。方法 :以葛根黄酮得率为指标 ,在粒度、提取次数、提取工艺、浸渍剂浓度等条件相同时 ,考虑乙醇溶液 pH值、提取时间、提取温度、配伍比例 ,选用L16(45)正交进行实验 ,确定最佳提取工艺。结果 :第 1煎提取液 pH为 7,第 2煎提取液pH为 11,提取温度为85℃ ,提取时间为 4h ,配伍比例为 4∶3∶3∶2∶2∶2 (葛根 :川芎 :山楂 :槐花米 :麦冬 :甘草 )。结论 :用正交实验优选半仿生提取工艺 ,是可行的。

全蝎酶解物增强小鼠免疫功能的研究

目的基于半仿生技术,探究全蝎酶解物是否能增强小鼠免疫力。方法通过小鼠迟发型反应、抗体生成细胞、血清溶血素、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、NK细胞活性实验,考察其对小鼠免疫力的影响。结果与对照组相比,全蝎酶解物高、中、低剂量组均能显著增加小鼠迟发型变态反应(P<0.05),单核-巨噬细胞碳廓清中剂量组,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验高、低剂量组,NK细胞活性高剂量组,均显著高于对照组(P<0.05);3个剂量组对小鼠体质量、脾脏与胸腺系数、小鼠抗体生成细胞以及小鼠血清溶血素能力影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论全蝎酶解物具有一定的增强小鼠免疫功能的作用。

半仿生提取柿叶黄酮及其抗氧化和抗菌作用

对磨盘柿叶黄酮的半仿生法提取工艺及其体外抗氧化和抗菌作用进行研究。通过正交试验确定半仿生法提取磨盘柿叶总黄酮的最佳工艺条件:固液比1 g:20 mL,提取温度80℃,提取时间1 h,分别以pH≈2.0盐酸溶液和pH≈7.5、pH≈8.5的氨-氯化氨缓冲溶液作为提取液各提取1次。实验表明柿叶总黄酮对油脂过氧化、DPPH自由基、羟基自由基、超氧自由基均有一定的抑制作用。采用滤纸片实验抑菌作用,结果表明磨盘柿叶总黄酮溶液对白葡萄菌和大肠杆菌均有中度抑菌作用。

半仿生-酶法提取半夏白术天麻汤中天麻素的含量测定

目的：为优选半夏白术天麻汤用半仿生-酶法提取的工艺条件，以天麻素为综合评价指标之一，探讨其用HPLC测定的可行性。方法：按处方比例称取各饮片，加入适宜的酶预处理，再按SBE法，采用正交实验L18 6×3^6表，于第1煎和第3煎的溶剂中加入适宜的消化酶，在适宜的温度下提取得提取液。以该提取液为研究对象，作天麻素的HPLC测定方法的研究。筛选供试品的制备方法和HPLC的流动相，采用Diamonsil TN C18柱（5μm，4．6mm×250mm）流动相为乙腈-0．05％磷酸（3：97），在220nm波长处检测，流速为1mL·min^-1，柱温为25℃。结果：天麻素在O．87～10．44μg范围内呈良好线性关系，r=0．9996，平均加样回收率为101．52％，RSD=1．58％（n=6）。结论：半夏白术天麻汤的半仿生-酶法提取液可用HPLC测定其天麻素的含量，该方法准确、重现性好。

试论“半仿生提取法”制备中药口服制剂

从生物药剂学的角度设计了“半仿生提取法”制备中药口服制剂的新工艺。即药料先用一定ｐＨ的酸水提取，继以一定ｐＨ的碱水提取，提取液分别滤过、浓缩、制剂。论述了此种工艺的理论依据，并以芍甘止痛颗粒剂为例介绍该工艺研究的具体做法。

半仿生及超声波辅助半仿生法提取杜仲叶黄酮

探讨半仿生法及超声波辅助半仿生法提取杜仲黄酮的实验条件.半仿生法考察提取温度、提取时间、料液比对黄酮提取率的影响.以半仿生法提取在超声波协同作用的基础上,采用正交试验、单因素考察超声时间、超声温度、料液比对黄酮提取率的影响.结果表明,半仿生法在提取时间1.5h,提取温度60℃,料液比1∶20(g∶mL)时,黄酮提取率高达325.0mg/g;超声波辅助法提取的最佳条件为时间50min,温度65℃,料液比1∶40(g∶mL),黄酮提取率为264.4mg/g.

酶法及半仿生法提取杜仲叶中绿原酸和黄酮

为优选杜仲叶中绿原酸和黄酮提取最佳工艺,以绿原酸和黄酮含量为考察指标,通过正交实验对半仿生法和酶法两种提取方法进行了优化。半仿生法的工艺条件为:杜仲叶为原料,以磷酸氢二钠-柠檬酸的缓冲溶液作为提取液,m(杜仲叶)∶m(提取液)=1∶20,提取液pH分别为2.0,7.5,8.3,在70℃,每次提取1 h,提取3次;在此条件下,绿原酸的得率达1.44%,黄酮得率达0.044%。果胶酶提取的工艺条件为:杜仲叶为原料,以磷酸氢二钠-柠檬酸的缓冲溶液作为提取液,m(杜仲叶)∶m(提取液)=1∶15,果胶酶酶解温度为60℃;提取液pH为3.6;每5 g杜仲叶中加入质量分数为0.5%果胶酶1.5 mL,酶解2 h后,升温至80℃,每次1 h,提取3次;在此条件下,绿原酸的得率达1.29%,黄酮得率达0.043%。

酶法及半仿生法提取银杏黄酮的工艺研究

为优选银杏叶中黄酮提取最佳工艺,以黄酮含量为考察指标,对酶法和半仿生法两种提取方法进行了比较。酶法提取的最佳工艺条件为:以乙醇-水作为提取液,提取液浓度80%,固液比1:20(g/mL),酶解温度为45℃,提取液pH为8.0;每5g银杏叶中加入纤维素酶4.5mg,酶解2h后,升温至90℃,每次2h,提取3次。在此条件下,银杏叶总黄酮提取量为6.3676mg·g-1。半仿生法提取的最佳工艺条件为:以乙醇-水为提取液,提取液浓度80%,提取温度80℃,固液比1:20(g/mL)。在此条件下,银杏叶总黄酮提取量为6.4598mg·g-1。

黄芩半仿生提取法工艺条件的优选

目的以黄芩为模型中药,采用均匀设计优选黄芩的半仿生提取工艺条件。方法采用U9(91×33)均匀设计表,在饮片规格、煎提温度、煎提用水量、滤过、浓缩等条件相同的情况下,以3煎用水的pH值及总煎提时间为考察因素,以分子量≤1 000 Da提取物、黄芩苷、黄芩素、总黄酮、HPLC峰总面积为指标,将各指标测得值进行标准化处理,并经加权求和后得到综合评判指标Y值,并用JYSYSJ数据分析模块处理,优选黄芩半仿生提取法的工艺条件。结果按照实验设计得出,黄芩半仿生提取法工艺的最佳条件为:3煎用水的pH值依次为5.136 8、6.974 1、8.941 3;3煎总煎提时间为3.931 7 h。结论结合生产实际,确定3煎用水的pH值依次为5.0、7.0、9.0;提取时间依次为2h、1 h、1 h。验证性试验提取液的综合评价Y'值略高于预测值,表明黄芩用均匀设计优选出的SBE工艺参数可供在生产中试行。

思维方式的转换与中药“半仿生提取法”

在对该法试论的基础上，进一步从思维方式的角度论述。

用均匀设计优选麻杏石甘汤的半仿生提取法工艺条件

目的 :为麻杏石甘汤 (麻黄 ,杏仁 ,石膏 ,炙甘草 )的剂改优选提取工艺。方法 :以麻黄碱、甘草次酸、钙离子 ,氢氰酸、干浸膏为指标 ,采用均匀设计优选其半仿生提取法 (简称SBE法 )的工艺条件。用薄层扫描法测定麻黄碱、甘草次酸的含量 ;用滴定法测定钙离子、氢氰酸的含量 ;用重量法测定干浸膏得率。结果 :确定其工艺条件为 :3煎用水 pH值依次为 :2 .0 ,6 .5 ,9.0 ;煎煮时间依次为 :2 .0 ,1.0 ,0 .5h。结论