敲除sfa1基因提高酿酒酵母乙醇合成能力的研究

sfa1基因编码的酶具有乙醇脱氢酶和甲醛脱氢酶双功能活性,通过设计含有与sfa1基因两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6和pUG66为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的酿酒酵母sfa1基因敲除组件,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS1并将质粒pSH47转入阳性克隆子,诱导表达Cre酶切除筛选标记,在原ORF基因处保留一个loxP位点,丢失质粒后获得sfa1基因缺陷型酵母突变株YS1-sfa1。摇瓶发酵实验表明,突变株YS1-sfa1的乙醇分解代谢活性降低,乙醇产量提高8.0%。

血浆sFas/Apo-1和Bcl-2在卵巢癌的表达水平及意义

目的 :研究凋亡相关基因sFas/Apo - 1和Bcl- 2血浆中的表达水平 ,探讨二者在卵巢癌发生发展中的作用及临床应用价值。方法 :采用ELISA法对 2 0例上皮性卵巢癌、19例卵巢良性肿瘤、18例正常人群血浆中sFas/Apo - 1和Bcl- 2水平进行检测。结果 :卵巢癌患者血浆sFas/Apo - 1是 (10 2 5 6 5 2± 1 5 73)ng/L ,明显高于卵巢良性肿瘤组 (6 86 12 0± 1 36 1)ng/L ,和正常人群组 (6 38 2 6 4± 1 2 4 1)ng/L ,差异有极显著意义 (P <0 0 1)。而卵巢良性肿瘤组与正常人群组间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。卵巢癌患者血浆Bcl- 2是 (179 14 3±2 6 84 )U/ml,也明显高于卵巢良性肿瘤组 (82 4 71± 1 94 3)U/ml,和正常人群组 (6 6 4 2 0± 1 4 0 1U/ml) ,差异有极显著意义 (P <0 0 1)。卵巢囊肿组与正常人群组间差异也无显著意义 (P >0 0 5 )。血浆sFas/Apo - 1水平诊断卵巢癌的敏感性为 35 % ,特异性为 88 89%。血浆Bcl - 2水平诊断卵巢癌的敏感性为 5 5 % ,特异性为84 6 1%。结论 :Fas/Apo - 1和Bcl- 2基因通过细胞凋亡的调控共同参与了卵巢癌的发生发展 ,对二者的血清学检测有助于卵巢癌的诊治。

充血性心力衰竭sFas/APO-1与心肌重塑的相关性及培哚普利的影响

目的观察充血性心力衰竭(CHF)患者sFas/APO-1与心肌重塑的变化及培哚普利对其的影响,探讨培哚普利改善CHF患者心功能的可能机制。方法选择CHF患者56例,随机分组,A组(26例)为常规治疗组,B组(30例)在常规治疗基础上加用培哚普利(4mg,Qd)治疗共3个月,分别于0、3个月末采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA法)测定血清sFas/APO-1水平,采用超声心动图诊断方法测定左心室收缩末径(LVESD)、左心室舒张末径(LVEDD)、每搏输出量(SV)和左心室射血分数(LVEF)等,另设健康对照组20例。结果心力衰竭患者血清sFas/APO-1水平明显高于健康对照组,培哚普利组治疗3个月后,较常规治疗组血清sFas/APO-1水平明显下降,LVESD、LVEDD明显减低,SV与LVEF明显升高,差异均有统计学意义;sFas/APO-1水平与LVEF呈负相关。结论培哚普利可明显改善CHF患者心肌重塑与心功能,其作用机制可能与降低血清sFas/APO-1水平有关。

CHF贫血患者血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平变化及干预研究

目的:研究慢性充血性心力衰竭(CHF)贫血患者血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平变化及干预。方法:检测入选的319例CHF患者的血红蛋白、血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平,按血红蛋白水平分为CHF贫血组和非贫血组。结果:随着CHF患者心功能的恶化,其血红蛋白水平逐渐降低,而血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平则逐渐升高;CHF贫血组的血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平均明显高于CHF非贫血组(均为P<0.01);CHF患者血红蛋白水平与血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平呈负相关(P<0.01)。治疗后的结果显示,CHF贫血患者在贫血纠正后,血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平恢复到非贫血组患者水平。结论:CHF患者sFas/Apo-1、sFas和FasL水平的升高参与了CHF发生发展的病理生理过程,纠正贫血,规范治疗可显著降低血清sFas/Apo-1、sFas和FasL水平,抑制细胞凋亡,从而改善CHF患者心脏功能和预后。

ALT正常和异常人血清sFas／APO-1测定结果比较

目的 探讨肝炎病人血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)增高与血清中可溶性Fas(即sFas／APO-1)含量的关系，以了解细胞凋亡参与肝炎病理过程的机制，为临床肝炎的诊断治疗提供参考。方法 选择肝功能检测中ALT>40U／L的病人血清及ALT<40U／L的正常人血清，用ELISA法检测两组血清中sFas的含量，并进行统计学分析。结果 ALT正常组血清甲sFas的含量均<15pg／na，ALT>40U／L的异常组血清中sFas浓度明显高于正常组(t=4．057，P<0．01)，且ALT值的增高与sFas含量呈正相关(rs=0.785>r0．05，P<0．05)。结论 肝炎时肝细胞的死亡，除了病毒直接效应或宿主免疫反应等结果外，Fas系统介导的细胞凋亡参与了重要的病理过程，测定肝炎病人血清中sFas／APO-1的浓度，对了解肝炎细胞凋亡的模式，从新的角度观察肝炎的发病机制，开发新的治疗途径，有其重要临床意义。