核酸适配体sgc8在急性白血病诊断中的应用研究

目的·研究核酸适配体sgc8对不同骨髓细胞的识别能力,评价其对急性白血病(acute leukemia,AL)的诊断价值。方法·利用5-羧基荧光素标记的核酸适配体sgc8及其对照随机文库链(Lib)通过流式细胞术检测83例临床骨髓样本,分析各细胞群sgc8与Lib阳性百分比差值。采用Kruskal-Wallis检验进行统计学分析。结果·在AL样本中,sgc8在大部分急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)和急性髓系细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)样本中对肿瘤细胞具有特异性识别能力;其中,sgc8对不同AML亚型肿瘤细胞的识别能力不同,而对T-ALL不同亚型肿瘤细胞的识别能力没有差异;但在急性B淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)样本中,sgc8未见明显识别能力。在正常骨髓样本中,sgc8可以识别髓系原始细胞,而不识别早期B细胞及其他成熟细胞群。结论·sgc8在AML、T-ALL和正常骨髓样本中具有特异性识别能力,且对不同AML亚型可能具有不同的诊断价值,但它对B-ALL样本的细胞无显著识别能力。

脂质体封装的介孔纳米药物治疗急性淋巴细胞白血病的研究

目的合成一种新型的针对白血病细胞的纳米靶向药物。方法首先合成一种修饰了CEM细胞特异性核酸适配体Sgc8(Apt)的脂质体Apt-L。然后合成装载有阿霉素(DOX)的介孔二氧化硅(M)纳米药物M/DOX。将Apt-L与M/DOX进行融合,合成一种针对CEM细胞的纳米靶向药物(Apt-LM/DOX)。结果表征检测证实Apt-LM合成成功,流式细胞术证实Apt-LM与CEM有高达80%以上的结合率,且与单独使用Apt组之间差异有统计学意义(**P<0.05)。Apt-LM/DOX在pH 7.4的环境中释放缓慢,而在pH 5.0的环境中能快速释放DOX。体外杀伤试验及细胞透射电镜检测证实Apt-LM/DOX对CEM细胞具有特异性杀伤效果。体内药物注射,肿瘤组织切片证实Apt-LM/DOX纳米药物载体在小鼠体内能够有效运送化学药物DOX到肿瘤部位。结论Apt-LM/DOX纳米药物能够有效靶向及杀伤CEM细胞,具有很好的开发应用前景。

基于核酸适配体及硅纳米粒子的荧光探针检测白血病细胞的研究

目的构建一种特异性急性淋巴细胞白血病检测探针,应用于急性淋巴细胞白血病快速诊断。方法合成一种二氧化硅纳米粒子(MSN),将能与白血病细胞特异性结合的荧光标记的核酸适配体sgc8修饰到纳米粒子表面,合成一种荧光信号放大的纳米检测探针sgc8/MSN,用于白血病细胞的快速检测。结果粒径及电位检测证实白血病细胞检测探针合成成功,流式细胞术证实sgc8/MSN探针与血病细胞系CEM有高达83.1%的结合率。荧光显微镜检测证实sgc8/FMSN探针能够有效靶向白血病细胞CEM。结论sgc8/MSN能够作为一种快速的急性淋巴细胞白血病检测探针,具有很好的开发应用前景。