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鼻咽癌高癌家系气虚质癌患者α-enolase的表达活性
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作者 刘湘 刘丹 +1 位作者 唐浩斌 陈舒华 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2023年第6期418-422,477,共6页
目的探讨高癌家系气虚质鼻咽癌初诊患癌组织中α-enolase的表达活性水平及其临床病理意义。方法分别收集高癌家系中气虚质鼻咽癌初诊患者、鼻咽黏膜慢性炎症患者各9例,非高癌家系气虚质鼻咽癌初诊患者12例的鼻咽黏膜组织,Real Time PCR... 目的探讨高癌家系气虚质鼻咽癌初诊患癌组织中α-enolase的表达活性水平及其临床病理意义。方法分别收集高癌家系中气虚质鼻咽癌初诊患者、鼻咽黏膜慢性炎症患者各9例,非高癌家系气虚质鼻咽癌初诊患者12例的鼻咽黏膜组织,Real Time PCR分别检测ENO1 mRNA表达活性,Western blotting检测ENO1蛋白表达水平,比较分析其组间差异及其临床病理意义。结果高癌家系组、非高癌家系气虚质鼻咽癌患者组、健康人鼻咽组织中ENO1 mRNA的△Ct分别为2.45±0.42,3.47±0.28,4.49±0.51;2^(-△△Ct)值分别为4.09±1.27,1.97±0.38,1.00±0.30;各组ENO1蛋白相对表达量依次为2.94±0.81、1.73±0.53、1.27±0.25;ENO1 mRNA及其蛋白表达水平组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论高癌家系气虚质初诊鼻咽癌患者ENO1 mRNA及蛋白表达水平的明显上调具有显著的临床病理意义,对高癌家系气虚质鼻咽癌患者早期筛查及诊断可能具有较好的临床应用价值。 展开更多
关键词 鼻咽癌 高癌家系 气虚质 α-enolase
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Regulation of enolase activation to promote neural protection and regeneration in spinal cord injury 被引量:4
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作者 Hannah MMcCoy Rachel Polcyn +1 位作者 Naren LBanik Azizul Haque 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第7期1457-1462,共6页
Spinal cord injury(SCI)is a debilitating condition characterized by damage to the spinal cord resulting in loss of function,mobility,and sensation with no U.S.Food and Drug Administration-approved cure.Enolase,a multi... Spinal cord injury(SCI)is a debilitating condition characterized by damage to the spinal cord resulting in loss of function,mobility,and sensation with no U.S.Food and Drug Administration-approved cure.Enolase,a multifunctional glycolytic enzyme upregulated after SCI,promotes pro-and anti-inflammatory events and regulates functional recovery in SCI.Enolase is normally expressed in the cytosol,but the expression is upregulated at the cell surface following cellular injury,promoting glial cell activation and signal transduction pathway activation.SCI-induced microglia activation triggers pro-inflammatory mediators at the injury site,activating other immune cells and metabolic events,i.e.,Rho-associated kinase,contributing to the neuroinflammation found in SCI.Enolase surface expression also activates cathepsin X,resulting in cleavage of the C-terminal end of neuron-specific enolase(NSE)and non-neuronal enolase(NNE).Fully functional enolase is necessary as NSE/NNE C-terminal proteins activate many neurotrophic processes,i.e.,the plasminogen activation system,phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase/protein kinase B,and mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase.Studies here suggest an enolase inhibitor,ENOblock,attenuates the activation of Rho-associated kinase,which may decrease glial cell activation and promote functional recovery following SCI.Also,ENOblock inhibits cathepsin X,which may help prevent the cleavage of the neurotrophic C-terminal protein allowing full plasminogen activation and phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase/mitogen-activated protein kinase activity.The combined NSE/cathepsin X inhibition may serve as a potential therapeutic strategy for preventing neuroinflammation/degeneration and promoting neural cell regeneration and recovery following SCI.The role of cell membrane-expressed enolase and associated metabolic events should be investigated to determine if the same strategies can be applied to other neurodegenerative diseases.Hence,this review discusses the importance of enolase activation and inhibition as a potential therapeutic target following SCI to promote neuronal survival and regeneration. 展开更多
关键词 cathepsin X ENOblock enolase GLIA mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase NEURODEGENERATION NEUROINFLAMMATION phosphatidylinositol-4 5-bisphosphate 3-kinase/protein kinase B Rho-associated protein kinase spinal cord injury
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微小牛蜱Enolase基因在昆虫细胞中的表达及鉴定 被引量:3
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作者 徐兴莉 杨虎 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期890-894,共5页
为对微小牛蜱烯醇酶(Enolase)基因进行真核表达及免疫反应原性分析,本研究采用RT-PCR方法扩增微小牛蜱Enolase基因的开放阅读框(ORF)序列,将其克隆至pFastBac1载体中构建重组质粒pFastBac1-Enolase,随后转化至大肠杆菌DH10Bac细胞中制... 为对微小牛蜱烯醇酶(Enolase)基因进行真核表达及免疫反应原性分析,本研究采用RT-PCR方法扩增微小牛蜱Enolase基因的开放阅读框(ORF)序列,将其克隆至pFastBac1载体中构建重组质粒pFastBac1-Enolase,随后转化至大肠杆菌DH10Bac细胞中制备了重组杆粒Bacmid-Enolase,转染至SF9细胞以获得重组Enolase蛋白。通过双酶切、PCR及测序鉴定显示Enolase基因正确插入。利用SDS-PAGE分析表达产物,结果显示目的蛋白大小约为48 ku。利用western blot对重组蛋白进行分析,结果表明目的蛋白能被微小牛蜱抗原免疫兔阳性血清识别,具有良好的免疫反应原性。凝血酶时间(TT)的测定结果显示,Enolase重组蛋白能显著延长TT,具有抗凝血活性。本研究首次采用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对微小牛蜱Enolase基因进行真核表达,并鉴定了重组蛋白的免疫反应原性,为开展Enolase免疫原性分析及功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 微小牛蜱 enolase 真核表达 昆虫细胞
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宫颈癌中α-enolase表达及其与HPV感染的关系 被引量:7
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作者 赵时梅 党裔武 +1 位作者 冯震博 罗殿中 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期522-525,共4页
目的探讨烯醇化酶-α(α-enolase)蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV感染的关系。方法应用免疫组化PV-9000两步法检测30例慢性宫颈炎、61例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和70例宫颈鳞癌组织中α-enolase蛋白... 目的探讨烯醇化酶-α(α-enolase)蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV感染的关系。方法应用免疫组化PV-9000两步法检测30例慢性宫颈炎、61例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和70例宫颈鳞癌组织中α-enolase蛋白的表达,同时应用基因芯片技术检测70例宫颈鳞癌中HPV感染情况。结果 (1)α-enolase蛋白表达于细胞质和(或)胞核中。在慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌中,α-enolase蛋白在胞质表达的阳性率分别为4.17%(1/24)、18.5%(10/54)和54.3%(38/70),表达依次增强(P=0.000)。(2)宫颈癌中HPV总感染率为97.1%(68/70),共检出8种HPV基因型,分别为HPV16、18、58、31、52、59、66、68,构成比为80.0%、14.3%、4.3%、4.3%、2.9%、2.9%、1.43%、1.43%。双重感染10例,占14.3%。HPV16、18为主要致病基因型。(3)宫颈癌中α-enolase蛋白表达的定位与HPV16/18感染呈正相关(r=0.340,P=0.012)。结论宫颈鳞癌中α-enolase蛋白表达与HPV16/18感染密切相关,二者在宫颈鳞癌的发生过程中可能起着协同作用。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 人类乳头状瘤病毒 α-enolase
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enolase-α蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 陈霜 张增峰 +1 位作者 罗殿中 冯震博 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第8期35-37,共3页
目的探讨烯醇化酶α(enolase-α)在人鼻咽癌(NPC)组织中的表达及其与NPC发生发展的关系。方法采用组织微阵列技术结合免疫组化法检测18例正常鼻咽黏膜组织、24例癌旁鼻咽上皮组织和90例NPC组织标本中enolase-α的表达,并分析其与临床参... 目的探讨烯醇化酶α(enolase-α)在人鼻咽癌(NPC)组织中的表达及其与NPC发生发展的关系。方法采用组织微阵列技术结合免疫组化法检测18例正常鼻咽黏膜组织、24例癌旁鼻咽上皮组织和90例NPC组织标本中enolase-α的表达,并分析其与临床参数的关系。结果enolase-α在正常鼻咽黏膜上皮、癌旁鼻咽上皮和NPC组织中的表达分别为94.4%、91.7%和52.2%,NPC组织表达enolase-α低于正常鼻咽黏膜上皮和癌旁鼻咽上皮(P<0.01)。enolase-α在NPC组织细胞核的表达水平低于正常鼻咽黏膜上皮和癌旁鼻咽上皮组织(P<0.01)。NPC患者中enolase-α表达与患者性别、组织学分类、淋巴结转移及临床TNM分期无关(P>0.05)。结论enolase-α蛋白表达下调与NPC的发生可能相关。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 烯醇化酶-α 微阵列分析 免疫组织化学
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α-enolase蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 朱礼昆 杨蔚琪 杨云 《云南医药》 CAS 2015年第3期259-262,共4页
目的探讨α-enolase蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与口腔鳞癌发生发展的关系。方法采用ELISA法对40例口腔鳞癌组织、10例口腔正常粘膜组织中α-enolase蛋白的表达情况进行检测。结果 1.口腔鳞状细胞癌组织中α-enolase蛋白表达... 目的探讨α-enolase蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与口腔鳞癌发生发展的关系。方法采用ELISA法对40例口腔鳞癌组织、10例口腔正常粘膜组织中α-enolase蛋白的表达情况进行检测。结果 1.口腔鳞状细胞癌组织中α-enolase蛋白表达明显高于正常粘膜组织(P<0.01)。2.α-enolase蛋白在低、中、高分化口腔鳞状细胞癌组织中的表达均有差异(P<0.05),差异具有统计学意义,高分化鳞癌的α-enolase浓度>中分化鳞癌>低分化鳞癌;3.有淋巴结转移、TNM分期为III+IV期者α-enolase的表达分别明显高于无淋巴结转移、TNM分期为I+II期者(P<0.05)。4.α-enolase在口腔鳞状细胞癌中的表达与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度密切相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别无关(P>0.05)。结论口腔鳞状细胞癌组织中α-enolase蛋白表达上调,α-enolase可能在口腔鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 α—enolase ELISA
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STAT-3与Enolase-1在乳腺癌组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 杨洁 叶双梅 +7 位作者 蒋学锋 马全富 阚淳一 杨丽兰 卢运萍 王世宣 马丁 吴明富 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1451-1455,共5页
目的探讨乳腺癌组织中信号转导及转录活化因子3(STAT-3)和糖酵解酶烯醇化酶(Enolase-1)的表达与雌孕激素受体、淋巴结转移、临床分期、病理分级等的关系。方法免疫组织化学SP法检测126例乳腺癌和26例乳腺良性病变组织中STAT-3与Enolase-... 目的探讨乳腺癌组织中信号转导及转录活化因子3(STAT-3)和糖酵解酶烯醇化酶(Enolase-1)的表达与雌孕激素受体、淋巴结转移、临床分期、病理分级等的关系。方法免疫组织化学SP法检测126例乳腺癌和26例乳腺良性病变组织中STAT-3与Enolase-1的表达情况,并分析他们与临床病理参数之间的关系。结果乳腺癌组织中STAT-3和Enolase-1的阳性表达率分别为82.5%和77.8%,明显高于乳腺良性病变组织(11.5%和7.7%),差异均有统计学意义(χ2=42.416,P<0.05;χ2=57.211,P<0.05);在有淋巴结转移的乳腺癌组织中阳性表达率分别为85.7%和90.5%,高于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(χ2=9.184,P<0.05;χ2=11.014,P<0.05)。相关分析表明STAT-3和Enolase-1的表达呈正相关。在雌激素受体阳性(ER+)和/或孕激素受体阳性(PR+)或表皮生长因子受体2阳性(HER-2+)乳腺癌组织中,有淋巴结转移组中STAT-3和Enolase-1的表达水平均明显高于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 STAT-3与Enolase-1的表达与乳腺癌的发生发展及侵袭转移相关,且二者有协同作用(r=0.379,P<0.05)。在ER+和(或)PR+或HER-2+乳腺癌组织中,STAT-3和Enolase-1的高表达与淋巴结转移相关。在高表达STAT-3的乳腺癌组织中Enolase-1表达也较高,其联合检测可作为判断乳腺癌恶性程度、评价预后及指导治疗的一项评估指标。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 淋巴结转移 STAT-3 enolase-1
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凡纳滨对虾烯醇酶基因Enolase的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 李文兰 高永华 +2 位作者 盛小伟 陈晓汉 熊建华 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期168-171,174,共5页
以生长性状分离的凡纳滨对虾家系的肌肉组织,构建凡纳滨对虾生长性状差减cDNA文库,斑点杂交筛选获得Enolase基因,克隆获得全长编码区序列。序列分析表明,序列包含1 305 bp的开放阅读框,推测编码的蛋白质含434个氨基酸,预测的分子量为47.... 以生长性状分离的凡纳滨对虾家系的肌肉组织,构建凡纳滨对虾生长性状差减cDNA文库,斑点杂交筛选获得Enolase基因,克隆获得全长编码区序列。序列分析表明,序列包含1 305 bp的开放阅读框,推测编码的蛋白质含434个氨基酸,预测的分子量为47.4 ku,等电点为5.67。通过荧光定量PCR法研究了Enolase基因在凡纳滨对虾的不同组织和不同生长期的肌肉组织中的表达情况,结果显示,Enolase基因在凡纳滨对虾的心脏、肝胰腺、肌肉、胃、肠、眼柄、鳃和血等组织或器官中都有表达;在肌肉组织中表达量最高,在肝胰腺中表达量最低;在日龄为125 d的对虾肌肉组织中表达量最高,在日龄为80 d的对虾肌肉组织中表达量最低。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 烯醇酶 抑制性差减杂交 荧光定量PCR
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α-enolase在宫颈癌中的表达及其意义 被引量:3
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作者 赵时梅 罗殿中 +1 位作者 党裔武 冯震博 《右江民族医学院学报》 2011年第6期749-752,共4页
目的探讨α-烯醇化酶(enolase)在宫颈癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学方法检测30例慢性宫颈炎、61例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和99例宫颈癌组织中α-enolase的表达。结果α-enolase蛋白在慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌中阳性表... 目的探讨α-烯醇化酶(enolase)在宫颈癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学方法检测30例慢性宫颈炎、61例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和99例宫颈癌组织中α-enolase的表达。结果α-enolase蛋白在慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌中阳性表达逐渐增强(P=0.000);蛋白定位则由胞质胞核逐渐转移至胞质(P=0.000)。宫颈癌中,α-enolase蛋白表达与患者年龄、肿瘤分级、淋巴结转移无关(P>0.05),与组织学分型有关(P=0.020);α-enolase蛋白定位与患者年龄、有无淋巴结转移及组织学分型无关(P>0.05),与肿瘤分级有关。α-enolase蛋白随肿瘤级别的增加而趋向出现在胞质中(P=0.019)。结论α-enolase蛋白的异常表达可能与宫颈癌的发生有关,有望成为宫颈组织早期癌变的有用标记物。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤样病变 烯醇化酶 免疫组织化学
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表面蛋白烯醇化酶Enolase在S.suis 2感染中的角色 被引量:2
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作者 孙雯 潘秀珍 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2010年第3期45-48,共4页
目的通过克隆表达,在获得具有酶活性的猪链球菌2型(S.suis2)05ZYH33重组烯醇化酶Enolase蛋白的基础上,旨在继续探索其在细菌粘附和引发免疫下调作用中的角色。方法流式细胞术(FCM)、Hep2细胞粘附竞争试验、免疫空斑试验。结果流式细胞术... 目的通过克隆表达,在获得具有酶活性的猪链球菌2型(S.suis2)05ZYH33重组烯醇化酶Enolase蛋白的基础上,旨在继续探索其在细菌粘附和引发免疫下调作用中的角色。方法流式细胞术(FCM)、Hep2细胞粘附竞争试验、免疫空斑试验。结果流式细胞术FCM的细胞定位显示Enolase可以部分存在S.suis205ZYH33细菌的表面;Hep2细胞粘附竞争试验表明猪链球菌表面Enolase参与细菌对宿主细胞的黏附作用;免疫空斑实验的结果揭示Enolase在抑制宿主特异性免疫应答中发挥作用。结论 Enolase作为一个表面蛋白,确实在S.suis2感染中扮演一定的角色。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 烯醇化酶enolase 流式细胞术 黏附 溶血空斑形成实验
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α-enolase在大肠癌与癌旁组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 王庭利 刘百歌 +4 位作者 王玲玲 赵海丰 何成彦 刘宁 郭宏华 《中国实验诊断学》 2013年第6期1014-1016,共3页
目的观察α-enolase在大肠癌中的表达情况及意义,探讨其与大肠癌发生发展及转移的关系。方法采用液质联用技术对18例大肠癌患者的癌组织和癌旁组织进行蛋白质谱的检测、鉴定和分析,并通过免疫蛋白印迹实验进一步确证。结果α-enolase在... 目的观察α-enolase在大肠癌中的表达情况及意义,探讨其与大肠癌发生发展及转移的关系。方法采用液质联用技术对18例大肠癌患者的癌组织和癌旁组织进行蛋白质谱的检测、鉴定和分析,并通过免疫蛋白印迹实验进一步确证。结果α-enolase在大肠癌组织中表达高于癌旁正常组织。结论高表达的α-enolase可能与大肠癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 α-烯醇化酶 大肠癌 液质联用技术 免疫蛋白印迹
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人ENO1(Enolase-α)基因的原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备
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作者 王玉凤 幺坤 +1 位作者 关泉林 祝秉东 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第11期2538-2542,共5页
目的:构建人ENO1(human Enolase-α)基因的原核表达质粒,诱导重组蛋白的表达,利用纯化后的蛋白制备具有活性的ENO1多克隆抗体。方法:用PCR方法从胃癌MKN45细胞全基因组中扩增出目的基因ENO1,将目的基因和原核表达载体pET30a(+)分别双酶... 目的:构建人ENO1(human Enolase-α)基因的原核表达质粒,诱导重组蛋白的表达,利用纯化后的蛋白制备具有活性的ENO1多克隆抗体。方法:用PCR方法从胃癌MKN45细胞全基因组中扩增出目的基因ENO1,将目的基因和原核表达载体pET30a(+)分别双酶切,回收酶切产物并用T4连接酶连接,获得重组质粒pET30a(+)-ENO1。将重组质粒转入大肠埃希菌菌株BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni-NTA亲和层析柱纯化,利用纯化的ENO1活性蛋白作为抗原免疫家兔,制备抗血清多克隆抗体,并用Western blot检测其特异性。结果:目的基因与原核表达载体经双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符,测序结果表明重组人ENO1基因序列与NCBI(NM_001428.3)公布序列一致。经SDS-PAGE分析,结果显示重组蛋白的分子量约在47kDa,条带单一,无杂带出现,主要以可溶性形式存在。Western blot证实多克隆抗体制备成功。结论:成功表达、纯化了ENO1融合蛋白,制备了具有高特异性的多克隆抗体,为进一步肿瘤疫苗的研制和肿瘤标志物快速诊断的研究奠定基础。 展开更多
关键词 烯醇化酶-α 原核表达 纯化 多克隆抗体
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牛环形泰勒虫enolase基因的原核表达及生物信息学分析 被引量:3
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作者 郑会珍 普浩 +5 位作者 缪荣浩 甘露 葛晓敏 巴音查汗 李永畅 郭庆勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第10期3972-3981,共10页
【目的】获得牛环形泰勒虫(Theileria annulata)新疆株enolase基因,并分析其生物学特性及反应原性。【方法】对牛环形泰勒虫enolase基因进行扩增和克隆,构建原核表达载体pGEX-4T-1-enolase,诱导表达enolase重组蛋白并进行蛋白纯化,通过W... 【目的】获得牛环形泰勒虫(Theileria annulata)新疆株enolase基因,并分析其生物学特性及反应原性。【方法】对牛环形泰勒虫enolase基因进行扩增和克隆,构建原核表达载体pGEX-4T-1-enolase,诱导表达enolase重组蛋白并进行蛋白纯化,通过Western blotting验证enolase重组蛋白反应原性。利用生物信息学方法对enolase基因编码蛋白的理化性质、亲疏水性、跨膜区、信号肽、磷酸化、亚细胞定位及蛋白互作网络进行预测分析。【结果】PCR扩增出大小为1248 bp的牛环形泰勒虫enolase基因片段,enolase重组蛋白大小约70 ku;Western blotting结果表明,该重组蛋白与牛环形泰勒虫阳性血清发生反应。enolase基因编码416个氨基酸,理论等电点为5.91,有38个磷酸化位点;二级结构主要由α-螺旋(43.03%)和无规则卷曲(33.17%)组成;具有17个B细胞抗原表位,亚细胞定位主要位于细胞质中;enolase蛋白与磷酸甘油酸变位酶(PGAM)、二磷酸核苷激酶(NDK)、磷酸甘油酸激酶(PGK)、热休克蛋白70(HSP70)存在相互作用。【结论】本试验成功克隆出新疆牛环形泰勒虫enolase基因,蛋白互作网络预测其与糖酵解和能量代谢相关的蛋白相互作用。研究结果为牛环形泰勒虫能量代谢途径基因的相关研究奠定基础。 展开更多
关键词 牛环形泰勒虫 enolase基因 重组蛋白 生物学特性
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Enolase在鸭疫里默氏杆菌侵袭鸭脑微血管内皮细胞中的作用 被引量:2
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作者 邹荣华 吴晓妮 +4 位作者 陈启伟 宫晓炜 王燕萍 郑福英 储岳峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期4389-4397,共9页
旨在明确鸭疫里默氏杆菌烯醇化酶(Enolase)在其侵袭鸭脑微血管内皮细胞(DBMEC)以及血脑屏障(BBB)中的作用。本研究以鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株为亲本株,利用同源重组和结合转移的方法构建enolase基因缺失株ΔEnolase和回复株cΔEnolase,... 旨在明确鸭疫里默氏杆菌烯醇化酶(Enolase)在其侵袭鸭脑微血管内皮细胞(DBMEC)以及血脑屏障(BBB)中的作用。本研究以鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株为亲本株,利用同源重组和结合转移的方法构建enolase基因缺失株ΔEnolase和回复株cΔEnolase,并测定RA-LZ01、ΔEnolase和cΔEnolase对DBMEC黏附和侵袭能力的差异;用上述菌株感染雏鸭,测定雏鸭血液和脑组织中的载菌量。结果表明,与亲本株RA-LZ01相比,缺失株ΔEnolase对DBMEC的黏附率和入侵率均极显著降低;回复株cΔEnolase恢复了对DBMEC的黏附和入侵能力。感染RA-LZ01、ΔEnolase和cΔEnolase菌株的雏鸭的血液载菌量无显著差异;与感染RA-LZ01和cΔEnolase菌株的雏鸭相比,感染ΔEnolase菌株的雏鸭脑组织中的载菌量极显著降低。以上结果说明,Enolase与鸭疫里默氏杆菌黏附和入侵DBMEC以及入侵雏鸭脑组织显著相关,可能为介导鸭疫里默氏杆菌突破鸭血脑屏障的毒力因子。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 enolase 鸭脑微血管内皮细胞 血脑屏障
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Neuron specific enolase,p53蛋白和proliferating-cell nuclear antigen在肺癌组织中的表达及意义
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作者 刘茜 苏勤 刘节 《第四军医大学学报》 1999年第3期246-248,共3页
目的:研究神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)的表达,与p53蛋白和增殖细胞核抗原(prolif-erating-cellnuclearantigen,PCNA)表达的关系及意义.方法:用特异性鼠抗人单克隆抗体,按LSAB免疫组织化学方法检测石... 目的:研究神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)的表达,与p53蛋白和增殖细胞核抗原(prolif-erating-cellnuclearantigen,PCNA)表达的关系及意义.方法:用特异性鼠抗人单克隆抗体,按LSAB免疫组织化学方法检测石蜡包埋的肺癌标本中NSE,p53蛋白和PCNA的表达.结果:在小细胞性肺癌(SmallCellLungCancer,SCLC)中,NSE阳性表达者,PCNA标记指数(LabellingIndex,LI)高于NSE阴性者,而p53蛋白的表达与NSE的表达无关.在非小细胞性肺癌(non-smallcelllungcancr,non-SCLC)中,p53蛋白的表达和PCNALI均与NSE的表达无关.结论:在SCLC的发生及发展过程中,神经内分泌功能可能起了部分作用.而p53抑癌基因在SCLC的发生中并不起着重要的作用. 展开更多
关键词 肺肿瘤 NSE P53蛋白 PCNA 免疫组织化学
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RNA干扰enolase-1基因治疗胃癌的实验研究 被引量:3
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作者 刘靖 鲍依稀 +2 位作者 刘明学 祝绚 李进 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期455-458,462,共5页
目的:探讨RNA干扰enolase-1基因对人胃癌的治疗作用。方法:根据enolase-1mRNA序列构建表达enolase-1特异的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达质粒pMSCVU6/ENO-1si1,pMSCVU6/ENO-1si2,pMSCVU6/ENO-1si3。种植人胃癌SGC-790... 目的:探讨RNA干扰enolase-1基因对人胃癌的治疗作用。方法:根据enolase-1mRNA序列构建表达enolase-1特异的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达质粒pMSCVU6/ENO-1si1,pMSCVU6/ENO-1si2,pMSCVU6/ENO-1si3。种植人胃癌SGC-7901细胞于裸鼠皮下建立裸鼠肿瘤模型。将构建成功的三种siRNA质粒分别转染SGC-7901细胞株,pMSCVU6/ENO-1si2和pMSCVU6/ENO-1si3转染裸鼠瘤体内。MTT法检测SGC-7901细胞增殖状况;测量荷瘤裸鼠的肿瘤体积,计算抑瘤率;RT-PCR检测SGC-7901细胞enolase-1mRNA表达;分别以免疫组化SP法和Western blot检测体内外enolase-1蛋白表达。结果:SGC-7901细胞株及裸鼠瘤体均被所采用的质粒成功转染。SGC-7901细胞受pMSCVU6/ENO-1si2转染后,其生长活性受到明显抑制(P<0.01),enolase-1mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01)。体内抑瘤实验表明,pMSCVU6/ENO-1si2组平均瘤体积为(380±26)mm3,pMSCVU6/ENO-1si3组与空白对照组分别为(993±124)mm3和(1102±131)mm3;pMSCVU6/ENO-1si2组抑瘤率为65.52%,pMSCVU6/ENO-1si3组为9.89%;pMSCVU6/ENO-1si2组肿瘤体积明显小于pMSCVU6/ENO-1si3组和空白对照组,差异具有显著性(P<0.01);pMSCVU6/ENO-1si3组和空白对照组之间肿瘤体积无显著差异(P>0.05);pM-SCVU6/ENO-1si2组与pMSCVU6/ENO-1si3组和空白对照组相比,enolase-1蛋白表达减弱。结论:表达siRNA的enolase-1基因特异的真核表达质粒能成功转染体内、外胃癌细胞,其中pMSCVU6/ENO-1si2可有效抑制人胃癌细胞的生长。 展开更多
关键词 enolase-1 RNA干扰 胃癌 基因治疗
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家蚕微孢子虫烯醇化酶(Enolase)基因的克隆及序列分析与原核表达 被引量:2
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作者 彭祥然 李孝良 +6 位作者 陈功 戴卫江 李楠 王玮 唐旭东 徐莉 沈中元 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1035-1040,共6页
烯醇化酶(enolase,ENO)是糖酵解途径的限速酶,对家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)烯醇化酶的研究有助于了解微孢子虫的能量代谢机制。依据微孢子虫基因组数据库中的家蚕微孢子虫烯醇化酶编码序列设计引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模... 烯醇化酶(enolase,ENO)是糖酵解途径的限速酶,对家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)烯醇化酶的研究有助于了解微孢子虫的能量代谢机制。依据微孢子虫基因组数据库中的家蚕微孢子虫烯醇化酶编码序列设计引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得家蚕微孢子虫烯醇化酶基因(Nb ENO)。该基因ORF全长1 242 bp,编码413个氨基酸,预测蛋白质分子质量46.323 k D,等电点6.13;蛋白质二级结构主要由α螺旋(28.33%)、延伸片段(22.52%)和无规则卷曲(49.15%)组成,含有25个磷酸化位点和1个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构域。系统进化树分析Nb ENO与蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)烯醇化酶基因序列(Nc ENO)的亲缘关系较近,序列比对显示二者的一致性为62.10%。将Nb ENO基因插入原核表达载体p ET-28a并转化大肠埃希菌Rosatta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后获得预期大小约50 k D的重组Nb ENO蛋白,有利于进一步研究Nb ENO的功能及亚细胞定位。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 烯醇化酶 基因克隆 序列分析 原核表达
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α-Enolase抑制人泡沫病毒反式激活因子Bell介导的反式激活作用 被引量:1
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作者 吴亚锋 张其程 +3 位作者 李哲 汤书兵 许丰雯 陈启民 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期86-91,共6页
泡沫病毒能在宿主细胞内长期潜伏感染,且不伴随任何病理现象.为了阐明这一病毒潜伏感染机制,关键要研究病毒与其宿主之间的相互影响,尤其是宿主对病毒基因转录水平的影响.Bel1是人泡沫病毒的反式激活因子,它能够激活该病毒LTR和IP两个... 泡沫病毒能在宿主细胞内长期潜伏感染,且不伴随任何病理现象.为了阐明这一病毒潜伏感染机制,关键要研究病毒与其宿主之间的相互影响,尤其是宿主对病毒基因转录水平的影响.Bel1是人泡沫病毒的反式激活因子,它能够激活该病毒LTR和IP两个转录启动子.该研究利用酵母双杂交技术筛选到Bel1的相互作用蛋白α-Enolase,并用免疫共沉淀技术确定了这两个蛋白的结合涉及α-Enolase的243~372位氨基酸及Bel1的223~275位氨基酸.细胞转染实验发现α-Enolase蛋白能够抑制Bel1介导的反式激活作用. 展开更多
关键词 人泡沫病毒 人泡沫病毒反式激活因子 α-enolase
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Implications of enolase in the RANKL-mediated osteoclast activity following spinal cord injury 被引量:3
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作者 RAMSHA SHAMS NAREN LBANIK AZIZUL HAQUE 《BIOCELL》 SCIE 2021年第6期1453-1457,共5页
Spinal Cord Injury(SCI)is a debilitating condition characterized by damage to the spinal cord,resulting in loss of function,mobility,and sensation.Although increasingly prevalent in the US,no FDA-approved therapy exis... Spinal Cord Injury(SCI)is a debilitating condition characterized by damage to the spinal cord,resulting in loss of function,mobility,and sensation.Although increasingly prevalent in the US,no FDA-approved therapy exists due to the unfortunate complexity of the condition,and the difficulties of SCI may be furthered by the development of SCI-related complications,such as osteoporosis.SCI demonstrates two crucial stages for consideration:the primary stage and the secondary stage.While the primary stage is suggested to be immediate and irreversible,the secondary stage is proposed as a promising window of opportunity for therapeutic intervention.Enolase,a metabolic enzyme upregulated after SCI,performs non-glycolytic functions,promoting inflammatory events via extracellular degradative actions and increased production of inflammatory cytokines and chemokines.Neuron-specific enolase(NSE)serves as a biomarker of functional damage to neurons following SCI,and the inhibition of NSE has been demonstrated to reduce signs of secondary injury of SCI and to ameliorate dysfunction.This Viewpoint article involves enolase activation in the regulation of RANK-RANKL pathway and summarizes succinctly the mechanisms influencing osteoclast-mediated resorption of bone in SCI.Our laboratory proposes that inhibition of enolase activation may reduce SCI-induced inflammatory response and decrease osteoclast activity,limiting the chances of skeletal tissue loss in SCI. 展开更多
关键词 enolase RANK RANKL OSTEOPOROSIS Neuronal death Spinal cord injury
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Neuron-specific enolase expression in a rat model of radiation-induced brain injury following vascular endothelial growth factor-modified neural stem cell transplantation 被引量:1
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作者 Songhua Xiao Chaohui Duan +4 位作者 Qingyu Shen Yigang Xing Ying Peng Enxiang Tao Jun Liu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2009年第10期739-743,共5页
BACKGROUND: Previous studies have shown that transplantation of vascular endothelial growth factor (VEGF)-modified neural stem cells (NSC) provides better outcomes, compared with neural stem cells, in the treatme... BACKGROUND: Previous studies have shown that transplantation of vascular endothelial growth factor (VEGF)-modified neural stem cells (NSC) provides better outcomes, compared with neural stem cells, in the treatment of brain damage. OBJECTIVE: To compare the effects of VEGF-modified NSC transplantation and NSC transplantation on radiation-induced brain injury, and to determine neuron-specific enolase (NSE) expression in the brain. DESIGN, TIME, AND SETTING: The randomized, controlled study was performed at the Linbaixin Experimental Center, Second Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University, China from November 2007 to October 2008. MATERIALS: VEGF-modified C17.2 NSCs were supplied by Harvard Medical School, USA. Streptavidin-biotin-peroxidase-complex kit (Boster, China) and 5, 6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (Fluka, USA) were used in this study. METHODS: A total of 84 Sprague Dawley rats were randomly assigned to a blank control group (n = 20), model group (n = 20), NSC group (n = 20), and a VEGF-modified NSC group (n = 24). Rat models of radiation-induced brain injury were established in the model, NSC, and VEGF-modified NSC groups. At 1 week following model induction, 10 pL (5 ×10^4 cells/μL) VEGF-modified NSCs or NSCs were respectively infused into the striatum and cerebral cortex of rats from the VEGF-modified NSC and NSC groups. A total of 10μL saline was injected into rats from the blank control and model groups. MAIN OUTCOME MEASURES: NSE expression in the brain was detected by immunohistochemistry following VEGF-modified NSC transplantation. RESULTS: NSE expression was significantly decreased in the brains of radiation-induced brain injury rats (P 〈 0.05). The number of NSE-positive neurons significantly increased in the NSC and VEGF-modified NSC groups, compared with the model group (P 〈 0.05). NSE expression significantly increased in the VEGF-modified NSC group, compared with the NSC group, at 6 weeks following transplantation (P 〈 0.05). CONCLUSION: VEGF-modified NSC transplantation increased NSE expression in rats with radiation-induced brain injury, and the outcomes were superior to NSC transplantation. 展开更多
关键词 vascular endothelial growth factor neuron-specific enolase neural stem cells radiation-induced brain injury
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