不同酸碱性稀释液联合一水肌酸对猪X、Y精子分离效果的研究

旨在探究调整猪精液稀释液酸碱性联合一水肌酸(ceatine monohydrate,CMH)对猪X、Y精子的分离效果。本研究使用8头2~4岁健康的杜洛克公猪采集精液,通过调整精液稀释液Beltsville(BTS)的pH,使用精子计算机辅助分析系统(CASA)检测精子活率和运动轨迹确定X、Y精子分选体系最适pH,利用CASA检测精子运动性能确定一水肌酸最适添加浓度。通过免疫荧光染色和流式细胞术评估X、Y精子分选效果,利用荧光标记法、精子活性氧MitoSOX Red染色等方法检测精子顶体、质膜完整性、活性氧含量等精子质量指标。结果表明,当稀释液pH为6.4和7.1时,孵育60 min对精子活率无显著影响(P>0.05),上层精子前向性运动占比极显著高于下层(P<0.01)。稀释液中添加750μmol·L^(-1)一水肌酸孵育60 min时显著提高了精子活力、直线运动速率、曲线运动速率和摆动性(P<0.05)。使用酸性稀释液联合一水肌酸分选猪X、Y精子,分选后上层精液X精子占比达63.32%;碱性稀释液联合一水肌酸分选猪X、Y精子,分选后上层精液Y精子占比达到67.19%。进一步研究发现,分选后顶体完整性、质膜完整性和ROS水平同对照组相比无显著差异(P>0.05),ATP水平、线粒体膜电位和运动性能显著高于对照组(P<0.05)。综上,本研究通过调整稀释液酸碱性并联合一水肌酸建立了一种简便、价廉和快捷的猪X、Y精子分选体系,该方法不影响分选后精子质量并提高精子运动性能,进一步为猪性控精液新技术研发提供试验依据。

绵羊精液中X、Y 精子比率快速评价方法的建立

研究旨在建立以TaqMan荧光PCR为基础的快速检测绵羊X、Y精子比率的方法,为绵羊X、Y精子分离技术的发展与应用提供技术支撑。试验分别针对X、Y染色体特异性基因F9和SRY设计引物与探针,以绵羊基因组DNA为模板进行片段扩增、质粒连接、扩增提纯后按不同比率混合构建标准曲线,计算拟合方程。并通过对3份商用X、Y性控精液及2份鲜精进行测定来检验方法的准确性、稳定性及可靠性。结果表明,商用X性控精液中X精子的比率分别为(89.46±3.37)%、(89.86±2.85)%、(90.02±2.19)%,商用Y性控精液中Y精子的比率分别为(89.02±2.68)%、(88.21±2.63)%、(88.72±3.93)%,检测结果与质控报告所标注的X、Y精子比率无显著性差异(P<0.05)。鲜精的检测结果表明,X、Y精子比率分别为(49.86±2.90)%、(49.30±2.10)%,与理论值50%无显著性差异(P<0.05)。综上,研究建立的以TaqMan探针荧光定量PCR为基础的快速检测绵羊X、Y精子比率的方法速度快、检测所需精液体积小,准确性、稳定性及可靠性高,能够为绵羊X、Y精子分离检测提供技术支撑。

荷斯坦奶牛性控精液配种效果分析

本试验对荷斯坦奶牛常规精液和性控精液配种效果进行了比较分析.结果表明:采用性控精液(200万个/0.25 mL)配种的总受胎率为58.3%,1次性配种受胎率为58.3%,生母犊率为77.5%.采用常规精液(1 000万个/0.25 mL)配种的总受胎率为79.2%,1次性配种受胎率为56.2%,生母犊率为45%.1次性配种受胎率常规精液和性控精液差异不显著(P>0.05),生母犊率性控精液极显著高于常规精液(P<0.01).通过经济效益分析表明,采用性控精液配种可以有效地提高奶牛养殖的经济效益.

奶牛性别控制冻精和普通冻精对比试验研究

用奶牛性控冻精共授配奶牛948头,妊娠893头,情期受胎率平均为67.37%;母犊率达到93.95%,普通冻精产母犊率51.63%,差异极显著(P<0.01)。对其中20头母犊出生时的体重、体尺进行了测定,并与常规冻精所产母犊的生长发育指标进行比较,两者差异不显著(P>0.05)。试验表明,奶牛性控冻精对实现规模化奶牛场的快速扩群和品质提升具有较高的实用价值。

荷斯坦奶牛性控精液人工授精试验

试验对荷斯坦奶牛常规精液和性控精液人工授精效果以及性控精液对青年牛和经产牛的效果进行了比较分析。结果表明：采用性控精液（200万个／0．25m）人工授精的受胎率为66．7％，第一情期受胎率68．8％，采用常规精液（1000万个／0．25mL）人工授精的受胎率为83．3％，第一情期受胎率76％，性控精液和常规精液差异不显著（P〉0．05），用性控精液人工授精，青年牛受胎率78．6％，经产牛受胎率62．2％，差异不显著（P〉0．05）。经济效益分析表明，采用性控精液人工授精可以有效地提高奶牛养殖的经济效益。

荷斯坦奶牛性控精液人工授精试验

试验对荷斯坦奶牛常规精液和性控精液人工授精效果以及性控精液对青年牛和经产牛的效果进行了比较分析。结果表明：采用性控精液（200万个／0．25m）人工授精的受胎率为66．7％，第一情期受胎率68．8％，采用常规精液（1000万个／0．25mL）人工授精的受胎率为83．3％，第一情期受胎率76％，性控精液和常规精液差异不显著（P〉0．05），用性控精液人工授精，青年牛受胎率78．6％，经产牛受胎率62．2％，差异不显著（P〉0．05）。经济效益分析表明，采用性控精液人工授精可以有效地提高奶牛养殖的经济效益。