蛇足石杉的形态学及不同光照处理下气孔特征的研究

对蛇足石杉的形态学特征进行了重新描述,并对不同光照处理下蛇足石杉叶片的气孔特征进行比较。结果表明:在一定范围内,随着环境中光照强度的增加,气孔长度和宽度、单个气孔面积、气孔密度及气孔总面积都呈增加的趋势。当光照强度超过某一阈值时其气孔指数和气孔密度仍呈增加的趋势,但气孔长度、宽度和单个气孔面积呈变小趋势。小而密的气孔是其适应旱生环境的表现,表明其具有一定的生态适应能力,但进行人工栽培时应避免光照过强。

长柄石杉中石杉碱甲的含量测定

[目的]建立HPLC法测定长柄石杉中石杉碱甲的含量。[方法]色谱条件:色谱柱为ZORBAX Extend-C18(150 mm×4.6 mm,4.5μm),流动相为乙腈-浓度0.02 mol/L磷酸二氢钾(8∶92,V/V),检测波长为310 nm,柱温为25℃,流速为1 ml/min,进样量为10μl。[结果]石杉碱甲在0.046～0.460μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(R=0.999 9),平均回收率为97.45%,RSD为2.70%,平均含量为0.025%。[结论]该方法简单、易行,可用于长柄石杉中石杉碱甲的含量测定。

影响九华山千层塔石杉碱甲含量的主要环境因子分析

为了确定九华山千层塔〔Huperzia serrata(Thunb.)Trev.〕的最佳采收期和采收部位,根据千层塔不同部位的石杉碱甲含量及各环境因子的变化趋势,运用灰色关联分析法对影响九华山千层塔石杉碱甲含量的主要环境因子进行了分析。结果表明,千层塔各部位的石杉碱甲含量不同,其中根中的含量最低,叶和茎中的含量较高;4月份叶和茎中的石杉碱甲含量最高,分别为0.0559%和0.0444%。影响九华山千层塔石杉碱甲含量的主要环境因子是根际土壤有机质含量、全氮含量和全磷含量,温度和降水量与石杉碱甲含量变化的相关性最小。研究结果表明,在九华山,千层塔的最佳采收期为4月份,最佳采收部位是叶和茎。

千层塔中石杉碱甲提取分离工艺研究

利用单因素法和正交试验设计，确定了从千层塔中提取石杉碱甲的最佳工艺条件为：乙醇体积分数80％，料液比1：25（g：mL），提取时间3h，提取温度60℃；最佳分离条件为：D101树脂吸附，80％乙醇室温下洗脱，总收率0．3％，纯度可达10％。

湘西地区蛇足石杉内生真菌的分离

采集不同生境的药用植物蛇足石杉,运用不同灭菌方法处理外植体,并用PDA平板培养基及孟加拉红培养基进行内生真菌的分离纯化.经过几种灭菌方法的摸索和比较研究,发现蛇足石杉外植体的灭菌十分困难(尤其是其茎部),难以在保持植物鲜活状态下达到一次彻底灭菌,有必要二次灭菌.通过二次灭菌分离得到的9株内生真菌中,来自蛇足石杉茎部的6株,来自叶片的3株.蛇足石杉的9株内生真菌在平板培养时生长极其缓慢,仅一株可在培养时产生孢子.

H_2O_2诱变蛇足石杉培养物的后代株系变化分析

目的:探索H_2O_2胁迫诱导提高蛇足石杉叶状体积累石杉碱甲(huperzine A,Hup A)含量的作用。方法:对经H_2O_2诱变建立的蛇足石杉叶状体中筛选的13个株系及出发株等14份材料进行了相对增长率和Hup A含量比较及ISSR DNA分子分析。结果:3%H_2O_2胁迫诱导处理16 min的叶状体后代相对增长率和积累Hup A的含量与出发株差异显著(P<0.05),变异叶状体株系SH042相对增长率和积累Hup A含量最大,分别为4 499.28%和(261.17±0.19)μg/g DW,比出发株分别提高2.35和2.43倍;20个ISSR随机引物中有9个对14份叶状体株系遗传分子显示了多态性,聚类分析可分为4大类,说明诱变后代叶状体株系的DNA分子存在显著差异。结论:该研究结果表明H_2O_2用于诱导蛇足石杉培养物能提高Hup A含量和建立丰富的遗传资源。

福建省不同居群长柄石杉石杉碱甲含量的研究

实地采集标本并用改进的HPLC法测定了福建省不同地区16个居群间长柄石杉的石杉碱甲(Hup A)含量。结果显示,石杉碱甲在长柄石杉福建省不同居群间均有分布,其中以梁野山和新罗区黄连盂两个居群含量较高,分别为0.047 7%和0.046 4%;从区域上看,龙岩地区含量最高,平均为0.041 6%,三明地区含量次之,平均为0.041 4%,宁德地区含量最低,平均为0.019 7%。结果表明,福建地区拥有良好的石杉碱甲植物资源。

高温胁迫对蛇足石杉生理特性的影响

目的研究蛇足石杉的最高耐受温度及耐受时间,为人工栽培蛇足石杉提供温度调控参考。方法通过在25、30、35、40℃的不同温度下胁迫处理蛇足石杉,测定其叶片中的可溶性糖量、可溶性蛋白质量、游离脯氨酸量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性在不同处理时间的量,并对其进行相关性分析。结果随着温度的升高,各项指标均有大幅度的变化,可溶性糖和游离可溶性脯氨酸的量呈上升的趋势,可溶性蛋白质量呈下降趋势,POD和SOD活性均呈现下降的趋势。35℃高温胁迫达8 d后,对蛇足石杉的各项生理指标有较大影响,外部形态表现轻度失水,继续处理至12 d后,叶片发黄,植株基本死亡;40℃高温胁迫6 d后,蛇足石杉的各项生理指标均出现较大幅度的变化,SOD活性显著下降,叶片发黄,第8天植株完全死亡。结论高温对蛇足石杉的生长有明显影响,其生长温度在25～30℃为宜,长时间持续超过35℃对其生长有明显的影响,40℃为极限高温,短期内会引起植株死亡。

高温胁迫对蛇足石杉质膜透性及叶绿体结构的影响

目的 蛇足石杉Huperzia serrata是治疗阿尔茨海默病的珍稀药用植物，其生长受高温限制，研究高温对蛇足石杉质膜及叶绿体结构与功能的影响，为生产实践提供参考依据。方法 分别在25、30、35、40 ℃不同温度下处理蛇足石杉，测定不同温度下的膜脂过氧化物丙二醛（MDA）的量及电导率的变化，以及叶绿素总量、叶绿素a、叶绿素b及叶绿素a/b的变化，并用透射电镜观察不同温度处理后的叶绿体的超微结构。结果 在35、40 ℃的高温处理下，MDA、电导率的值明显高于对照；40 ℃处理4 d后，叶绿素总量显著下降，6 d时至最低值，仅为对照的58%，叶绿素a、b量的变化与叶绿素总量的变化规律相似；透射电镜观察显示，35 ℃处理4 d，叶绿体结构出现变形，40 ℃处理4 d叶绿体结构受到明显破坏，被膜模糊并出现不同程度的断裂，类囊体排列紊乱，基质片层不规则，出现断裂等。结论 结合生理指标的变化、叶绿体超微结构及外部形态的变化，蛇足石杉生长的适宜温度在25～30 ℃；40 ℃是蛇足石杉生长的极限温度，胁迫4 d后就会引起植株死亡；35 ℃处理对蛇足石杉生长也有明显的影响，长时间超过35 ℃能引起植株死亡。

蛇足石杉不同生长阶段植株中石杉碱甲含量的地区差异及生境影响的比较观察

目的:调研蛇足石杉不同生长阶段植株中石杉碱甲含量的区域差异,探讨生境因子对石杉碱甲含量的影响。方法:调查江西修水县、贵州岑巩县、广西那坡县和重庆石柱县等4个样地的生境因子,采集样地中不同生长阶段的野生蛇足石杉植株材料(简称:材料),并用HPLC法测定其中的石杉碱甲含量。结果:①不同生长阶段材料中的石杉碱甲含量比较:幼苗>幼株>成株(江西、重庆样地),幼株>幼苗>成株(贵州、广西样地)。②相同生长阶段不同样地材料中的石杉碱甲含量比较:幼苗期:4样地无明显差异;幼株期:贵州样地最高,其他3样地差异不显著;成株期:贵州样地最高,重庆其次,江西和广西样地差异不显著。③不同样地各生长阶段材料中石杉碱甲含量均值比较:贵州样地最高为6.6,重庆样地其次为5.42,广西和江西最低分别为4.83,4.47。④石杉碱甲含量与生境因子的关系:含量与年降雨量呈负相关关系,与海拔高度、年平均气温等无明显相关性。结论:①蛇足石杉幼苗和幼株中石杉碱甲平均含量均显著高于成株,不同样地之间平均含量存在显著差异。②生境因子严重影响蛇足石杉材料中石杉碱甲含量,其中较多的降雨不利于石杉碱甲的积累。

石杉碱甲药源植物研究进展

石杉碱甲(Huperzine A)从石杉科(Huperziaceae)石杉属(Huperzia)植物蛇足石杉(Huperzia ser-rata(Thunb.ex Murray)Trev.)中分离得到,其临床治疗阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)疗效显著。由于石杉碱甲的化学合成在短时间内难以克服合成步骤繁琐、成本高、活性低等特点,自然资源的挖掘和开发成为解决石杉碱甲短缺的有效途径之一。故对近年来石杉碱甲药源植物研究所取的成果和难点进行总结,以期为今后的研究提供一定参考。