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DUCK HEPATITIS B VIRUS DNA WITHIN HEPATIC MULTICENTRIC CANCER AND/OR METASTATIC CANCER
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作者 杨广笑 王全颖 +3 位作者 金友南 迟宝荣 李家敏 叶维法 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1992年第1期9-16,共8页
Duck hepatitis B vims (DHBV) DNA was detected in different tumorous nodules of ducks with hepatic multicentric cancer or intrahepatic metastasis by Southern blot technique. Among 7 ducks with hepatocellular carcinoma ... Duck hepatitis B vims (DHBV) DNA was detected in different tumorous nodules of ducks with hepatic multicentric cancer or intrahepatic metastasis by Southern blot technique. Among 7 ducks with hepatocellular carcinoma of multiple tumor nodules, the hybridization pattern of Integrated DHBV DNA In different tumorous nodules was identical in 3 cases and different in 2 cases. One case showed a similar hybridization pattern in two tumorous nodules and other one was negative tor DHBV DNA. Integrated DHBV DNA was also identified in a metastatic lung cancer of ducks with hepatocellular carcinoma. The hybridization pattern of metastasis of lungs was as the some as that in primary hepatocellular carcinoma. The same discrete hybridization bands In the different tumorous nodules indicate that these nodules might arise from one transformed cell. The different hybridization patterns In various tumorous nodules show that these tumorous nodules might arise from various transformed cells. The results suggest that the hybridization pattern of different nodules of hepatocellular carcinoma with viral DNA probe could make a cell clone origin marker of tumor nodule to differentiate hepatic multlcentric cancer from Intrahepatic metastatic cancer. 展开更多
关键词 DNA duck hepatitis b virus DNA WITHIN HEPATIC MULTICENTRIC CANCER AND/OR METASTATIC CANCER dhbv
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Immunogenicity and protective efficacy of DHBV DNA vaccines expressing envelope and capsid fusion proteins in ducks delivered by attenuated Salmonella typhimurium 被引量:2
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作者 LIU Si-yang JIA Ren-yong +11 位作者 LI Qing-qing FENG Dai-shen SHEN Hao-yue YANG Cui WANG Ming-shu ZHU De-kang CHEN Shun LIU Ma-feng ZHAO Xin-xin YIN Zhong-qiong JING Bo CHENG An-chun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期928-939,共12页
Duck hepatitis B virus(DHBV) shares many basic characteristics with hepatitis B virus(HBV) and is an attractive model for vaccine development. In this study, DHBV DNA vaccines were designed to express envelope and cap... Duck hepatitis B virus(DHBV) shares many basic characteristics with hepatitis B virus(HBV) and is an attractive model for vaccine development. In this study, DHBV DNA vaccines were designed to express envelope and capsid fusion proteins to enhance the breadth of immune response in ducks. Attenuated Salmonella typhimurium(SL7207) was used as a carrier and adjuvant to boost the magnitude of immune response. Based on this strategy, novel DNA vaccines(SL7207-p VAX1-LC and SL7207-p VAX1-SC) were generated. Growth kinetics, genetic stabilities and relative transcription levels of the L, S and C genes introduced by these vaccine strains were measured before inoculation to guarantee safety and efficacy. The relative transcript levels of the CD4 and CD8 T genes and the antibody levels(Ig Y) in ducks receiving the vaccines were higher than those in single gene delivered groups. Additionally, the copy number of covalently closed circular DNA in hepatocytes after DHBV challenge also provided evidence that our fusion vaccines could enhance the protective efficiency against DHBV infection in ducks. 展开更多
关键词 fusion DNA genes attenuated Salmonella typhimurium(SL7207) hepatitis b virus(HbV) duck hepatitis b virus(dhbv) oral immunization
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特异光敏效应对血细胞悬液中DHBV的灭活作用 被引量:4
3
作者 熊鸿燕 陈惠孙 +1 位作者 胡小兵 王思雄 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2002年第3期153-156,共4页
目的 观察设计的靶向光敏剂所产生的特异光化学效应对血细胞悬液中病毒的灭活作用 ,以探索新型的血液病毒灭活技术。方法 以光化学效应为基本原理 ,利用反义核酸技术设计合成与DHBV DNA特异结合的TFO P ,将其作为特异的靶向光敏剂 ,在... 目的 观察设计的靶向光敏剂所产生的特异光化学效应对血细胞悬液中病毒的灭活作用 ,以探索新型的血液病毒灭活技术。方法 以光化学效应为基本原理 ,利用反义核酸技术设计合成与DHBV DNA特异结合的TFO P ,将其作为特异的靶向光敏剂 ,在UVA的协同下将其作用于血细胞悬液中的DHBV。通过电泳转移印迹试验、原代鸭肝细胞感染试验 ,观察TFO P与DHBV DNA的结合效应和在UVA协同下灭活DHBV的效果。结果 所设计的TFO P能与不同株DHBV DNA样本产生不同程度的特异结合 ,在剂量为 0 .1nmol/ml的TFO P和照射强度为 180 0 μW/cm2 的UVA作用下 ,血细胞悬液中DHBV的活性下降 1.9~ 5 .4Log。 结论 TFO P所产生的光化学效应能显著灭活血细胞悬液中的DHBV。 展开更多
关键词 特异光敏效应 dhbv 光敏剂 鸭乙肝病毒 病毒灭活 血细胞悬液
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鸭肝组织中DHBV cccDNA的实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:1
4
作者 王亚文 惠凌云 +6 位作者 张琳 冯艾 王威 马列婷 王全颖 杨广笑 刘正稳 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第4期1-4,172,共5页
目的 建立基于DHBV病毒正、负链缺口区设计引物、沉淀蛋白结合的DNA、酶切消化残留线性DNA的DHBVcccDNA荧光定量PCR方法.方法 根据DHBV cccDNA和rcDNA结构的不同,将引物设计在DHBV DNA负链缺口的两侧.采用十二烷基硫酸钾蛋白质沉淀法分... 目的 建立基于DHBV病毒正、负链缺口区设计引物、沉淀蛋白结合的DNA、酶切消化残留线性DNA的DHBVcccDNA荧光定量PCR方法.方法 根据DHBV cccDNA和rcDNA结构的不同,将引物设计在DHBV DNA负链缺口的两侧.采用十二烷基硫酸钾蛋白质沉淀法分离肝组织中cccDNA和rcDNA.并对提取的DNA进行紫外定量,按照每2UPSAD消化500ng cccDNA,计算PSAD的用量,酶切消化残存的线性DNA.以pBR322/2DHBV Core重组质粒为PCR标准品,通过优化反应体系和扩增条件,建立检测DHBV cccDNA的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,并进行方法学考察和实际应用.结果 优化的PCR扩增产物电泳后可见239 bp的DNA片段,与目标片段长度相同.标准曲线回归方程Y=-4.085 7X+48.805,R2=-0.997 6.方法的灵敏度为103 copies/ml,线性范围可达103~108 copies/ml.方法特异性强,未检出DHV,HBV及E coli DNA.对已感染DHBV的鸭肝组织检测DHBV cccDNA,进行定量,含量从0.36~1733.08 copies/diploid genome.其中分布最广的是10~99 copies/dioploid genome.DHBV cccDNA占总DHBV DNA的比例平均仅为3.86%,范围从0.01%~13.3s%.结论 根据DHBV cccDNA与rcDNA的结构和理化性质的差异,设计能够特异性扩增DHBV cccDNA的荧光定量PCR方法,方法灵敏度高、特异度强,可广泛应用于DHBV和HBV抗病毒治疗策略的相关研究中. 展开更多
关键词 鸭乙肝病毒 CCCDNA 实时荧光定量PCR
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扶正利湿活血复方对鸭乙肝模型血清DHBV DNA的影响 被引量:1
5
作者 刘汉平 何金洋 梁波 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第12期2714-2716,共3页
目的:观察扶正利湿活血中药复方对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的抑制作用。方法:PCR筛选先天感染DHBV的1日龄广东麻鸭,随机分为病毒对照组、拉米夫定组、扶正利湿活血复方高、低剂量组,每组7只,各组分别灌胃给药30天。在灌胃前、灌胃第10、20... 目的:观察扶正利湿活血中药复方对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的抑制作用。方法:PCR筛选先天感染DHBV的1日龄广东麻鸭,随机分为病毒对照组、拉米夫定组、扶正利湿活血复方高、低剂量组,每组7只,各组分别灌胃给药30天。在灌胃前、灌胃第10、20、30天及停药第5天分别采血,辛酸钠法提取血清DHBV DNA,采用荧光定量PCR法检测血清DHBV DNA的含量。结果:扶正利湿活血复方高剂量组在给药后的第10、20、30天时,鸭血清病毒载量均明显下降,(与D0比较,P<0.05;各时间点与病毒对照组比较,P<0.01);在停药5天后,与D0组内比较,血清病毒载量仍然显著降低(P<0.01),但与病毒对照组比较则无显著下降(P>0.05);扶正利湿活血复方低剂量组在给药后的第10、20、30天时,鸭血清病毒载量均明显下降,(与D0比较,P<0.01;各时间点与病毒对照组比较,P<0.01);在停药5天后,组内与D0比较及组间与病毒对照组比较均明显下降(P<0.05)。结论:扶正利湿活血复方可抑制DHBV DNA的复制,低剂量长期效应更为明显。 展开更多
关键词 扶正利湿活血 鸭乙型肝炎病毒(dhbv) 荧光定量PCR(FQ-PCR)
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广东麻鸭DHBV全基因克隆及新读码框的发现 被引量:1
6
作者 何金洋 葛文华 +5 位作者 朱宇同 郭兴伯 杨瑞仪 冯丽玲 张奉学 陈鸿珊 《中国病毒学》 CSCD 2005年第4期399-403,共5页
选取3份DHBV阳性广东麻鸭血清提取DHBVDNA,设计一对扩增DHBV全基因序列引物Q1和Q2,扩增并克隆DHBV全基因序列,测序并运用相关计算机软件及方法分析获得的全基因序列。结果表明,广东麻鸭DH-BV全长为3027bp。提交GenBank后获得的收录号分... 选取3份DHBV阳性广东麻鸭血清提取DHBVDNA,设计一对扩增DHBV全基因序列引物Q1和Q2,扩增并克隆DHBV全基因序列,测序并运用相关计算机软件及方法分析获得的全基因序列。结果表明,广东麻鸭DH-BV全长为3027bp。提交GenBank后获得的收录号分别为:AY433937、AY521226、AY521227(来自1号血清);AY392760、AY536371(分别来自2、3号血清)。AY521227的PreS/SORF出现了单碱基突变,在PreC/CORF之前发现一个新的ORF,暂命名为HORF,HORF也同时存在于GenBank中储存的另外8个DHBV全基因序列中。系统发育分析表明,广东麻鸭DHBV在分化程度上是目前储存于GenBank中的DHBV全序列中最高的。成功克隆了广东麻鸭DHBV全基因序列,序列分析为进一步研究广东麻鸭DHBV提供了有益的信息。 展开更多
关键词 鸭乙肝病毒(dhbv) 全基因序列 克隆 读码框
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荧光定量PCR观察鸭胚肝细胞培养上清DHBV载量的动态变化
7
作者 刘汉平 何金洋 +1 位作者 曾常春 梁波 《激光生物学报》 CAS CSCD 2009年第1期35-41,共7页
通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)观察后天感染和先天感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的鸭胚肝细胞培养上清中DHBV载量的动态变化,探讨适宜于抗HBV药物的体外实验、HBV生物学特性及乙型肝炎发病机制研究的鸭胚肝细胞模型。筛选先天感染DHBV的阳性... 通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)观察后天感染和先天感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的鸭胚肝细胞培养上清中DHBV载量的动态变化,探讨适宜于抗HBV药物的体外实验、HBV生物学特性及乙型肝炎发病机制研究的鸭胚肝细胞模型。筛选先天感染DHBV的阳性鸭胚并进行肝细胞原代培养,对DHBV阴性鸭胚肝细胞原代培养,并以不同浓度的DHBV强阳性血清感染细胞。于细胞接种后不同时间点收集培养上清,FQ-PCR检测分析培养上清DHBV DNA的含量。结果显示:先天感染的鸭胚肝细胞接种第2 d上清中DHBV载量最高,第3 d大幅下降,然后缓慢上升,第8 d达到高峰,至第15 d时仍然与高峰时接近,DHBV载量的数量级都在108cop ies/mL没有变化;后天感染不同浓度的DHBV阳性血清的鸭胚肝细胞培养上清中的DHBV载量动态变化趋势基本一致,DHBV感染后第3 d大幅下降,以后逐渐上升,至第11 d达高峰,第15 d又略有下降。结论:先天感染DHBV的鸭胚肝细胞的培养上清病毒载量上升至峰值时间短,病毒载量稳定,更适合于抗HBV药物的体外实验研究。 展开更多
关键词 鸭乙型肝炎病毒(dhbv) 鸭胚肝细胞 荧光定量PCR(FQ—PCR) 定量检测
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嘎狗噜醇提物抗鸭乙型肝炎病毒感染的短期疗效分析
8
作者 卢良红 何沂蓉 +3 位作者 熊国林 杨路 崔传宝 谢志春 《右江医学》 2024年第7期584-590,共7页
目的探究嘎狗噜醇提物体内抗鸭乙肝病毒(DHBV)及保肝作用。方法建立鸭乙型肝炎病毒感染动物模型,随机分成6组(每组10只):嘎狗噜醇提物高剂量组、中剂量组、低剂量组,安慰剂组,拉米夫定组,非感染组,每日灌胃给药1次,持续28天;在给药前(T_... 目的探究嘎狗噜醇提物体内抗鸭乙肝病毒(DHBV)及保肝作用。方法建立鸭乙型肝炎病毒感染动物模型,随机分成6组(每组10只):嘎狗噜醇提物高剂量组、中剂量组、低剂量组,安慰剂组,拉米夫定组,非感染组,每日灌胃给药1次,持续28天;在给药前(T_(0))及给药后7 d(T_(7))、14 d(T_(14))、21 d(T_(21))、28 d(T_(28))和停药后5 d(P_(5)),取各组麻鸭静脉血,实时荧光定量PCR法检测鸭血清样本中鸭乙肝病毒(DHBV DNA)水平、酶联免疫吸附法(ELISA)测定鸭乙肝表面抗原(DHBsAg)和鸭乙肝e抗原(DHBeAg),检测ALT和AST水平,停药后6天(P_(6))处死麻鸭并解剖取肝,观察麻鸭肝脏病理切片。结果给药前(T_(0)),基线指标差异无统计学意义(P>0.05)。嘎狗噜醇提物各剂量组均未发现DHBV DNA载量下降,DHBsAg OD值也未见降低(P>0.05),对AST作用不明显;嘎狗噜醇提物各剂量组DHBeAg OD值、ALT均降低(P<0.05);肝脏病理结果显示,嘎狗噜醇提物高剂量组病变程度低于其他剂量组(P<0.05)。结论未发现嘎狗噜醇提物有抑制DHBV、DHBsAg的作用,对AST作用不明显;嘎狗噜醇提物各剂量组均能抑制DHBeAg、降低ALT水平,高剂量组能够改善肝脏病理损伤,对肝脏有一定保护作用。 展开更多
关键词 嘎狗噜醇提物 麻鸭 鸭乙肝病毒 拉米夫定
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DUCK HEPATITIS B VIRUS MODEL FOR SCREENING OF ANTIVIRAL AGENTS FROM MEDICINAL HERBS
9
作者 米志宝 陈鸿珊 +3 位作者 张习坦 邵兴无 李壮 吴晓明 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1995年第9期22-26,共5页
The effects of the extracts of 20 Chinese medicinal herbs and an antiviral drug foscarnet on duck hepatitis B virus (DHBV) endogenous DNA polymerase (DNAp) activity were compared. The extracts of P. urinaria showed a ... The effects of the extracts of 20 Chinese medicinal herbs and an antiviral drug foscarnet on duck hepatitis B virus (DHBV) endogenous DNA polymerase (DNAp) activity were compared. The extracts of P. urinaria showed a dose-dependent inhibition on DHBV DNAp. And those of other herbs showed little inhibition effect. Primary duck hepatocyte (PDH) cultures were used for evaluating effects of the extract of P. urinaria, foscarnet and acyclovir (ACV) on DHBV, and all the drugs or the extracts showed inhibition of DHBV DNA replication. Furthermore, in vivo trials were carried out. Peking ducks infected with LJ-76 strain of DHBV were treated with the extract of P. urinaria or ACV and compared with placebo treated control ducks. The treatment results in the loss or reduction of circulating viral DHBV DNA and DHBsAg. 展开更多
关键词 dhbv DNA duck hepatitis b virus MODEL FOR SCREENING OF ANTIVIRAL AGENTS FROM MEDICINAL HERbS
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复方六月雪对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用 被引量:25
10
作者 张士军 林军 +2 位作者 蒋伟哲 黄春喜 黄仁彬 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期191-193,共3页
目的:观察复方六月雪(CLYX)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA的抑制作用,为研究和开发新的抗HBV药物提供实验依据。方法:采用1日龄雏鸭接种广西麻鸭DHBV强阳性血清,13天后用PCR法筛选出DHBV强阳性鸭。随机分成5组:CLYX高、中、低剂量组、模型... 目的:观察复方六月雪(CLYX)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA的抑制作用,为研究和开发新的抗HBV药物提供实验依据。方法:采用1日龄雏鸭接种广西麻鸭DHBV强阳性血清,13天后用PCR法筛选出DHBV强阳性鸭。随机分成5组:CLYX高、中、低剂量组、模型组和阳性对照组,每组10只,各组雏鸭均灌胃给药14天。于用药前(T0)、用药7天(T7)、14天(T14)及停药后3天(P3)分别采血,采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测血清DHBVDNA的含量。结果:CLYX各剂量组用药后血清DHBV DNA含量显著降低(P<0.01),停药3天后,CLYX低剂量组和阳性对照组血清DHBV DNA有反跳现象,而CLYX中、高剂量组血清DHBV DNA没有反跳现象。CLYX抑制DHBV DNA的作用有明显的量效和时效反应关系。结论:CLYX可有效地抑制DHBV DNA的复制。 展开更多
关键词 复方六月雪 鸭乙型肝炎病毒 荧光定量PCR
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鸭乙型肝炎病毒全基因重组质粒构建及表达 被引量:11
11
作者 胡权 张正茂 +5 位作者 张小勇 张振华 雷延昌 周敦金 黄建国 杨东亮 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期562-564,共3页
目的构建鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染性克隆,通过体外细胞转染获得单一来源、基因序列清楚的体内实验的感染毒种。方法以湖北麻鸭DHBV分离株(DQ276978)为模板,用PCR法从该DHBV全基因组克隆质粒(pMD-DHBV)和DHBV阳性血清中获取3部分基因片... 目的构建鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染性克隆,通过体外细胞转染获得单一来源、基因序列清楚的体内实验的感染毒种。方法以湖北麻鸭DHBV分离株(DQ276978)为模板,用PCR法从该DHBV全基因组克隆质粒(pMD-DHBV)和DHBV阳性血清中获取3部分基因片段,总长4.4 kb,克隆至载体PCR2.1的SacI和NotI酶切位点,构建含1.5倍鸭乙型肝炎病毒全基因的重组质粒,并酶切鉴定其插入方向。将构建的重组质粒经脂质体Lipo-fectineTM 2000导入鸡肝癌细胞系(LMH)细胞中转染表达,收集纯化后的转染细胞培养上清液作为体内实验感染的标准毒种。结果PCR鉴定、酶切鉴定及序列测定,证实成功获得正向插入的1.5倍鸭乙型肝炎病毒全基因重组质粒PCR2.1-DHBV1.5。Southernblot检测表明,该重组质粒在LMH细胞内存在各种病毒复制中间体;通过电镜观察,转染细胞上清液中存在DHBV完整病毒颗粒。结论经体外重组,构建出携带1.5倍加长DHBV基因组片段的重组质粒PCR2.1-DHBV1.5,并可在鸡肝癌细胞LMH中介导高水平病毒复制,从而获得含可自我复制病毒颗粒的转染细胞上清液作为动物体内感染接种物。 展开更多
关键词 鸭乙型肝炎病毒 1.5倍dhbv基因组 鸡肝癌细胞系(LMH) 基因表达
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利用动物模型评估亚甲蓝光化学法红细胞病毒灭活效果 被引量:3
12
作者 陆萍 凌冰 +3 位作者 钱开诚 王文逸 瞿涤 吕美铭 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2004年第4期223-226,共4页
目的 评估亚甲蓝光化学法 (MB P) (亚甲蓝浓度 5 μmol/L ,光照时间 1h ,光照强度 380 0 0lux)红细胞病毒灭活的安全性、有效性。方法 ①建立Beagle犬急性失血性贫血模型 ,观察经MB P处理的Beagle犬自体纠正贫血的效果、体内溶血情况... 目的 评估亚甲蓝光化学法 (MB P) (亚甲蓝浓度 5 μmol/L ,光照时间 1h ,光照强度 380 0 0lux)红细胞病毒灭活的安全性、有效性。方法 ①建立Beagle犬急性失血性贫血模型 ,观察经MB P处理的Beagle犬自体纠正贫血的效果、体内溶血情况及对肝肾功能的影响 ;②将含不同基因组拷贝数的鸭乙肝病毒 (DHBV)的人红细胞经静脉感染 1日龄雏鸭。采用同位素核酸杂交法检测鸭血清中DHBVDNA ,计算病毒灭活前后人红细胞中DHBV的半数致死量 (ID50 ) )。结果 ①经MB P处理的犬自体红细胞输入Beagle犬体内未发生溶血 ,输血前后谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)、尿素、肌酐等与输血前比较无明显差异 ;②经MB P灭活处理后 ,含DHBV红细胞的ID50 由 1 0 3 .3 5变为 1 0 8.3 5拷贝。结论 红细胞MB P病毒灭活是安全有效的。 展开更多
关键词 亚甲蓝/光化学法(Mb-P) 红细胞 病毒灭活 bEAGLE犬 鸭乙肝病毒(dhbv)
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生物靶标光敏剂对鸭乙肝病毒的特异结合及杀灭作用研究 被引量:3
13
作者 高飞 熊鸿燕 陈惠孙 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期75-77,共3页
目的 :利用生物靶标效应的原理 ,探索一种特异灭活病毒的光化学方法。方法 :将针对鸭乙肝病毒 (DHBV)设计并人工合成的两条三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别标记 8-甲氧基补骨脂素 (8-MOP) ,并将这种复合物 (TFO -P)与长波紫外线 (UVA)共... 目的 :利用生物靶标效应的原理 ,探索一种特异灭活病毒的光化学方法。方法 :将针对鸭乙肝病毒 (DHBV)设计并人工合成的两条三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别标记 8-甲氧基补骨脂素 (8-MOP) ,并将这种复合物 (TFO -P)与长波紫外线 (UVA)共同作用于血液中的DHBV ,通过原代细胞感染、酶联免疫测定、DNA斑点杂交等试验 ,观察在一定作用条件下 ,TFO -P对DHBV-DNA的特异结合及其所产生的特异光敏效应对DHBV的灭活程度。结果 :DHBV -DNA样品斑点印迹随TFO -P含量的增加明显增强 ,而同时处理的血液中的白细胞DNA样品斑点印迹无明显增强 ;在TFO -P的加入量为 0 1nmol/ml,UVA照射强度为180 0 μW /cm2 时 ,5~ 2 0min的UV照射可灭活DHBV 1 90~ 6 4个对数级 ,灭活病毒的效率显著高于UVA和 8-MOP的单独作用时的效果。结论 :TFO -P与血液中DHBV -DNA能特异结合 ,在适宜的处理条件下 ,所产生的光敏效应能有效灭活血液中的DHBV ,灭活滴度可达 展开更多
关键词 生物靶标 光敏剂 鸭乙肝病素 三螺旋结构寡核苷酸 8-甲氧基补骨脂素 灭活
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肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究 被引量:3
14
作者 李晖 田德英 +3 位作者 许东 吴亮 倪明 马晓军 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2006年第5期270-272,共3页
目的:用鸭乙肝模型研究肝康栓对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的体内抗病毒作用。方法:用DHBV阳性血清感染1日龄的樱桃谷鸭,制备鸭乙型肝炎模型。随机分成5组:肝康栓大、中、小3个剂量治疗组,生理盐水模型组和阿昔洛韦(ACV)对照组,每组12只,均... 目的:用鸭乙肝模型研究肝康栓对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的体内抗病毒作用。方法:用DHBV阳性血清感染1日龄的樱桃谷鸭,制备鸭乙型肝炎模型。随机分成5组:肝康栓大、中、小3个剂量治疗组,生理盐水模型组和阿昔洛韦(ACV)对照组,每组12只,均连续给药4周。分别于给药前,给药14天、28天,停药7天时取血清,用real-timePCR法检测鸭血清中DHBVDNA拷贝数的变化情况。结果:肝康栓大剂量组给药14天、28天及停药7天,中剂量组给药14天、28天,小剂量组给药28天,鸭血清中DHBVDNA拷贝数的对数值均较给药前降低(>2个对数级),差异有统计学意义(P<0·01)。结论:肝康栓具有有效抑制鸭体内DHBVDNA复制的作用。 展开更多
关键词 鸭乙型肝炎病毒(dhbv) 肝康栓/药效学 鸭乙型肝炎动物模型 实时荧光定量聚合酶链反应
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抗鸭乙肝病毒core蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1
15
作者 王亚文 刘正稳 +5 位作者 张琳 冯艾 王威 王全颖 杨广笑 惠凌云 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期768-772,共5页
目的制备抗鸭乙肝病毒core蛋白的单克隆抗体并进行鉴定。方法 PCR扩增鸭乙肝病毒(DHBV)core基因片段,构建表达载体pET28a(+)/DHBV core。转化诱导表达融合蛋白,用Ni 2+亲和柱纯化目的蛋白。免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融... 目的制备抗鸭乙肝病毒core蛋白的单克隆抗体并进行鉴定。方法 PCR扩增鸭乙肝病毒(DHBV)core基因片段,构建表达载体pET28a(+)/DHBV core。转化诱导表达融合蛋白,用Ni 2+亲和柱纯化目的蛋白。免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选,采用有限稀释法筛选单克隆杂交瘤细胞并进行细胞克隆。体内诱生法大量制备单克隆抗体,进行抗体的特异性、效价和亚型的鉴定。结果成功构建表达载体pET28a(+)/DHBV core,并表达DHBV core蛋白。获得2株稳定分泌抗DHBV core抗体的杂交瘤细胞株,分别为2D7和5G10,细胞培养液抗体效价为1∶400和1∶800。选择5G10细胞株制备单克隆抗体,小鼠腹水抗体效价可达1∶320 000。鸭肝组织免疫组化结果显示,DHBV病毒载量>1010copies/mg的肝组织中DHBV core蛋白的表达明显高于病毒载量<105copies/mg的肝组织,而未感染DHBV的鸭肝细胞内不表达DHBV core蛋白。亚型鉴定结果为IgG2aκ链。结论制备并获得了抗DHBV core蛋白的单克隆抗体,为DHBV core蛋白的功能研究、诊断试剂的研制与抗病毒治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭乙肝病毒 核心蛋白 单克隆抗体 细胞克隆
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乙型肝炎病毒感染模型的研究进展 被引量:4
16
作者 王选举 黄正明 宋建国 《传染病信息》 2009年第3期189-192,共4页
HBV感染是影响人类健康的主要问题之一。HBV的生物学研究及治疗方法进展缓慢是由于缺乏合适的体内外模型。如何建立一种有效的HBV感染模型,对于探索其感染机制,寻找有效的防治方法及开展抗HBV药物的筛选都具有重要的科研及临床意义。随... HBV感染是影响人类健康的主要问题之一。HBV的生物学研究及治疗方法进展缓慢是由于缺乏合适的体内外模型。如何建立一种有效的HBV感染模型,对于探索其感染机制,寻找有效的防治方法及开展抗HBV药物的筛选都具有重要的科研及临床意义。随着医学科学的不断发展,国内外学者进行了大量的研究,建立了多种HBV感染的体内外模型,每一种模型都有其优势和弊端,本文简要综述了各种模型在HBV研究中的应用进展及相应优、缺点。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒感染模型 2.2.15细胞 鸭乙型肝炎病毒
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复方六月青对鸭乙型肝炎病毒诱导肝损伤的保护作用研究 被引量:1
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作者 张士军 陈兆霓 +3 位作者 林兴 黄建春 李勇文 黄仁彬 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1582-1583,共2页
目的研究复方六月青(CLYQ)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)诱导麻鸭肝损伤的保护作用。方法采用DHBV诱导广西麻鸭乙型肝炎病毒肝损伤模型。于用药前(T0)、用药7d(T7),14d(T14)及停药后3 d(P3)分别检测鸭血清的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸... 目的研究复方六月青(CLYQ)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)诱导麻鸭肝损伤的保护作用。方法采用DHBV诱导广西麻鸭乙型肝炎病毒肝损伤模型。于用药前(T0)、用药7d(T7),14d(T14)及停药后3 d(P3)分别检测鸭血清的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织病理变化。结果用药后CLYQ中、高剂量组鸭血清ALT和AST的含量显著降低(P<0.01),并且有量效和时效关系。鸭肝脏病理学检查表明CLYQ对DHBV引起肝损伤有显著的保护作用。结论 CLYQ可有效地保护DHBV诱导麻鸭肝损伤。 展开更多
关键词 复方六月青 鸭乙型肝炎病毒 丙氨酸氨基转移酶 门冬氨酸氨基转移酶
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扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用 被引量:1
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作者 刘汉平 何金洋 梁波 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1670-1672,共3页
目的探讨扶正利湿活血中药复方水提物和醇提物对先天感染乙肝病毒(HBV)的鸭胚肝细胞乙型肝炎病毒(DH-BV)的抑制作用。方法荧光定量PCR技术对鸭胚尿囊液DHBV DNA分析筛选先天感染DHBV的阳性鸭胚,对DHBV阳性的鸭胚肝细胞原代培养;细胞接... 目的探讨扶正利湿活血中药复方水提物和醇提物对先天感染乙肝病毒(HBV)的鸭胚肝细胞乙型肝炎病毒(DH-BV)的抑制作用。方法荧光定量PCR技术对鸭胚尿囊液DHBV DNA分析筛选先天感染DHBV的阳性鸭胚,对DHBV阳性的鸭胚肝细胞原代培养;细胞接种后第3天分组加入不同剂量扶正利湿活血复方水提物和醇提物,共6d,分别于药物干预前、药物干预第3天、第6天、停药第2天收集培养上清;辛酸钠法提取上清DHBV DNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测分析血清DHBV DNA的含量。结果水提物各剂量组组内不同时间点DHBV DNA载量相比无显著性差异(P(0.05),仅水提物低剂量组DHBV DNA载量显著低于相同时间点病毒对照组(P<0.05);醇提物中、低剂量组在给药后和停药后培养上清DHBV均明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),扶正利湿活血复方醇提物高剂量组在给药后第3天时DHBV明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),第6天时组内比较无明显下降(P>0.05),而在停药后第3天时组内与组间比较又均有显著性差异(均为P<0.01)。结论扶正利湿活血复方醇提物对鸭胚肝细胞中的DHBV有直接抑制作用,水提物在鸭体内可能不是通过直接抑制DHBV而起作用。 展开更多
关键词 扶正利湿活血 鸭乙型肝炎病毒 肝细胞 荧光定量PCR
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广东省绿头鸭场鸭乙肝病毒自然携带状况调查 被引量:5
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作者 邹移海 张薇 +5 位作者 张奉学 邝幸华 董伯振 郭学军 周红燕 朱宇同 《中国实验动物学杂志》 2001年第1期9-14,共6页
目的 调查两个鸭场携带乙肝病毒 (DHBV)状况。方法 在对广东省家养绿头鸭分布状况进行系统调查的基础上 ,对南海市和顺镇、里水镇两个绿头鸭场作了随机抽样调查 ,采集了雏鸭、青年鸭和种鸭的血标本共 5 19份 ,应用斑点分子杂交 (DotBl... 目的 调查两个鸭场携带乙肝病毒 (DHBV)状况。方法 在对广东省家养绿头鸭分布状况进行系统调查的基础上 ,对南海市和顺镇、里水镇两个绿头鸭场作了随机抽样调查 ,采集了雏鸭、青年鸭和种鸭的血标本共 5 19份 ,应用斑点分子杂交 (DotBlot)测定法观察绿头鸭乙型肝炎病毒 (DHBV)自然携带率。结果 两鸭场绿头鸭的DHBV自然携带率为 36 0 % (187/ 5 19) ,其 95 %可信限为 31 0 %~ 44 0 %。不同鸭龄组绿头鸭DHBV自然携带比较 ,两鸭场同日龄绿头鸭DHBV自然携带率比较 ,绿头鸭DHBV自然携带率的性别比较 ,差异均无显著意义。不同鸭龄的绿头鸭DHBV -DNA含量定量分析 (A值 ) ,差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,其含量由高到低顺序为 :雏鸭 >种鸭 >青年鸭 ,和顺鸭场的绿头鸭DHBV -DNA含量高于里水鸭场。结论 两鸭场绿头鸭携带的DHBV可能源于不同的亚株。 展开更多
关键词 dhbv 携带率 乙肝病毒 DNA含量 调查 携带状况 鸭乙型肝炎病毒 绿头鸭 青年鸭 种鸭
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肝炎冲剂抗鸭乙肝病毒作用的实验研究 被引量:1
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作者 周军 王一敏 王煜 《第一军医大学分校学报》 2005年第1期10-11,共2页
目的:研究肝炎冲剂对鸭乙型肝炎的抗病毒作用。方法:选1日龄北京雏鸭,人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)后随机分为5组:肝炎冲剂低、中、高3个剂量组,生理盐水灌胃空白对照组和无环鸟苷(ACV)治疗组。每组6只,各组雏鸭均灌胃14d。观察不同剂... 目的:研究肝炎冲剂对鸭乙型肝炎的抗病毒作用。方法:选1日龄北京雏鸭,人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)后随机分为5组:肝炎冲剂低、中、高3个剂量组,生理盐水灌胃空白对照组和无环鸟苷(ACV)治疗组。每组6只,各组雏鸭均灌胃14d。观察不同剂量肝炎冲剂抗DHBV的作用效果。结果:肝炎冲剂不同剂量组对DHBV均有一定的抑制作用,且其抗DHBV作用较为持久,停药后无反跳。结论:肝炎冲剂有抗鸭乙型肝炎病毒作用。 展开更多
关键词 肝炎冲剂 鸭乙型病毒 动物实验
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