二烯丙基二硫通过磷酸化Chk1负调控Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路阻滞白血病K562细胞G_(2)/M期

目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病K562细胞周期阻滞及其分子机制。方法:采用CCK-8、细胞计数及流式细胞术观察DADS对K562细胞增殖与周期阻滞效应。Western Blot检测DADS对K562细胞PCNA、Chk1/2以及下游分子Cdc25C、CyclinB1与CDK1表达的影响。结果:CCK-8检测显示,15μmol/L、30μmol/L、60μmol/L、120μmol/L、240μmol/L DADS处理后,呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖,抑制率分别为32.48%、59.34%、66.42%、77.06%、81.05%(P<0.05)。对照组与Tween80组无抑制作用(P>0.05)。细胞计数结果显示,30μmol/L、60μmol/L与120μmol/L DADS处理K562细胞后,群体倍增时间分别为22.71±0.29、36.69±0.93与73.02±0.87呈浓度依赖性增加(P<0.05),而Tween80组与对照组无明显差异(P>0.05)。流式细胞术检测显示,60μmol/L与120μmol/L DADS作用K562细胞24 h与48 h后,G_(2)/M期百分率分别增加到17.6%与28.5%和18.6%与34.4%,较对照组有显著性差异(P<0.05)。60μmol/L DADS作用K562细胞1 h、2 h、4 h、8 h和24 h后,PCNA表达呈时间依赖性表达下调(P<0.05)。p-Chk1表达呈时间依赖性上调(P<0.05),而Chk1、Chk2与p-Chk2表达无明显差异(P>0.05)。并且,Cdc25C、CyclinB1和CDK1分别呈时间依赖性下调(P<0.05),但是,14-3-3蛋白无明显改变(P>0.05)。结论:DADS可磷酸化Chk1通过Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路抑制K562细胞增殖与阻滞G_(2)/M期。

CDC25C表达下调的黑色素瘤细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡情况观察

目的探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响。方法取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组。转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢病毒空质粒,空白对照组正常培养。利用Rhod-2/AM与MitoSOX荧光探针检测细胞线粒体内Ca^(2+)浓度及线粒体活性氧(ROS),RT-qPCR法和Western blotting法分别检测细胞线粒体应激反应相关分子ClpP、LONP1及线粒体途径凋亡相关分子Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果与转染对照组和空白对照组相比,转染组细胞线粒体Ca^(2+)及ROS含量增加,ClpP、LONP1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或<0.01)。结论CDC25C表达下调激活黑色素瘤B16细胞发生线粒体应激反应,并诱导线粒体途径的细胞凋亡。

金尾矿粉对C25混凝土力学性能及微观结构影响试验研究

为研究金尾矿粉取代水泥对低强混凝土力学性能的影响,通过金尾矿粉等质量取代0~30%水泥,研究其对C25混凝土凝结时间以及力学性能的影响,并采用扫描电镜(SEM)和X射线衍射仪(XRD)等手段表征硬化浆体的水化产物、微观形貌。结果表明,金尾矿粉作为辅助胶凝材料能延长C25混凝土的凝结时间,金尾矿粉掺量在30%范围内,坍落度和凝结时间均可满足普通硅酸盐水泥标准要求。C25混凝土的抗压强度、轴心抗压强度、静弹性模量,均随着金尾矿粉掺量的增加,呈现出先增加后降低的趋势,在掺量5%时出现峰值。随着养护龄期的增加,金尾矿粉颗粒表面被水化产物覆盖,结构紧密孔隙较少,表现出良好的力学性能。但随着金尾矿粉替代率的增加,水化产物减少微观结构松散,力学性能降低。

C25自密实混凝土在隧道工程中的应用探究

本文依托湖南高速公路隧道工程应用C25自密实混凝土的施工实践,采用现场实验、检测等方法,对其工作性能、早期强度、硬化强度等进行了分析研究。本文所提出的C25自密实混凝土的坍落扩展度(SF)、扩展时间(T500)等控制性指标满足规范和施工要求;24h强度大于规定拆模强度;28d抗压强度符合设计要求。同时进一步对比研究了C25自密实混凝土的技术效益,表明C25自密实混凝土在隧道工程中的应用更符合“技术先进、低碳环保”理念,且直接材料成本降低了0.3%。

妊娠期糖尿病患者血清Xenin-25、CTRP12水平及对妊娠结局的影响

目的分析妊娠期糖尿病(GDM)患者血清神经降压素相关肽(Xenin-25)、C1q肿瘤坏死因子相关蛋白12(CTRP12)与妊娠结局的关系。方法选取2021年2月—2022年2月川北医学院附属医院生殖医学科诊治的GDM患者92例为GDM组,再根据是否发生不良妊娠结局,分为预后不良亚组(n=34)和预后良好亚组(n=58)。以同期健康妊娠妇女50例为正常妊娠组。采用酶联免疫吸附法检测血清Xenin-25、CTRP12水平;Pearson相关性分析血清Xenin-25、CTRP12与糖代谢指标的相关性;多因素Logistic回归分析影响GDM患者不良妊娠结局的因素;受试者工作特征曲线评价血清Xenin-25、CTRP12对妊娠结局的预测价值。结果GDM组血清Xenin-25、CTRP12低于正常妊娠组,而空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、空腹胰岛素(FINS)及稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均高于正常妊娠组(t/P=16.046/<0.001,22.114/<0.001,11.510/<0.001,13.666/<0.001,12.101/<0.001,14.413/<0.001);GDM组血清Xenin-25、CTRP12表达与FPG、FINS、HbA_(1c)及HOMA-IR呈显著负相关(Xenin-25:r/P=-0.665/<0.001,-0.598/<0.001,-0.567/<0.001,-0.702/<0.001;CTRP12:r/P=-0.579/<0.001,-0.622/<0.001,-0.667/<0.001,-0.725/<0.001);预后不良亚组血清Xenin-25、CTRP12低于预后良好亚组,HOMA-IR高于预后良好亚组(t/P=6.783/<0.001,17.997/<0.001,15.146/<0.001);血清CTRP12升高、Xenin-25升高是影响GDM患者不良妊娠结局的独立保护因素[OR(95%CI)=0.646(0.499~0.837),0.619(0.465~0.824)],HOMA-IR升高是危险因素[OR(95%CI)=1.353(1.110~1.649)]。血清Xenin-25、CTRP12及二者联合预测GDM患者不良妊娠结局的AUC分别为0.828、0.815、0.870,二者联合优于各自单独预测效能(Z=4.113、4.327,P=0.003、0.001)。结论GDM孕妇血清Xenin-25、CTRP12水平降低,均参与GDM的疾病过程,二者联合对GDM患者不良妊娠结局具有较高的评估价值。

人GST-Cdc25C融合蛋白的原核表达、纯化及功能初步检测

目的:构建人Cdc25C基因原核表达载体,获得纯化的GST-Cdc25C融合蛋白,并对其功能进行初步检测。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增Cdc25C基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体,重组质粒转化大肠杆菌Ros-sate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot方法检测融合蛋白表达,通过GSTpull-down技术检测纯化蛋白与已知结合蛋白Chk2的相互作用。结果:构建得到Cdc25C基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;在Rossate菌中诱导表达出相对分子质量(Mr)约为80 000的目的蛋白,经SDS-PAGE和Western blot检测,融合蛋白成功表达,并纯化得到GST-Cdc25C融合蛋白,GST pull-down检测证实GST-Cdc25C蛋白可以和已知相互作用蛋白Chk2相互作用。结论:成功克隆Cdc25C基因,并获得了活性良好的GST-Cdc25C蛋白,为进一步研究细胞周期蛋白调控机制奠定了实验基础。

Cdc25 Ccyclin B1在二烯丙基二硫化物诱导人胃癌BGC823细胞G_2/M期阻滞中的作用

目的:研究二烯丙基二硫化物(DADS)对人胃癌BGC823细胞的增殖及细胞周期的影响以及Cdc25C、cyclin B1的作用。方法:采用MTT法检测BGC823细胞的生长活性;流式细胞术分析DADS对细胞周期分布的影响;Western blot观察DADS对Cdc25C蛋白、cyclin B1蛋白表达的影响。结果:MTT比色实验结果显示,DADS对人胃癌细胞具有明显的生长抑制作用,且呈显著的剂量-效应依赖关系(P<0.05)。流式细胞分析发现,DADS作用12h时,G2/M期细胞增加到30.1%;24h时增加到58.1%;36h达50.2%(P<0.05)。Western blot结果表明,DADS呈时间依赖性抑制人胃癌BGC823细胞周期Cdc25C磷酸酶的表达,cyclinB1表达在DADS处理24h后开始下降(P<0.05)。结论:DADS可抑制人胃癌BGC823细胞增殖,其增殖抑制与细胞周期G2/M期阻滞有关;DADS可能是通过抑制Cdc25C、cyclinB1表达使部分BGC823细胞停滞在G2/M期。

25-羟维生素D_(3)、胱抑素C与白细胞介素-6在早期糖尿病肾病中的诊断价值

目的:探讨血清25-羟维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]、胱抑素C(Cys C)、白细胞介素-6(IL-6)在早期糖尿病肾病(DN)诊断中的价值。方法:从2022年1月—2023年1月上饶市立医院收治的糖尿病患者中选取90例为糖尿病组,将患者按照病情分为正常白蛋白尿组(n=30)、早期肾病组(n=30)、临床肾病组(n=30),并将在本院同期接受健康体检的人员中选取30例健康志愿者作为对照组。抽取所有患者的静脉血进行25-(OH)D_(3)、Cys C、IL-6水平的检测,对比糖尿病组与对照组25-(OH)D_(3)、Cys C、IL-6的差异,分析糖尿病不同发展阶段25-(OH)D_(3)、Cys C、IL-6的差异,并分析25-(OH)D_(3)、Cys C、IL-6单项检测和联合检测在早期DN诊断中的价值。结果:糖尿病组25-(OH)D_(3)低于对照组,Cys C、IL-6均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常白蛋白尿组25-(OH)D_(3)高于早期肾病组、临床肾病组,Cys C、IL-6均低于早期肾病组、临床肾病组,差异均有统计学意义(P<0.05);早期肾病组25-(OH)D_(3)高于临床肾病组,Cys C、IL-6均低于临床肾病组,差异均有统计学意义(P<0.05)。25-(OH)D_(3)诊断早期DN的敏感度为75.00%(45/60)、特异度为81.67%(49/60);Cys C诊断早期DN的敏感度为83.33%(50/60)、特异度为85.00%(51/60);IL-6在早期DN诊断中的敏感度为85.00%(51/60)、特异度为61.67%(37/60);各指标联合诊断早期DN的敏感度为96.67%(58/60),特异度为93.33%(56/60)。结论:25-(OH)D_(3)、Cys C、IL-6检测对早期DN诊断有极高的价值,可评价患者肾功能损伤情况,有助于患者及早接受干预,控制疾病的进展以获得相对更好的临床结局。

CDC25C基因在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)基因在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达水平及其临床意义。方法选取手术切除并经病理证实的肾透明细胞癌及相应的癌旁标本45对,通过荧光定量PCR方法对45对ccRCC患者癌组织和癌旁正常组织的CDC25C mR-NA进行分析;运用免疫组化法对45对配对的癌组织和癌旁正常组织切片进行染色,检测CDC25C蛋白的表达;运用统计学方法分析CDC25C的表达量和患者的临床特点之间的关系。结果荧光定量PCR结果显示肾癌组织中CDC25C表达水平高于癌旁正常组织(P<0.01);对癌组织及癌旁正常组织切片免疫组化显示,癌组织CDC25C蛋白表达水平高于癌旁正常组织(P<0.01);同时发现CDC25C的表达水平与性别、年龄、肿瘤直径、TNM分期无关,与病理分级有关。结论 CDC25C可能参与了肾透明细胞癌的发生过程,CDC25C可能是肾透明细胞癌一个潜在的基因治疗靶点。

25-羟维生素D_(3)、维生素C、大豆异黄酮对鸡蛋壳质量及钙代谢的影响

为探究不同剂量组合的25-羟维生素D_(3)、维生素C、大豆异黄酮对鸡蛋壳质量及钙代谢的影响,试验采用三因素三水平正交试验设计,在基础日粮中分别添加0、10、20μg/kg 25-羟维生素D_(3),0、50、100 mg/kg维生素C,0、5、10 mg/kg大豆异黄酮。选取972只50周龄的健康京粉一号蛋鸡,随机分为9组,每组6个重复,每个重复18羽,预试期1周,正试期6周。结果表明:(1)与0添加量相比,添加20μg/kg 25-羟维生素D_(3)可显著增加平均蛋重(P<0.05)。(2)在第5~6周,添加不同水平的25-羟维生素D_(3)、维生素C和大豆异黄酮均能显著提高蛋壳强度、蛋壳厚度(P<0.05)。(3)添加大豆异黄酮和维生素C可提高机体的抗氧化能力。(4)添加不同水平的25-羟维生素D_(3)、维生素C均可显著提高十二指肠中CaBP-D_(28k)及肾脏中CYP_(27)B_(1)表达量(P<0.05),添加5 mg/kg大豆异黄酮可显著提高子宫中ERα、CA_(2)表达量(P<0.05)。综上,(1)饲粮中添加25-羟维生素D_(3)、维生素C和大豆异黄酮均可提高蛋壳质量,最优组合为20μg/kg 25-羟维生素D_(3)、50 mg/kg维生素C和5 mg/kg大豆异黄酮。(2)25-羟维生素D_(3)通过促进十二指肠及肾脏中CaBP-D_(28k)表达,促进机体钙吸收和蛋壳钙沉积;维生素C通过提高十二指肠CaBP-D_(28k)、肾脏CYP_(27)B_(1)表达量,促进钙吸收和胫骨钙沉积;大豆异黄酮通过提高机体雌激素水平,促进子宫ERα、CA_(2)表达,促进胫骨钙沉积。

带状疱疹急性期血清25-羟基维生素D及炎症标志物对后遗神经痛的预测价值

目的研究带状疱疹(herpes zoster,HZ)患者急性期血清25-羟基维生素D[25(OH)D]变化及其对后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)预测价值。方法回顾性研究北京博爱医院皮肤科门诊2019年7月至2022年6月带状疱疹患者202例,根据其是否发生PHN分为PHN组和非PHN组,收集并比较患者一般临床资料及其初次就诊时外周静脉血25(OH)D、ESR、CRP、NLR、IL-6水平。影响因素通过多因素Logistic回归进行分析。使用Brier Score和AUC对预测指标进行评价。结果纳入202例患者,PHN组55例(27.2%),非PHN组147例(72.8%)。两组在年龄、VAS评分、HZ分型、是否合并泼尼松治疗、血清IL-6、CRP、25(OH)D差异有统计学意义(χ^(2)值/Z值分别为-4.32、-3.719、9.943、7.316、7.226、9.063、10.53;P值分别为<0.0001、<0.0001、0.004、0.007、0.007、0.003、0.005)。两组性别、皮疹出现天数、NLR、ESR差异无统计学意义(χ^(2)值/Z值分别为0.836、-4.427、0.438、-0.337;P值分别为0.360、0.154、0.091、0.076)。多因素Logistic回归表明,年龄(OR=1.04,95%CI 1.02~1.07,P=0.001)、CRP(OR=3.99,95%CI 1.27~12.56,P=0.018)、血清25(OH)D(OR=4.49,95%CI 1.320~1.522,P=0.016)是HZ患者发生PHN的影响因素。血清25(OH)D、CRP水平及二者联合预测HZ患者发生PHN的AUC分别为0.701、0.728、0.846,Brier score为0.164。结论血清25(OH)D水平在急性期HZ患者中下降,CRP、IL-6水平在急性期HZ患者中上升,年龄、血清25(OH)D、CRP水平可能对预测PHN发生具有一定价值。

人Cdc25C基因克隆及其原核表达载体的构建与表达

目的:构建人Cdc25C基因的克隆载体和原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:从人肝癌细胞株Bel-7404中提取总R N A,经RT-P C R法扩增人C d c25C c D N A后,将其正确插入克隆载体pMD18-T和表达载体pET-32a(+),并转化至BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS和Transetta(DE3)三种感受态大肠杆菌中,分别采用0.25 mmol/L IPTG和ArtMediaTM Protein Expression自动诱导表达培养基诱导表达,并对纯化的融合蛋白进行考马斯亮蓝染色和质谱分析鉴定.结果:成功扩增了Cdc25C基因,并获得p M D18-T-C d c25C克隆载体和p E T-32a(+)Cdc25C表达载体;重组质粒在BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS和Transetta(DE3)三种感受态大肠杆菌中均诱导表达出TRx-His-Cdc25C融合蛋白;考马斯亮蓝染色和蛋白质谱分析结果显示基因重组蛋白与目的蛋白相符.结论:获得肿瘤相关抗原Cdc25C重组蛋白,为后续研究奠定基础.

Cys C、25-(OH)D_(3)及CRP表达与社区老年2型糖尿病患者衰弱的相关性研究

目的探讨胱抑素C(Cys C)、25-羟维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]及C反应蛋白(CRP)的表达与社区老年2型糖尿病患者衰弱的相关性。方法选择社区老年2型糖尿病患者为研究对象,通过Fried表型衰弱量表及FRAIL衰弱量表对患者进行衰弱性筛查,收集其中100例无衰弱者为对照组,100例有衰弱者为研究组。采用全自动湿化学法测定患者血清Cys C、CRP含量,采用全自动化学发光法检测患者血浆25-(OH)D_(3)含量。分析血清Cys C、CRP、血浆25-(OH)D_(3)在2型糖尿病中的表达,通过Pearson统计软件对血清Cys C、CRP、血浆25-(OH)D_(3)与患者衰弱相关性进行研究。结果研究组血清Cys C含量(2.89±0.78)mg/L显著高于对照组的(0.84±0.16)mg/L(P<0.05);研究组血清CRP含量(13.96±2.58)mg/L显著高于对照组的(7.58±1.65)mg/L(P<0.05);研究组血浆25-(OH)D_(3)含量(22.65±4.74)ng/ml显著低于对照组的(47.58±8.76)ng/ml(P<0.05)。经Pearson相关性分析结果显示:血清Cys C含量越高,其衰弱越显著,Cys C含量与患者衰弱呈显著正相关(r=0.625,P<0.05);血清CRP含量与患者衰弱呈显著正相关(r=0.583,P<0.05);血浆25-(OH)D_(3)含量与衰弱呈显著负相关(r=-0.603,P<0.05)。结论2型糖尿病衰弱型患者存在不同程度的肾功能损害、非特异性炎症表达以及25-(OH)D_(3)不足。

下调PAR基因表达对前列腺癌PC3细胞周期及Cdc25C蛋白表达的影响

背景与目的:前列腺雄激素调节基因(prostate androgen regulated gene,PAR)在雄激素非依赖性前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞恶性转化相关。本研究用RNA干扰技术下调PAR基因表达,并探讨其对前列腺癌PC3细胞细胞周期及调节因子Cdc25C表达的影响。方法:针对PAR基因的siRNA转染PC3细胞,以RT-PCR验证其对PAR基因表达抑制的有效性,用流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测Cdc25C表达水平。结果:siRNA转染可抑制PC3细胞PAR基因表达,同时G2/M期细胞及凋亡细胞比例分别由(23.79±3.16)%及(1.49±0.13)%增加至(29.95±3.25)%和(20.61±2.73)%,Cdc25C蛋白表达水平明显下降。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡,抑制细胞周期调节因子Cdc25C的表达。

Cdc25C在放疗敏感的食管鳞状细胞癌中高表达

目的研究食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C的表达与放疗敏感性的关系。方法回顾性分析62例根治性放疗的局部晚期食管鳞状细胞癌患者,根据放疗近期疗效分为放疗敏感组和放疗不敏感组,采用免疫组织化学检测放疗前食管癌组织中Cdc25C表达,分析Cdc25C的表达与放疗敏感性之间的关系。结果食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C表达率显著高于癌旁正常上皮组织,放疗敏感组Cdc25C表达率显著高于放疗不敏感组。结论食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C高表达与放疗敏感性密切相关,Cdc25C的高表达可能有助于预测肿瘤细胞对放射治疗的敏感性,对于指导食管鳞状细胞癌临床治疗具有重要的参考意义。

DADS通过Chk1/Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路诱导白血病HL-60细胞G2/M期阻滞

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞及其分子机制。方法采用细胞计数、软琼脂克隆形成实验及流式细胞术观察DADS对HL-60细胞生长抑制与周期阻滞效应。Western blot检测DADS对HL-60细胞Chk1/2以及下游分子的影响。结果细胞计数显示,60、120μmol·L-1DADS处理后,其群体倍增时间从19.14 h增加到35.03、71.82 h(P<0.05)。软琼脂克隆形成实验表明,30、60、90、120μmol·L-1DADS对HL-60细胞克隆形成率的抑制率分别为35.06%、62.10%、93.79%、99.35%(P<0.05)。流式细胞术检测显示,60和120μmol·L-1DADS分别作用HL-60细胞24 h后,DADS可呈时间与浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。60μmol·L-1DADS处理HL-60细胞后,p-Chk1可呈时间依赖性上调(P<0.05),而Chk1与Chk2总蛋白和pChk2无改变(P>0.05)。并且,Cdc25C、CyclinB 1和CDK1分别呈时间依赖性下调(P<0.05),但14-3-3蛋白表达没有改变(P>0.05)。结论 DADS能够抑制HL-60细胞增殖,并通过Chk1/Cdc25C/CyclinB 1/CDK1通路阻滞HL-60细胞于G2/M期。

CDC25C蛋白和CLDN6蛋白在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究肝细胞癌(hepatic cell carcinoma,HCC)组织中细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cell division cyclin 25 homolog C,CDC25C)与紧密连接蛋白Claudin-6(CLDN6)的表达情况,探讨其与HCC的发生、发展、预后的关系。方法:应用免疫组织化学SABC法检测58例HCC、24例癌旁组织和18例正常肝脏组织中CDC25C和CLDN6的表达情况,并分析两者与临床病理特征和术后无瘤生存期的关系。结果:CDC25C在HCC组织、癌旁组织、正常肝脏组织表达阳性率分别为86.2%、45.8%、11.1%,表达差异均有统计学意义(P<0.05)。CDC25C在HCC组织中的表达与乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、肿瘤直径大小和肿瘤分化程度有关(P<0.05)。CLDN6在HCC组织、癌旁组织、正常肝脏组织表达阳性率分别为77.6%、41.7%、16.7%,表达差异均有统计学意义(P<0.05)。CLDN6在HCC组织中的表达与肿瘤直径大小有关(P<0.05)。HCC中CDC25C阳性组及CDC25C阴性组的中位无瘤生存时间分别为12个月和15个月,差异有统计学意义(P<0.05)。CLDN6阳性组及CLDN6阴性组中位无瘤生存时间分别为12个月和14个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CDC25C和CLDN6可能在肝细胞癌的发生、发展及复发过程中起重要作用,有望成为肝癌诊断及预测预后的重要指标。

小鼠受精卵早期发育过程中PKC对cdc2和cdc25C活性的影响

为研究小鼠受精卵细胞早期发育过程中PKC对cdc2和cdc2 5C活性的影响 ,采用免疫印迹和电泳迁移率差异分析的方法 ,观察PKC的激活剂TPA及其抑制剂星形孢子素对小鼠受精卵一细胞期cdc2和cdc2 5C活性的影响 .10nmol L的TPA作用 10min后 ,小鼠受精卵一细胞期卵裂率明显大于对照组 (P <0 0 5 ) ,而星形孢子素作用后卵裂率显著下降 (P <0 0 1) .TPA处理后 ,受精卵中呈去磷酸化状态的活性cdc2明显增加 ,没有活性呈磷酸化状态的cdc2 5C明显减少 ;而星形孢子素处理的受精卵中没有活性的cdc2明显增加 ,有活性的cdc2 5C明显减少 .结果表明 ,TPA短时间作用可以促进小鼠一细胞期受精卵分裂 ,星形孢子素抑制受精卵的分裂 ;TPA可以促进cdc2的去磷酸化以及cdc2 5C的磷酸化 ,从而促进G2 M转换 ,星形孢子素则抑制cdc2和cdc2 5C的活性 ,阻止受精卵由G2

人源Cdc25C蛋白的融合表达及纯化

目的:表达并纯化有活性的GST-Cdc25C融合蛋白,以用于Cdc25C功能研究。方法:利用RT-PCR克隆MCF-7细胞的cdc25c全长基因;在大肠杆菌中表达GST-Cdc25C融合蛋白;利用GSH交联的琼脂糖珠纯化GST-Cdc25C融合蛋白;通过体外磷酸酶活性分析检测GST-Cdc25C融合蛋白的磷酸酶活性。结果:克隆获得1465 bp的人源cdc25c全长基因,并克隆至pGEX-4T-1原核表达载体;在原核系统中可溶性表达了相对分子质量约87×103的GST-Cdc25C融合蛋白;通过亲和纯化获得的GST-Cdc25C融合蛋白具有较好的磷酸酶活性。结论:得到了有磷酸酶活性的GST-Cdc25C融合蛋白,可用于后续的Cdc25C功能研究。

TMS320C25静止图象传输系统

本文以两台TMS320 C25图象处理机为编码和通信处理机,并配以适当的信道接口电路和设备,构成了一个可用于普通电话线的静止图象传输系统.该系统以其运算速度快(10MIPS)可编程、可适应多种传输速率(0～5Mbits/s)、价格低廉等特点,为静止图象传输的广泛应用提供了又一有效途径。