消退素D1治疗系统性红斑狼疮模型小鼠的分子机制

目的探讨消退素D1(RvD1)治疗系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠的分子机制。方法选取8周龄雌性MRL/lpr小鼠(SLE小鼠模型,12只)和ICR小鼠(健康对照小鼠,6只),将MRL/lpr小鼠按照随机数字表法随机分为磷酸缓冲溶液(PBS)组和RvD1组(每组各6只),尾静脉分别注射0.2 ml PBS和5μg/kg RvD1,8周后检测PBS组和RvD1组小鼠血清抗双链DNA(dsDNA)抗体、尿蛋白和滤泡辅助T细胞(Tfh)比例。处死小鼠后分离PBS组小鼠脾脏CD4^(+)T细胞,按随机数字表法将细胞分为CD4^(+)T细胞+二甲基亚砜(DMSO)(A组)、CD4^(+)T细胞+RvD1(B组)、初始CD4^(+)T细胞+DMSO(C组)、初始CD4^(+)T细胞+RvD1(D组),检测各组细胞E26转录因子1(ETS1)mRNA的表达水平和Tfh比例和分化情况。将miR-338-3p抑制剂与PBS组脾脏CD4^(+)T细胞或初始CD4^(+)T细胞共培养,检测细胞ETS1 mRNA的表达水平和Tfh的分化情况。用shRNA-circ_0006779慢病毒或空载慢病毒感染ICR组小鼠的脾脏CD4^(+)T细胞,检测各组细胞miR-338-3p mRNA、ETS1 mRNA的水平和Tfh的分化情况(细胞实验的筛孔数均为5)。结果RvD1组小鼠脾脏CD4^(+)T细胞ETS1 mRNA表达量高于PBS组(1.00±0.33比0.34±0.13,P=0.014);RvD1组小鼠脾重、血清抗dsDNA抗体水平、尿蛋白水平、Tfh细胞比例均低于PBS组(均P<0.05)。RvD1与CD4^(+)T细胞体外共培养结果发现:B组CD4^(+)T细胞ETS1 mRNA表达量高于A组(1.00±0.08比0.25±0.05,P<0.001)、Tfh比例低于A组(16.06%±3.06%比21.76%±3.42%,P=0.020);RvD1与初始CD4^(+)T细胞体外共培养结果发现:D组初始CD4^(+)T ETS1 mRNA表达量高于C组(1.00±0.25比0.21±0.16,P<0.001)、Tfh分化程度低于C组(8.81%±1.01%比12.60%±1.86%,P=0.011)。与不加miR-338-3p抑制剂相比,miR-338-3p抑制剂可以增加PBS组CD4^(+)T细胞ETS1 mRNA表达量(1.00±0.24比0.10±0.01,P<0.001),降低Tfh细胞分化程度(9.56%±1.53%比13.60%±1.32%,P<0.001);与空载慢病毒组相比,shRNA-circ_0006779慢病毒可以增加ICR组CD4^(+)T细胞miR-338-3p水平(1.00±0.22比1.38±0.21,P=0.002),降低ETS1 mRNA水平(0.76±0.13比1.00±0.14,P=0.005),提高Tfh细胞分化程度(4.00%±0.65%比1.68%±0.60%,P<0.001)。结论RvD1通过circ_0006779/miRNA-3384-3p/ETS1轴抑制Tfh细胞分化,治疗小鼠的SLE。