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基于网络药理学与分子对接技术探讨脊髓伤方治疗脊髓损伤的作用机制 被引量:1
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作者 莫怡 卜若晨 +5 位作者 唐福波 秦百君 卜保献 麦威 钟远鸣 卜献忠 《海南医学》 CAS 2023年第11期1521-1531,共11页
目的采用网络药理学与分子对接技术探讨脊髓伤方治疗脊髓损伤(SCI)的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)与中国知网(CNKI)数据库筛选脊髓伤方的活性成分及其作用靶点,运用人类基因数据库(GeneCards)、在线人类孟... 目的采用网络药理学与分子对接技术探讨脊髓伤方治疗脊髓损伤(SCI)的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)与中国知网(CNKI)数据库筛选脊髓伤方的活性成分及其作用靶点,运用人类基因数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)和治疗靶标数据库(TTD)等数据库挖掘SCI的疾病相关靶点;最终获取中药复方活性成分作用靶点与疾病相关靶点的交集靶点。运用Cytoscape 3.7.2软件与STRING数据库分别构建“活性成分-潜在作用靶点”和蛋白互作网络(PPI),筛选出潜在核心靶点;运用R软件和Metascape平台分别用于分析基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)途径的富集;对潜在靶点进行GO和KEGG富集分析。利用AutoDock Tools 1.5.6软件对关键化合物与核心靶点进行分子对接验证。结果共筛选获取138个活性成分及111个潜在作用靶点;获取到槲皮素、木犀草素、山柰酚、汉黄芩素、β-胡萝卜素等核心活性成分,白蛋白(ALB)、白介素6(IL-6)、丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、管内皮生长因子A(VEGFA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)、表皮生长因子受体(EGFR)、表皮生长因子(EGF)、转录因子AP-1(JUN)、白介素1B(IL1B)、转录3的信号换能器和激活子(STAT3)等核心靶点;共筛选获取179条信号通路,关键通路包括糖尿病并发症中晚期糖基化终产物及其受体(AGE-RAGE)信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、松弛素(RLX)信号通路、甲状腺激素(TH)信号通路、叉头盒O(FoxO)信号通路、阿佩林(AP)信号通路等。分子对接结果的最小结合能均<-5.0 kJ/mol,提示对接较良好。结论脊髓伤方可能是通过槲皮素、木犀草素、山柰酚、汉黄芩素、β-胡萝卜素等关键活性成分,调控ALB、IL-6、AKT1、VEGFA、CASP3等潜在核心靶点,调控AGE-RAGE、PI3K-AKT、HIF-1、RLX、TH、FoxO、AP等信号通路,进而发挥治疗SCI的作用。 展开更多
关键词 脊髓伤方 脊髓损伤 网络药理学 木犀草素 槲皮素 丝氨酸/苏氨酸激酶1 分子对接
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ActRIPs在激活素受体信号传导中的作用 被引量:6
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作者 张学军 台桂香 柳忠辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期4-7,共4页
激活素属于TGF-β超家族成员的多功能因子,其受体属于TGF-β超家族的Ser/THr激酶型受体,由Ⅰ型和Ⅱ型组成,Ⅱ型受体与配体激活素特异结合,再激活Ⅰ型受体,进一步通过Smad蛋白家族的级联反应将信号传入胞核。最新的研究发现Ser/THr激酶... 激活素属于TGF-β超家族成员的多功能因子,其受体属于TGF-β超家族的Ser/THr激酶型受体,由Ⅰ型和Ⅱ型组成,Ⅱ型受体与配体激活素特异结合,再激活Ⅰ型受体,进一步通过Smad蛋白家族的级联反应将信号传入胞核。最新的研究发现Ser/THr激酶型受体介导的信号传导实际上受控于Ⅱ型受体,细胞内激活素受体相互作用蛋白(ActRIPs)参与了Ⅱ型受体的活性调控,ActRIPs蛋白家族具有与激活素Ⅱ型A受体(ActRⅡA)C末端特异结合的活性,不同的ActRIPs具有不同的作用,Ac-tRIP1以脚手架形式与ActRⅡA及Smad3结合,抑制细胞内Smad途径信号传导;ActRIP2与ActRⅡA结合后,通过其C末端介导受体内吞作用,对信号传导也具有抑制作用;ActRIP3则与ActRIP1,2不同,其与ActRⅡA结合后,具有促进信号传导的作用。ActRIPs的发现,使人们更清晰地认识到Ser/THr激酶型受体介导的信号传导调控机制。 展开更多
关键词 激活素 Ser/Hr激酶型受体 受体相互作用蛋白 信号传导
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蛋白激酶研究进展Ⅰ.结构和分类 被引量:7
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作者 杨新平 夏家辉 《生命科学研究》 CAS CSCD 1998年第4期235-243,共9页
蛋白激酶含有250~300个氨基酸残基构成的催化功能域,包括12个功能亚域.这些氨基酸序列折叠成为一个核心催化结构.根据蛋白激酶功能域氨基酸序列比较分析可以找出各蛋白激酶在进化上的亲缘关系,这是蛋白激酶的分类基础.蛋... 蛋白激酶含有250~300个氨基酸残基构成的催化功能域,包括12个功能亚域.这些氨基酸序列折叠成为一个核心催化结构.根据蛋白激酶功能域氨基酸序列比较分析可以找出各蛋白激酶在进化上的亲缘关系,这是蛋白激酶的分类基础.蛋白激酶可分为二大类,一类是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,另一类是酪氨酸蛋白激酶.丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在进化上出现较早,可分为几个组,每个组又分为许多家族.酪氨酸蛋白激酶在进化上出现较晚,亲缘关系较紧密,同属于一个组,该组也分为许多家族.最近发现的许多双底物特异蛋白激酶,分散在丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的不同家族中. 展开更多
关键词 蛋白激酶 结构 分类 磷酸化 催化功能域
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OPN、Pyk2、p-AKT在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量:2
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作者 刘霞 李强 +8 位作者 陈勇 赵淑娟 郭荣珍 史炳霞 陈巧力 南桂英 孟召霞 张冉 张静 《临床误诊误治》 CAS 2022年第2期54-58,共5页
目的分析骨桥蛋白(OPN)、富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法收集2018年2月—2020年2月诊治103例舌鳞状细胞癌组织(舌癌组)及距肿瘤边缘>0.5 cm的癌旁正... 目的分析骨桥蛋白(OPN)、富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法收集2018年2月—2020年2月诊治103例舌鳞状细胞癌组织(舌癌组)及距肿瘤边缘>0.5 cm的癌旁正常组织(对照组)。比较不同组织中OPN、Pyk2、p-AKT表达情况,分析OPN、Pyk2、p-AKT与舌鳞状细胞癌患者临床病理参数的关系,采用多因素Logistic回归分析影响舌鳞状细胞癌患者预后生存的危险因素。结果舌癌组OPN、Pyk2、p-AKT表达阳性率均高于对照组(P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期、高分化、有淋巴结转移舌鳞状细胞癌患者OPN、Pyk2、p-AKT表达阳性率分别高于Ⅰ~Ⅱ期、低-中分化、无淋巴结转移患者(P<0.05,P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期、高分化、有淋巴结转移及OPN、Pyk2、p-AKT表达阳性舌鳞状细胞癌患者病死率分别高于Ⅰ~Ⅱ期、低-中分化、无淋巴结转移及OPN、Pyk2、p-AKT表达阴性患者(P<0.05,P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期、高分化、有淋巴结转移以及OPN、Pyk2、p-AKT表达阳性是影响舌鳞状细胞癌患者预后生存的独立危险因素(P<0.01)。结论OPN、Pyk2、p-AKT在舌鳞状细胞癌组织中表达均明显上调,与癌细胞浸润和转移密切相关,可为舌鳞状细胞癌预后评估提供参考。 展开更多
关键词 舌鳞状细胞癌 骨桥蛋白 富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 预后 危险因素
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miRNA-495靶向STYX调节MLL-AF9的急性髓系白血病细胞的增殖和凋亡 被引量:1
5
作者 杨瑞 宁婧 +2 位作者 景丽娟 王海楠 崔丽娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第22期2407-2413,共7页
目的探究miRNA-495对混合谱系白血病基因(mixed lineage leukemia,MLL)基因重排的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)增殖和凋亡的影响。方法收集2017年8月至2019年5月于宁夏医科大学总医院血液科就医确诊为AML的10例MLL-AF9... 目的探究miRNA-495对混合谱系白血病基因(mixed lineage leukemia,MLL)基因重排的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)增殖和凋亡的影响。方法收集2017年8月至2019年5月于宁夏医科大学总医院血液科就医确诊为AML的10例MLL-AF9白血病患者[男性6例,女性4例,年龄(39.37±2.71)岁];10例急性髓系白血病患者[男性5例,女性5例,年龄(41.12±1.92)岁];同时间段于外科门诊就医患者10例[男性6例,女性4例,年龄(42.31±3.21)岁]。根据是否转染miRNA-495 mimic分组为miRNA-495组和Control组,通过RT-qPCR检测各组miRNA-495的表达;CCK-8检测各组转染THP-1细胞的增殖情况;RT-qPCR和Western blot检测各组转染THP-1细胞增殖相关因子(Ki-67和PCNA)和细胞凋亡相关因子(Bcl-2、Bax和Caspase-3)的表达;Target Scan预测miRNA-495的靶基因并用双荧光素酶报告实验验证;RT-qPCR和Western blot检测miRNA-495组(转染miRNA-495)、Control组、丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸相互作用蛋白(Serine/threonine/tyrosine interacting protein,STYX)组(转染STYX)和miRNA-495+STYX组(转染miRNA-495和STYX)中STYX的表达。结果 miRNA-495在MLL-AF9的AML患者中表达下调[MLL-AF9患者相对表达量(0.25±0.08),95%CI:-0.86~-0.65,P<0.01,P<0.001];miRNA-495可以抑制THP-1细胞增殖(P <0.05,P <0.01,P <0.001);miRNA-495可以诱导THP-1细胞的凋亡(P<0.05,P<0.001);miRNA-495靶向结合STYX(P<0.01,P<0.001);STYX过表达可以逆转miRNA-495对THP-1细胞增殖和凋亡的作用(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论 miRNA-495通过靶向STYX调控MLL基因重排的急性髓系白血病细胞的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 MLL-AF9 miRNA-495 STYX基因 细胞增殖
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核受体NR6A1通过上调RIPK3基因表达诱导血管平滑肌细胞凋亡 被引量:1
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作者 张亚辉 汪雄 +6 位作者 吴胜英 彭吉霞 武福云 柯镜 张鹏 张秋芳 吕艳霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1581-1586,共6页
目的:探讨核受体亚家族6A1(NR6A1)对血管平滑肌细胞凋亡的影响及可能的分子机制。方法:将腺病毒Ad-NR6A1感染大鼠血管平滑肌细胞,分别在感染后0 h、24 h和48 h时进行MTT实验,以时间为横坐标,A570为纵坐标绘制细胞生长曲线,观察NR6A1对... 目的:探讨核受体亚家族6A1(NR6A1)对血管平滑肌细胞凋亡的影响及可能的分子机制。方法:将腺病毒Ad-NR6A1感染大鼠血管平滑肌细胞,分别在感染后0 h、24 h和48 h时进行MTT实验,以时间为横坐标,A570为纵坐标绘制细胞生长曲线,观察NR6A1对细胞生长的影响;进行DAPI染色、TUNEL染色及caspase活性检测,观察细胞凋亡情况;进一步通过基因芯片技术,寻找NR6A1的靶基因;采用siRNA介导的基因沉默技术,观察受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(RIPK3)基因沉默对NR6A1诱导的血管平滑肌细胞凋亡的影响。结果:腺病毒Ad-NR6A1感染细胞48 h时,NR6A1过表达组细胞数量较对照组(重组腺病毒载体Ad-Lac Z)明显减少;DAPI染色显示NR6A1过表达诱导血管平滑肌细胞出现核浓缩和核碎裂的凋亡表型,TUNEL染色显示NR6A1过表达引起细胞凋亡,caspase活性检测结果显示NR6A1过表达细胞内caspase-3、caspase-8和caspase-9活性均较对照组高;基因芯片技术检测发现,NR6A1过表达上调血管平滑肌细胞中RIPK3基因表达;RIPK3基因沉默可以显著抑制NR6A1诱导的平滑肌细胞凋亡。结论:NR6A1通过上调RIPK3基因表达诱导血管平滑肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 核受体亚家族6A1 受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3 细胞凋亡
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非小细胞肺癌组织中丝苏氨酸激酶11与细胞死亡调解子抗体表达检测的临床意义
7
作者 池菲 张新 +3 位作者 才虹美 赵瑾 张春艳 王维 《医学综述》 2016年第15期3041-3043,3047,共4页
目的探讨非小细胞肺癌组织中丝苏氨酸激酶11(STK11)、细胞死亡调解子抗体(BIM)表达检测的临床意义。方法选取2014年3月至2015年3月河北省胸科医院接收的非小细胞肺癌患者65例,收集切除后的非小细胞肺癌组织标本及癌旁正常组织。采... 目的探讨非小细胞肺癌组织中丝苏氨酸激酶11(STK11)、细胞死亡调解子抗体(BIM)表达检测的临床意义。方法选取2014年3月至2015年3月河北省胸科医院接收的非小细胞肺癌患者65例,收集切除后的非小细胞肺癌组织标本及癌旁正常组织。采用免疫组织化学技术对标本中STK11、BIM的表达进行研究。结果非小细胞肺癌组织中的STK11阳性表达率低于旁癌组织[63.08%(41/65)比92.31%(60/65)](x^2=16.022,P〈0.05),非小细胞肺癌组织中的BIM的阳性表达率高于旁癌组织[61.54%(40/65)比21.54%(14/65)](x^=21.413,P〈0.05)。淋巴结转移患者非小细胞肺癌组织中STK11阳性表达率显著低于未转移淋巴结患者[41.38%(12/29)比80.56%(29/36)](P〈0.05);Ⅰ~Ⅱ期患者非小细胞肺癌组织中STK11的阳性表达率显著高于Ⅲ~Ⅳ期[72.55%(37/51)比28.57%(4/14)](P〈0.05);高分化患者的非小细胞肺癌组织中STK11阳性表达率显著高于中分化、低分化[89.47%(17/19)比51.61%(16/31)、53.33%(8/15)](P〈0.05)。腺癌患者非小细胞肺癌组织中STK11阳性率显著高于鳞癌[78.13%(25/32)比48.48%(16/33)](P〈0.05)。Ⅰ~Ⅱ期的BIM阳性表达率显著高于Ⅲ~Ⅳ期[70.59%(36/51)比28.27%(4/14)](P〈0.05);高分化患者非小细胞肺癌组织阳性表达率显著高于中分化、低分化[89.47%(17/19)比45.16%(14/31)、60.oo%(9/15)](P〈0.05)。腺癌BIM阳性率高于鳞癌[75.oo%(24/32)比48.48%(16/33)](P〈O.05)。结论STK11、BIM表达水平可作为判定非小细胞肺癌转移及预后的生物学指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 丝苏氨酸激酶11 细胞死亡调解子抗体
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受体相互作用蛋白激酶3蛋白促进血管平滑肌细胞钙化的作用机制 被引量:3
8
作者 陈韦任 吴雪萍 +3 位作者 周玉杰 钱赓 沙媛 王锦达 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2021年第5期523-526,共4页
目的研究血管平滑肌细胞钙化中受体相互作用蛋白激酶3(Ripk3)调控钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡的作用。方法采用β磷酸甘油和氯化钙培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞诱导钙化。实验随机分为4组:对照组、钙化组、Ripk3^(-/-)组、钙化+Rip... 目的研究血管平滑肌细胞钙化中受体相互作用蛋白激酶3(Ripk3)调控钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡的作用。方法采用β磷酸甘油和氯化钙培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞诱导钙化。实验随机分为4组:对照组、钙化组、Ripk3^(-/-)组、钙化+Ripk3^(-/-)组(联合组)。使用茜素红S染色检测血管平滑肌细胞钙化情况,同时测定细胞内Ca^(2+)含量和碱性磷酸酶活性。Western blot法测定Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达。结果血管平滑肌细胞钙化3、7 d的Ripk3表达较钙化前明显增加,14 d的Ripk3表达较7 d明显增加,并达到最高值,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组和Ripk3^(-/-)组比较,钙化组Ca^(2+)、碱性磷酸酶活性、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、细胞凋亡率和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与钙化组比较,联合组Ca^(2+)和碱性磷酸酶活性明显降低[(102.8±12.8)nmol/mg vs(457.1±51.2)nmol/mg,(136.1±15.4)U/mg vs(412.2±46.7)U/mg,P<0.05],Runt相关转录因子2和骨形态发生蛋白2表达明显降低(1.07±0.15 vs 1.84±0.23,1.27±0.14 vs 3.01±0.25,P<0.05)。与钙化组比较,联合组细胞凋亡率和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达明显降低,差异有统计学意义[(15.8±3.9)%vs(31.1±4.2)%,1.19±0.14 vs 2.21±0.23,P<0.05]。结论Ripk3通过促进钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡起到加重血管钙化的作用。 展开更多
关键词 受体作用蛋白丝氨酸苏氨酸激酶类 血管钙化 骨形态发生蛋白质2 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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分化抑制因子-1和磷酸化Akt在鼻咽癌组织中的表达及意义 被引量:1
9
作者 陈孝珍 祝晓芬 +1 位作者 黄晓明 杨清绪 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2011年第10期521-524,共4页
目的研究分化抑制因子-1(inhibitor ofdifferentiation or DNA binding 1,Id1)和磷酸化Akt(p-Akt)在鼻咽癌组织中的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测81例NPC组织、25例鼻咽炎症组织中Id1、p-Akt蛋白的表达情况。结果... 目的研究分化抑制因子-1(inhibitor ofdifferentiation or DNA binding 1,Id1)和磷酸化Akt(p-Akt)在鼻咽癌组织中的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测81例NPC组织、25例鼻咽炎症组织中Id1、p-Akt蛋白的表达情况。结果 Id1、p-Akt蛋白在NPC组织中阳性表达率分别为75.3%、81.5%,与鼻咽炎症组织比较,差异有统计学意义。Id1蛋白在NPC中的表达与T分级相关,且Id1、p-Akt蛋白在NPC中的表达均与淋巴结转移、临床分期相关,而与年龄、性别、治疗后复发转移无明显相关性。Id1、p-Akt蛋白在NPC组织中的表达呈显著正相关。生存分析显示Id1、p-Akt的表达均与NPC患者5年生存率相关。Cox回归分析显示,p-Akt是影响NPC预后的独立危险因素。结论 Id1、p-Akt可能在NPC发生发展过程中起重要作用,二者有望成为判断NPC患者预后的分子生物学指标。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 分化抑制蛋白类 受体作用蛋白丝氨酸苏氨酸激酶类 免疫组织化学
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RIPK3基因转染的SH-SY5Y细胞中HIF-1α基因及其信号通路相关基因表达变化 被引量:1
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作者 张国禄 程世翔 +4 位作者 徐忠伟 衣泰龙 廖吉连 涂悦 张赛 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第7期13-16,共4页
目的观察受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的p CMV6-AC-GFP质粒(重组质粒),培养SH-SY5Y细胞,分为实验组及对照组... 目的观察受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的p CMV6-AC-GFP质粒(重组质粒),培养SH-SY5Y细胞,分为实验组及对照组,分别转染重组质粒和空载质粒。采用Western blotting法检测细胞中的RIPK3蛋白,分别于培养8、14、20、26、32、38 h后,通过MTT实验检测细胞增殖情况(OD值)。采用转录组测序技术(RNAseq)及Ingenuity Pathway Analysis(IPA)软件检测并筛选RIPK3-HIF1α下游信号通路中的关键基因。采用微滴式数字PCR(dd PCR)检测两组细胞中的HIF-1αmRNA。结果实验组细胞中RIPK3蛋白相对表达量(0.806±0.097 5)高于对照组(0.455±0.088 6),P<0.05。随培养时间延长,实验组细胞增殖受到抑制。实验组细胞中HIF-1αmRNA相对表达量(0.015 43±0.003 47)低于对照组(0.046 28±0.010 26),P<0.05。在HIF-1α为核心的相互作用关系网络中,筛选出关键分子泛素缀合酶样蛋白(UBC)、希佩尔-林道蛋白(VHL)、转录延伸因子B多肽1(TCEB1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)。结论 RIPK3基因转染SH-SY5Y后,细胞中HIF-1αmRNA表达下调,同时HIF-1α信号通路相关基因(UBC、VHL、TCEB1、VEGFA)的表达水平受到影响。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 受体相互作用蛋白激酶3 低氧诱导因子1Α 泛素缀合酶样蛋白 希佩尔-林道蛋白 转录延伸因子B多肽 血管内皮生长因子A
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吡非尼酮通过miRNA-425-5p调控TGF-β/Smad通路对大鼠心肌纤维化的影响 被引量:1
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作者 邹琳 张昕 李丽 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第10期1037-1042,共6页
目的探讨吡非尼酮通过调控miRNA-425-5p及转化生长因子(TGF)-β/Smad通路改善心肌梗死大鼠心肌纤维化程度的作用。方法将60只雄性SD大鼠分为3组:假手术组(不结扎冠状动脉)、模型组、吡非尼酮组(吡非尼酮0.3 g/kg灌胃)。造模4周后采用心... 目的探讨吡非尼酮通过调控miRNA-425-5p及转化生长因子(TGF)-β/Smad通路改善心肌梗死大鼠心肌纤维化程度的作用。方法将60只雄性SD大鼠分为3组:假手术组(不结扎冠状动脉)、模型组、吡非尼酮组(吡非尼酮0.3 g/kg灌胃)。造模4周后采用心脏多普勒超声评价各组大鼠心脏功能;酶联免疫吸附试验检测血浆中白细胞介素6(IL-6)、Ⅰ型胶原蛋白α2(COL1α2)、Ⅲ型胶原蛋白α1(COL3α1)的水平;采用Masson染色法评价大鼠心肌纤维化程度,使用Image-Pro Plus 6.0分析各组心肌胶原容积分数;Western blot检测心肌组织中TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达水平;实时荧光定量PCR(qPCR)检测心肌组织中TGF-β1和miRNA-425-5p表达水平。同时在体外分离、培养乳鼠心肌成纤维细胞,分为对照组(不加任何物质)、miRNA-425-5p mimic组(加入转染miRNA-425-5p mimic)、吡非尼酮组(加入1.5 g/L的吡非尼酮)。采用qPCR检测各组miRNA-425-5p和TGF-β1 mRNA表达水平。结果模型组大鼠与假手术组相比心脏左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVESd)增大,左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)降低(P<0.05);Masson染色及定量分析结果显示心肌纤维化加重;炎性因子IL-6、COL3α1、COL1α2水平明显升高(P<0.05);心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达升高,miRNA-425-5p表达水平降低(均P<0.05)。吡非尼酮组与模型组相比,LVEDd、LVESd缩小,LVEF、FS升高(P<0.05),Masson染色及定量分析结果示心肌纤维化程度减轻,血浆炎性因子IL-6、COL3α1、COL1α2水平明显降低(P<0.05);心肌组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达水平降低,miRNA-425-5p表达水平升高(均P<0.05)。体外细胞实验结果表明,miRNA-425-5p mimic组与对照组相比,miRNA-425-5p表达水平升高,TGF-β1 mRNA表达水平降低(P<0.05)。吡非尼酮组与对照组相比,miRNA-425-5p表达水平升高,TGF-β1 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论吡非尼酮可通过调节miRNA-425-5p表达水平调控TGF-β/Smad信号通路,减轻心肌纤维化,改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏功能。 展开更多
关键词 纤维化 微RNA 转化生长因子Β1 SMAD蛋白质类 受体作用蛋白丝氨酸苏氨酸激酶类 吡非尼酮 微小RNA-425-5p
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宫颈癌组织中受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4高表达与宫颈癌预后的相关性分析 被引量:4
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作者 张华 路喜安 《山西医药杂志》 CAS 2018年第8期865-867,共3页
目的探讨受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4(RIPK4)在宫颈癌组织中表达水平及与宫颈癌临床病理参数的相关性。方法研究对象是39例宫颈癌患者,收集所有宫颈癌患者癌组织和癌旁正常组织。应用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测宫颈癌... 目的探讨受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4(RIPK4)在宫颈癌组织中表达水平及与宫颈癌临床病理参数的相关性。方法研究对象是39例宫颈癌患者,收集所有宫颈癌患者癌组织和癌旁正常组织。应用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测宫颈癌组织及正常宫颈组织中RIPK4mRNA表达水平。应用免疫组织化学方法检测宫颈癌组织及正常宫颈组织中RIPK4蛋白表达水平。分析宫颈癌组织中RIPK4表达与宫颈癌临床病理参数相关性。结果正常组织中RIPK4 mRNA表达水平是1.5±0.8;宫颈癌组织中RIPK4mRNA表达水平是4.3±1.6,宫颈癌组织中RIPK4mRNA表达水平显著增高(P<0.05)。RIPK4蛋白在正常宫颈组织中表达阴性;RIPK4蛋白在宫颈癌组织中表达阳性,其中14例(36%)宫颈癌患者RIPK4蛋白表达弱阳性,25例(64%)宫颈癌患者RIPK4蛋白表达强阳性。统计分析显示,国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移与宫颈癌组织中RIPK4高表达显著相关(P<0.05)。结论宫颈癌组织中RIPK4高表达与FIGO分期和淋巴结转移显著相关。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4 免疫组织化学 实时聚合酶链反应
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甜菜STPK家族鉴定及蛋白互作网络分析 被引量:2
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作者 端木慧子 牛志新 李海英 《中国糖料》 2018年第6期8-10,共3页
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(STPK)参与调节植物体内的多种信号转导、胁迫应答过程,但在甜菜中STPK的研究相对较少。为了揭示甜菜中STPK家族的特征从而预测其功能,本研究采用生物信息学方法,从全基因组水平对甜菜STPK家族进行了鉴定与分析,... 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(STPK)参与调节植物体内的多种信号转导、胁迫应答过程,但在甜菜中STPK的研究相对较少。为了揭示甜菜中STPK家族的特征从而预测其功能,本研究采用生物信息学方法,从全基因组水平对甜菜STPK家族进行了鉴定与分析,并构建了STPK蛋白互作网络。结果表明,甜菜基因组中鉴定到148个STPK,分为9个亚类;且这些STPK均含有11个蛋白激酶的保守结构域;甜菜STPK互作网络包括8个子网;这些蛋白质与发育和刺激应答相关。本研究结果可为甜菜遗传育种提供理论支持与基因资源。 展开更多
关键词 甜菜 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 家族鉴定 蛋白互作网络
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多激酶抑制药索拉非尼 被引量:4
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作者 徐晓光 赵利枝 +1 位作者 郝建秀 王颖 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期628-630,共3页
索拉非尼是首个口服多激酶抑制药,靶向作用于肿瘤细胞和肿瘤血管上的丝氨酸和(或)苏氨酸及受体酪氨酸激酶,阻断信号传导,抑制肿瘤生长。临床前研究显示,索拉非尼作用的2种激酶会影响肿瘤细胞增生及血管生成,而此2种行为为肿瘤生长时所... 索拉非尼是首个口服多激酶抑制药,靶向作用于肿瘤细胞和肿瘤血管上的丝氨酸和(或)苏氨酸及受体酪氨酸激酶,阻断信号传导,抑制肿瘤生长。临床前研究显示,索拉非尼作用的2种激酶会影响肿瘤细胞增生及血管生成,而此2种行为为肿瘤生长时所不可或缺。2005年底经FDA批准上市,用于进展性肾脏细胞恶性肿瘤的治疗。本文对索拉非尼的药理学、药动学以及临床应用等方面的研究成果进行综述。 展开更多
关键词 索拉非尼 丝氨酸 苏氨酸 受体蛋白质酪氨酸激酶类 肿瘤
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受体相互作用蛋白激酶与成人斯蒂尔病病情活动的相关性
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作者 林镇 郭茹茹 +2 位作者 陈晓翔 余跃天 吕良敬 《临床与病理杂志》 2018年第5期966-971,共6页
目的:研究成人斯蒂尔病(adult-onset Still’s disease,AOSD)患者外周血细胞内受体相互作用蛋白激酶-1/3(receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 1/3,RIPK1/3)的表达水平,分析RIPK1/3与AOSD病情活动的相关性,并初步探... 目的:研究成人斯蒂尔病(adult-onset Still’s disease,AOSD)患者外周血细胞内受体相互作用蛋白激酶-1/3(receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 1/3,RIPK1/3)的表达水平,分析RIPK1/3与AOSD病情活动的相关性,并初步探讨其在疾病中的作用机制。方法:回顾性分析2010年6月至2015年6月就诊于我院风湿科58例AOSD患者的病史信息,明确与疾病活动相关的临床指标。为初步探讨其中潜在的机制,采用流式细胞术检测2016年9月至2017年12月17例AOSD住院患者及35例健康对照外周血中性粒细胞和单核细胞内RIPK1/3的表达水平。结果:58例AOSD患者中性粒细胞绝对值和单核细胞绝对值与病情严重程度(系统评分)显著相关(r=0.6157,r=0.4278,P<0.001)。初步机制探讨中发现17例患者外周血中性粒细胞和单核细胞IPK1/3的表达水平显著低于健康对照(P<0.0001),且患者外周血单核细胞中高表达RIPK1和RIPK3的单核细胞比例与血沉呈负相关(r=.0.5332,P<0.05;r=.0.5098,P<0.05)。结论:中性粒细胞及单核细胞绝对计数可作为AOSD病情活动性良好的监测指标,且RIPK1/3在单核细胞中的表达情况可能在致病中发挥重要作用。 展开更多
关键词 成人STILL病 受体相互作用蛋白激酶-1/3 疾病活动性
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抑制TAK1可加重甲苯二异氰酸酯诱导的哮喘小鼠气道炎症
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作者 杨淑銮 赵文驱 +6 位作者 彭显如 蓝紫涵 黄俊文 韩慧珊 陈颖 蔡绍曦 赵海金 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期181-189,共9页
目的探讨转化生长因子β激活激酶1(TAK1)对甲苯二异氰酸酯(TDI)哮喘小鼠气道炎症的影响。方法建立TDI哮喘小鼠模型,为探讨TAK1在TDI哮喘模型中的作用,将32只小鼠随机分为4组(8只/组):AOO组,AOO+5Z-7-Oxozeaenol组,TDI组,TDI+5Z-7-Oxozea... 目的探讨转化生长因子β激活激酶1(TAK1)对甲苯二异氰酸酯(TDI)哮喘小鼠气道炎症的影响。方法建立TDI哮喘小鼠模型,为探讨TAK1在TDI哮喘模型中的作用,将32只小鼠随机分为4组(8只/组):AOO组,AOO+5Z-7-Oxozeaenol组,TDI组,TDI+5Z-7-Oxozeaenol组;为进一步探讨RIPK1在体内模型的作用,将另外32只小鼠随机分为4组(8只/组):AOO组,TDI组,TDI+5Z-7-Oxozeaenol组,TDI+5Z-7-Oxozeaenol+Necrostatin-1组。每次激发前使用TAK1抑制剂(5Z-7-Oxozeaenol,5 mg/kg)和/或RIPK1抑制剂(Necrostatin-1,5 mg/kg)。检测各组小鼠气道反应性、气道炎症及气道重塑等指标。体外实验:配制TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA)复合物联合TAK1抑制剂处理小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),通过CCK8检测各组细胞活力,通过Westernblot检测各组TAK1、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及受体相互作用丝/苏氨酸蛋白酶1(RIPK1)相关信号通路分子表达情况;使用RIPK1抑制剂进一步评估对细胞活力及TDI哮喘模型的影响。结果与单独TDI致敏激发哮喘小鼠相比,TAK1抑制剂加重了小鼠气道炎症、气道高反应性及气道重塑(P<0.05)。抑制TAK1降低了RAW264.7细胞活力,与TDI-HSA共同处理进一步降低(P<0.05)。抑制TAK1降低了TDI-HSA诱导的TAK1磷酸化水平及MAPK信号通路的活化(P<0.05)。TAK1抑制剂与TDI-HSA共同处理后,RIPK1磷酸化水平升高,同时Caspase 8持续活化(P<0.05);使用RIPK1抑制剂可以恢复TAK1抑制剂与TDI-HSA共同处理引起的细胞活力的减低(P<0.05)。体内RIPK1抑制剂亦可以减轻TAK1抑制剂对TDI哮喘小鼠气道炎症的加重(P<0.05)。结论抑制TAK1可能通过增加RIPK1的活性,引起Caspase 8的持续活化而增加巨噬细胞的死亡,参与促进TDI诱导的哮喘小鼠气道炎症。 展开更多
关键词 甲苯二异氰酸酯 哮喘 转化生长因子β激活激酶1 受体相互作用丝/苏氨酸蛋白酶1 丝裂原活化蛋白激酶
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坏死性凋亡机制及在结直肠肿瘤中的研究进展 被引量:4
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作者 胡建生 王雯 +2 位作者 刘海旺 张欣颖 孙林梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期1088-1092,共5页
结直肠肿瘤是常见的消化道恶性肿瘤之一,随着诊疗手段的进展其病死率有所下降,但预后仍很差。目前化疗药物治疗结直肠肿瘤主要是通过诱导细胞的死亡来抑制肿瘤的生长,然而,细胞死亡抵抗是胃肠道肿瘤治疗不成功和疾病复发的主要原因,大... 结直肠肿瘤是常见的消化道恶性肿瘤之一,随着诊疗手段的进展其病死率有所下降,但预后仍很差。目前化疗药物治疗结直肠肿瘤主要是通过诱导细胞的死亡来抑制肿瘤的生长,然而,细胞死亡抵抗是胃肠道肿瘤治疗不成功和疾病复发的主要原因,大多数肿瘤细胞由于凋亡机制的失调而具有耐药性。新的细胞死亡方式如坏死性凋亡给结直肠肿瘤治疗带来希望,坏死性凋亡是一种Caspase非依赖性细胞死亡方式,通常表现为坏死的形态学特征,主要通过RIPK1和RIPK3调控,并且由MLKL执行完成。目前,基于坏死性凋亡的结肠直肠肿瘤靶向治疗研究正在进行,提示坏死性凋亡将为结直肠肿瘤的治疗提供新策略。本篇综述重点阐述坏死性凋亡,并讨论坏死性凋亡在结直肠肿瘤发展和治疗中的作用机制。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 坏死性凋亡 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1/3 混合谱系激酶结构域样蛋白
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胎儿颈项透明层厚度检测联合母体血浆miR-22-3p、RIPK1浓度对胎儿先天性心脏病的诊断价值 被引量:1
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作者 侯广霞 臧鹏程 +1 位作者 赵丽 董晓菁 《岭南心血管病杂志》 CAS 2022年第6期550-554,共5页
目的 探究胎儿颈项透明层(nuchal translucency,NT)厚度联合母体血浆微小RNA-22-3p(micro RNA-22-3p,miR-22-3p)、受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(receptor-interacting serine/threonine protein kinase 1,RIPK1)对胎儿先天性心脏... 目的 探究胎儿颈项透明层(nuchal translucency,NT)厚度联合母体血浆微小RNA-22-3p(micro RNA-22-3p,miR-22-3p)、受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(receptor-interacting serine/threonine protein kinase 1,RIPK1)对胎儿先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)的诊断价值。方法 选择2018年3月至2020年10月在北部战区总医院产科确诊怀有CHD胎儿的孕妇57例为观察对象(CHD组),选择同期怀有健康胎儿的孕妇60名为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测孕妇血浆中miR-22-3p浓度,酶联免疫吸附法检测孕妇血浆中RIPK1浓度,超声检查胎儿NT厚度,Pearson法分析miR-22-3p、RIPK1的相关性,受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析胎儿NT厚度联合血浆miR-22-3p、RIPK1对胎儿CHD的预测价值。结果 两组孕妇年龄、孕周及胎儿性别之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组[(2.14±0.32)mm、(2.23±0.54)ng/mL、1.05±0.14]比较,CHD组胎儿NT厚度[(2.93±0.45)mm]增加,血浆RIPK1[(5.68±1.73)ng/mL]浓度显著升高,miR-22-3p(0.67±0.10)浓度显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,CHD组血浆RIPK1与miR-22-3p浓度呈负相关性(r=-0.448,P<0.05);NT厚度、血浆RIPK1、miR-22-3p联合预测胎儿CHD的敏感度为89.47%,特异度为85.00%,曲线下面积为0.933。结论 CHD胎儿NT厚度增加,母体血浆中miR-22-3p浓度降低,RIPK1浓度升高;胎儿NT厚度联合母体血浆miR-22-3p、RIPK1浓度检测对胎儿CHD具有一定诊断价值。 展开更多
关键词 先天性心脏病 颈项透明层厚度 微小RNA-22-3p 受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1 血浆
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膝关节炎慢性痛老龄大鼠术后神经认知障碍时海马RIPK1与NLRP3炎症小体的关系
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作者 于丽丽 黄冬冬 +5 位作者 宋盼盼 李春雷 孙秀伟 李晨晨 赵娟 常玉林 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期307-312,共6页
目的评价膝关节炎慢性痛老龄大鼠术后神经认知障碍时海马受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法健康雄性SD大鼠64只,18月龄,体质量500~550 g,采用随机数字表法分为4组(n=16):膝关... 目的评价膝关节炎慢性痛老龄大鼠术后神经认知障碍时海马受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法健康雄性SD大鼠64只,18月龄,体质量500~550 g,采用随机数字表法分为4组(n=16):膝关节炎慢性痛组(P组)、膝关节炎慢性痛+手术组(PS组)、RIPK1抑制剂Necrostatin-1+膝关节炎慢性痛+手术组(NPS组)和二甲基亚砜(DMSO)+膝关节炎慢性痛+手术组(DPS组)。采用左膝关节腔内注射碘乙酸盐(MIA)1 mg的方法制备膝关节炎模型并于12周后行七氟烷麻醉下剖腹探查术。NPS组和DPS组分别于术前1 h腹腔注射Necrostatin-16.25 mg/kg或等剂量DMSO。于关节腔内注射MIA前1周、注射后6和12周时测定热痛阈。于术后7 d时,采用Morris水迷宫实验评估认知功能;取海马组织,HE染色后光镜下观察病理学结果,采用Western blot法测定RIPK1、磷酸化RIPK1(p-RIPK1)、NLRP3、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cl-caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达,采用ELISA法测定IL-1β和IL-18的含量。结果4组大鼠MIA注射后6和12周时热痛阈较注射前降低(P<0.05),4组大鼠各时点热痛阈比较差异无统计学意义(P>0.05)。与P组比较,PS组、DPS组和NPS组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台位置次数减少,海马组织RIPK1、p-RIPK1、NLRP3、cl-caspase-1和ASC表达上调,IL-1β和IL-18含量升高(P<0.05),海马神经元发生明显病理损伤;与PS组和DPS组比较,NPS组逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,穿越原平台位置次数增加,海马组织RIPK1、p-RIPK1、NLRP3、cl-caspase-1和ASC表达下调,IL-1β和IL-18含量降低(P<0.05),海马神经元病理损伤减轻。结论膝关节炎慢性痛老龄大鼠术后海马RIPK1功能增强,进而激活NLRP3炎症小体,诱发神经炎症,可能参与术后神经认知障碍的发生机制。 展开更多
关键词 骨关节炎 老年人 术后认知并发症 受体作用蛋白丝氨酸苏氨酸激酶类 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3
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ZBP1/RIPK1信号通路在LPS-ATP致小鼠巨噬细胞焦亡中的作用
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作者 熊瑞驿 于春锐 +4 位作者 王宜博 王蓓莹 张晓 马福国 孙立新 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期733-737,共5页
目的:评价Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)/受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)信号通路在脂多糖(LPS)-三磷酸腺苷(ATP)致小鼠巨噬细胞焦亡中的作用。方法:常规培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,采用随机数字表法分为6组( n=9):空白对照组(C组)、LPS-ATP组、LP... 目的:评价Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)/受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)信号通路在脂多糖(LPS)-三磷酸腺苷(ATP)致小鼠巨噬细胞焦亡中的作用。方法:常规培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,采用随机数字表法分为6组( n=9):空白对照组(C组)、LPS-ATP组、LPS-ATP+转染阴性对照scRNA组(LPS-ATP+scRNA组)、LPS-ATP+ZBP1小干扰RNA组(LPS-ATP+siRNA组)、LPS-ATP+二甲基亚砜组(LPS-ATP+DMSO组)和LPS-ATP+RIPK1抑制剂nec-1组(LPS-ATP+nec-1组)。LPS-ATP+siRNA组使用siRNA技术抑制ZBP1的表达,LPS-ATP+nec-1组给予nec-1抑制RIPK1的表达;C组常规培养,余5组给予10 μg/ml LPS孵育24 h,然后加入5 mmol/L ATP孵育30 min构建细胞焦亡模型。采用CCK-8法检测细胞存活情况;ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α浓度;碘化丙啶荧光染色法测定细胞焦亡情况;Western blot法检测ZBP1、RIPK1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)和消皮素D(GSDMD)表达。 结果:与C组比较,LPS-ATP组细胞存活率降低,细胞焦亡率升高,上清液IL-1β、IL-6、IL-18及TNF-α浓度升高,细胞ZBP1、RIPK1、caspase-1和GSDMD表达上调( P<0.05);与LPS-ATP组比较,LPS-ATP+scRNA组和LPS-ATP+DSMO组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05);与LPS-ATP+scRNA组比较,LPS-ATP+siRNA组细胞存活率升高,细胞焦亡率降低,上清液IL-1β、IL-6、IL-18及TNF-α浓度降低,细胞ZBP1、RIPK1、caspase-1和GSDMD表达下调( P<0.05);与LPS-ATP+DSMO组比较,LPS-ATP+nec-1组细胞存活率升高,细胞焦亡率降低,上清液IL-1β、IL-6、IL-18及TNF-α浓度降低,RIPK1、caspase-1和GSDMD表达下调( P<0.05),ZBP1表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:ZBP1/RIPK1信号通路激活参与了LPS-ATP致小鼠巨噬细胞焦亡的过程。 展开更多
关键词 脂多糖类 三磷酸腺苷 细胞焦亡 巨噬细胞 DNA结合蛋白质类 受体作用蛋白丝氨酸苏氨酸激酶类
原文传递
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