血清外泌体microRNAs单一及组合panel对结直肠癌的诊断价值

目的 检测血清外泌体miR-15b、miR-16、miR-21和miR-31在结直肠癌患者中的表达水平,并评估其对结直肠癌的诊断价值。方法 选取2018年3月至2022年5月本院收治的123例直肠癌患者(结直肠癌组)及117例大肠腺瘤患者作为研究对象(结直肠癌组),并纳入150例健康对照者作为对照(健康对照组)。提取血清外泌体中miR-15b、miR-16、miR-21和miR-31,qRT-PCR比较4种miRNA在各组中表达水平差异。受试者工作特征(ROC)曲线评价4种miRNA单一及组合panel对结直肠癌的诊断价值。结果 结直肠癌组血清miR-15b、miR-16、miR-21和miR-31水平高于健康对照组(P <0.05),且miR-15b、miR-21和miR-31水平高于结直肠腺瘤组(P <0.05)。Ⅲ-Ⅳ期、伴淋巴结浸润、低分化程度结直肠癌组患者血清miR-15b、miR-21和miR-31水平分别高于Ⅰ-Ⅱ期、不伴淋巴结浸润、中-高分化程度患者,miR-15b、miR-21和miR-31水平与临床TNM分期、伴淋巴结浸润呈正相关,与分化程度呈负相关。4种miRNA中诊断价值最高的指标是miR-15b,其敏感度和特异度分别为81.33%和91.80%(P <0.05);且miR-15b、miR-21和miR-31的组合panel具有更好的诊断价值,其敏感度和特异度分别为95.06%和94.44%(P <0.05)。结论 miR-15b、miR-16、miR-21和miR-31在结直肠癌患者外周血血清中异常表达,miR-15b、miR-21和miR-31水平与结直肠癌的发病及进展密切相关,且miR-15b、miR-21和miR-31组合panel具有作为结直肠癌的新型诊断模型的潜力。

三代和四代HIV酶免试剂对无偿献血和血清盘标本的检测结果对比分析

目的研究3代、4代2种HIV试剂对普通无偿献血标本和血清盘标本的检测结果,分析两者之间的差异性,为制定科学合理的筛查策略提供依据。方法使用3代、4代2种酶免试剂对2016—2017年本中心424 254份无偿献血人群标本和330份血清盘标本进行HIV检测。无偿献血标本中,无反应性和单试剂反应性标本再进行核酸检测,所有酶免初筛反应性标本进一步做确证实验。结果无偿献血标本中共检出486份HIV反应性标本(486/424 254, 0.11%),其中双试剂反应性87例,万泰单试剂反应性100例,伯乐单试剂反应性297例,核酸反应性3例。酶免初筛反应性标本中经确认有97例为阳性,占总献血人群0.02%,其中双试剂反应性84例,万泰单试剂反应性7例,伯乐单试剂反应性6例。227份血清盘标本中万泰和伯乐试剂反应性标本分别为147和166例,无反应性标本分别为80和61例,2种试剂的检测结果有统计学差异(P<0.05)。结论 3代和4代HIV试剂均具有较好的检测性能,4代试剂检出率略高于3代,但假阳性率较高,应制定合适的归队策略。

结核抗体检测试剂盒用血清标准品的制备及应用

目的结核抗体检测试剂盒质量控制用血清标准品的制备及应用。方法采集结核病患者和健康人血清,用ELISA法进行检测,制备血清标准品:包括10份检测结果为阳性的结核病患者血清、10份检测结果为阴性的健康人血清、1份检测结果为强阳性的结核病患者血清用健康人血清进行倍比稀释而成的5个稀释浓度;并对血清标准品进行稳定性试验;同时用本套血清标准品对不同厂家生产的结核抗体检测试剂盒以及同一厂家生产的不同批号的结核抗体检测试剂盒进行测定。结果本血清标准品具有良好的稳定性;不同厂家生产的结核抗体检测试剂盒质量不均一,同一厂家生产的试剂盒质量也不均一。结论本血清标准品可以用于结核抗体检测试剂盒的质量控制;各生产厂家要严格按照生产工艺的SOP进行生产,把好质量关。

再次肾移植患者术后PRA与血肌酐的研究

目的研究再次肾移植患者移植术后群体反应性抗体(PRA)与肾功能之间的关系。方法对35例目前能够追踪到的再次肾移植患者进行PRA和血肌酐的分析。PRA检测采用美国莱姆德公司抗原筛选板和美国GTI公司提供的ELISA筛选HLA-Ⅰ类、Ⅱ类混合抗原板,鉴定抗体类型采用采用美国Onelanmbda公司鉴定抗原板(LAT-1240)。血肌酐检测数据由检验科提供。结果35例再次肾移植术后患者中,PRA阴性/血肌酐水平正常17例(48.57%);PRA阴性/血肌酐水平≥130μmol/L 4例(11.44%)。PRA阳性/血肌酐正常8例(22.86%),其中抗HLA-Ⅰ类抗体阳性患者1例,其余为抗HLA-Ⅱ类抗体。PRA阳性/血肌酐水平≥130μmol/L6例(17.14%),其中抗HLA-Ⅰ+Ⅱ类抗体阳性3例,抗HLA-Ⅰ类抗体阳性1例,抗HLA-Ⅱ类抗体阳性2例。在3例抗HLA-Ⅰ+Ⅱ类抗体阳性中的血肌酐水平分别为740μmol/L、400μmol/L和131μmol/L。1例抗HLA-Ⅰ类抗体阳性的血肌酐水平为390μmol/L。2例抗HLA-Ⅱ类抗体阳性的血肌酐水平分别为194μmol/L和170μmol/L。结论再次肾移植患者中PRA阳性和阴性/血肌酐正常的肾移植患者多于PRA阴性和PRA阳性/血肌酐水平不正常的患者。抗HLA-Ⅱ类抗体对移植肾功能的影响小于抗HLA-1和Ⅰ+Ⅱ类抗体。

首批抗甘露聚糖肽血清国家参考品的研制

目的建立首批抗甘露聚糖肽血清国家参考品。方法制备冻干抗甘露聚糖肽血清候选国家参考品,组织3家实验室采用补体结合法协作标定其效价,并对其进行稳定性考察。结果抗甘露聚糖肽血清候选国家参考品的效价为1∶16,且具有较好的稳定性。结论该候选国家参考品符合国家参考品的各项要求,并已被国家有关部门批准正式使用。

肾移植术后PRA与移植肾功能长期预后关系的研究

目的研究肾移植术后患者群体反应性抗体(PRA)对移植肾功能长期预后的影响。方法研究对象为首都医科大学附属北京友谊医院1994年1月至2004年12月进行肾移植手术且在术后2周左右行PRA检测并获得随访患者224例。根据肾移植术后2周左右的PRA检测结果分为阴性组(195例)和阳性组(29例)。阴性组患者于2007年再次检测PRA,两组患者于近期(2013年10月至2014年4月)检测血清肌酐(Scr),了解肾功能情况。比较PRA阳性患者(含PRA复查阳性者)和PRA阴性患者的移植肾功能长期正常率。结果阳性组患者29例,2014年4月复查18例患者肾功能丧失(17例)或下降(1例),11例患者肾功能正常。阴性组患者195例,于2007年复查PRA阴性者153例,2014年4月复查肾功能正常患者148例,肾功能下降或丧失者5例;于2007年复查PRA阳性者42例,移植肾功能均不同程度下降或丧失。2004年前PRA阳性和2007年复查PRA阳性患者共71例,2014年4月复查肾功能正常患者11例,移植肾功能长期正常率为15.5%。PRA阴性患者153例,2014年4月复查肾功能正常患者148例,移植肾功能长期正常率为96.7%。PRA阳性患者和PRA阴性患者的移植肾长期存活率比较,差异有统计学意义(P<0.005)。结论肾移植术后产生PRA对移植肾长期预后有明显影响。

国产第4代人类免疫缺陷病毒化学发光试剂在血液筛查中的应用

目的通过与酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂对比,探讨国产第4代人类免疫缺陷病毒(HIV)化学发光(CLIA)试剂的检测性能及其在血液筛查中的应用价值。方法分别使用国产第3代ELISA试剂、进口第4代ELISA试剂、国产第3代和第4代CLIA试剂对330份血清盘标本进行HIV检测,对检测结果进行对比分析。结果ELISA试剂的批内精密度较好,而批间精密度不如CLIA试剂,第4代CLIA试剂的批内和批间精密度均好于第3代。2种第4代试剂的阳性符合率最高(98.68%),但阴性符合率最低(92.11%)。第4代CLIA试剂与其他3种试剂均具有极好的一致性(K>0.8),且检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2种ELISA试剂和第4代CLIA试剂均能检测出2个1∶800的强阳性稀释样本。所有试剂中第4代CLIA试剂的评价指标总体最好,检测灵敏度、特异度和准确度分别为100%、97.44%和99.12%。结论国产第4代CLIA试剂与其他3种试剂具有良好的一致性,且检测性能更加优秀,值得在血液筛查中推广使用。

HBV DNA聚合酶链反应测定质评血清盘的研制及其应用

目的 研制乙型肝炎病毒 (HBV)DNA聚合酶链反应 (PCR)测定室间质评用血清盘。方法 从血站献血员收集HBVDNA阴、阳性血浆。经处理后 ,组成血清盘。血清盘由 2 2份样本组成 ,包括 5份强阳性、2份弱阳性、5份阴性及 2个强阳性的 10倍稀释系列 (各 5份 )。并在全国 91个实验室进行应用。结果 稳定性试验表明 ,在室温、4℃及 37℃下贮存至少分别可稳定 5天、7天和 3天。反复冻融至 6次 ,HBVDNA量无明显变化。使用该血清盘对全国HBVDNAPCR测定的室间质评表明 ,对 5份阴性样本测定的假阳性率在 1.1%～ 9.9%之间 ;对强阳性样本测定假阴性率在 6 .6 %～ 14.3 %之间 ;对 2份弱阳性样本测定的假阴性率分别为 47.3 %和 41.8%。结论 目前全国HBVDNAPCR临床测定大部分实验室存在有不同程度的假阳性和 /或假阴性问题 ,有必要建立全国室间质评网络以提高检测质量和水平。

橡胶树胶乳C-乳清死皮相关蛋白的鉴定及分析

橡胶树死皮是影响天然橡胶产量的重要限制因子。通过双向凝胶电泳技术(2-DE)研究了橡胶死皮树与健康树胶乳C-乳清蛋白表达谱的差异。以软件分析后共获得31个差异表达的蛋白点,经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析后,搜索NCBInr数据库,结果有10个蛋白点被成功鉴定,其中6个为未知蛋白,其余4个蛋白分别为chain A,struc-ture of ubiquitin-like protein,Rub1;β-1,3-glucanase;AIR9 protein和flagellar inner dynein arm heav-y chain 11。这些蛋白可能在橡胶树死皮发生过程中扮演重要角色。

血尿酸水平与血脂异常关系的交叉滞后分析

目的研究血尿酸(serum uric acid,SUA)水平升高与血脂质之间的关系,为预防控制血脂异常和高尿酸血症提供依据。方法2017年4―7月在江苏省盐城市盐都区,采用多级分层随机抽样方法,对≥18岁常住居民进行基线调查,于2022年对该队列人群进行随访;采用交叉滞后模型,探讨SUA水平与血脂之间的关系,包括总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low⁃density lipoprotein cholesterol,LDL⁃C)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high⁃density lipoprotein cholesterol,HDL⁃C),并且针对性别进行分层分析,探究SUA水平与血脂异常的关系是否存在性别差异。结果共有1347名符合条件的对象纳入研究。基线TC到随访SUA的路径系数在一般人群(β=3.402,P=0.048)和男性(β=7.214,P=0.012)中差异均有统计学意义;基线SUA到随访TC的路径系数差异无统计学意义(P=0.958)。基线TG到随访SUA的路径系数在一般人群(β=2.357,P=0.011)和男性(β=3.425,P=0.011)中差异均有统计学意义;基线SUA到随访TG的路径系数差异无统计学意义(P=0.188)。基线SUA到随访HDL⁃C的路径系数在一般人群(β=0.002,P<0.001)、男性(β=0.001,P<0.001)和女性(β=0.003,P<0.001)中差异均有统计学意义;基线HDL⁃C到随访SUA的路径系数差异无统计学意义(P=0.461)。基线SUA到随访LDL⁃C的路径系数在一般人群(β=0.002,P<0.001)、男性(β=0.004,P<0.001)和女性(β=0.001,P=0.015)中差异均有统计学意义;基线LDL⁃C到随访SUA的路径系数差异无统计学意义(P=0.436)。结论SUA与血脂水平之间相互影响,TC、TG水平升高可能导致SUA水平升高,从而可能导致LDL⁃C水平升高和HDL⁃C水平降低。

风疹病毒(RV)IgM抗体质控盘的建立

目的:建立风疹病毒(RV)IgM抗体质控盘,质控盘包括风疹病毒抗体阳性血清P1～P5,抗体阴性血清N1～N10,以及用于评价试剂盒灵敏度的血清L1～L3。此质控盘为以酶联免疫法和化学发光法为原理的风疹病毒(RV)IgM诊断试剂盒的性能评价提供了可靠的质控物质。方法:通过试剂盒筛选出风疹病毒IgM的阳性和阴性血清,将5份不同来源的阳性血清作为质控盘的P1～P5,将10份不同来源的阴性血清作为质控盘的N1～N10,将5份阳性血清混合制成质控盘的L1～L3,之后,将建立的质控盘用不同的试剂盒进行验证。结果:不同的试剂盒对质控盘的验证表明成功地建立了风疹病毒(RV)IgM抗体质控盘。结论:本研究建立的质控盘,可用于以酶联免疫法和化学发光法等原理的风疹病毒(RV)IgM诊断试剂盒的性能评价。

HCV基因分型试剂盒评价血清盘的构建与应用

目的构建HCV基因分型试剂盒评价血清盘,对国内HCV基因分型试剂盒进行评价与应用,以评估我国HCV基因分型试剂盒的质量。方法收集全国不同省份、不同人群疑似HCV的样本,首先对样本进行筛查试验和病毒载量检测,选取样本的病毒载量大于1 000 IU/ml,再用测序法确定样本的HCV基因型,对确定基因型的样本进行分析,每个基因亚型选择2支,再加上2支病毒载量为阴性的样本,构建成1套HCV基因型试剂盒评价盘,分装并评价其稳定性,并利用评价盘对HCV基因分型试剂盒进行质量评估。结果 HCV NS5B区、CORE区测序基因型结果与血清盘参考预期结果的准确性均为100%(7/7);828份样本中共检测出7种基因亚型,分别为1a、1b、2a、3a、3b、6a、6n,未检测到其他罕见型别(4型、5型),综合考虑各方面因素,每个基因亚型选择2支样本再加上2支HCV阴性样本共16支样本,组成HCV基因型试剂盒评价盘;经反复冻融3次后检测基因型,其稳定性无影响;利用构建的HCV基因型评价盘对分型试剂盒进行评价,其基因型检出准确性为9/14,其中试剂盒检测范围之内的5种型别有1个样本未检测(3b),而对于检测范围之外的基因型(1a、6n),将基因型1a均错判为1b(2/2)。结论本实验室构建的HCV基因分型评价盘充分考虑了我国HCV基因型的流行情况及国内HCV基因分型试剂盒的检测范围,能够对国内HCV基因分型试剂盒的质量进行有效评价。

血清胃功能三项联合癌胚抗原和癌抗原72-4在胃癌早期筛查中的价值

目的探讨血清胃功能三项(血清胃泌素、胃蛋白酶1和胃蛋白酶2)联合癌胚抗原(CEA)及癌抗原72-4(CA72-4)检测在胃癌早期筛查中的应用价值。方法选取2019年9月至2020年12月间汉中市中心医院收治的具有上消化道症状的600例患者作为研究对象,对其进行内镜检查及病理学诊断,并以病理学诊断结果为金标准,将患者分为早期胃癌组(165例)及良性病变组(435例),并选取同期行健康检查的300名健康志愿者作为对照组,三组患者均接受血清胃功能三项及CEA、CA72-4检查,将检查结果进行综合对比。结果早期胃癌组的PGⅠ水平(65.23±3.25)ng/ml,低于良性病变组及对照组的(72.23±3.46)ng/ml及(104.45±4.47)ng/ml,差异均有统计学意义(P<0.05)。早期胃癌组的PGⅡ水平及胃泌素G-17水平分别为(22.23±3.23)ng/ml及(20.21±5.23)mmol/L,高于良性病变组的(19.56±2.67)ng/ml及(8.56±2.28)mmol/L与对照组的(15.45±2.24)ng/ml及(10.56±3.32)mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。早期胃癌组的CEA及CA72-4水平分别为(164.23±15.23)μg/L及(65.02±10.10)U/ml,高于良性病变组的(12.78±2.25)μg/L及(8.09±2.34)U/ml及对照组的(4.56±1.20)μg/L及(3.23±1.10)U/ml,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清胃功能三项联合CEA、CA72-4检测,对早期胃癌的诊断有着显著价值,可进一步提高疾病的早期诊断率,为疾病的早期治疗提供科学指导,以延长患者的生存周期。

免疫印迹法和TPPA在献血者梅毒确认方法中比较

目的:比较梅毒螺旋体免疫印迹试验(TP-WB)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)对酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)阳性标本的确认效果,探讨TP-WB在献血员梅毒抗体检测确认中价值。方法:1使用TP-ELISA和TPPA同时检测梅毒标准血清盘,WB结果采用NCCL提供的检测数据;2对无偿献血中TPELISA筛查可疑或阳性献血者标本,分别使用TPPA和WB法进行检测分析。结果:1血清盘40份标本,TPPA符合率92.5%,XCTP-ELISA符合率97.5%,WTTP-ELISA符合率95.0%。2227份TP-ELISA筛查阳性或可疑标本,TP-WB确证试验阳性率为0.64%(178/27 909),TPPA确证试验阳性率为0.44%(123/27 909),TPWB检出率明显高于TPPA(P<0.01)。结论:TP-WB在灵敏度和特异性上均明显优于TPPA,联合TP-ELISA更适用于对无偿献血者梅毒的筛查和确认。