In vitro bone inducing effects of Lentinula edodes (shiitake) water extract on human osteoblastic cell cultures

The effect of Lentinula edodes water extract(LE)on two osteoblastic cell cultures(HOS 58 and Saos-2)was investigated to determine if this edible medicinal mushroom has osteoinductive properties.Activity of alkaline phosphatase and mineralization were used as indicators for the vitality and maturation of the bone cells.Cultivation of human osteosarcoma cells HOS 58 for five days in presence of a serial dilution of the aqueous extract of L.edodes(0.8μg/mL-125μg/mL)resulted in a significant elevation of alkaline phosphatase activity(ALP)of the cells in comparison to untreated cells.Saos-2 cells,incubated with LE(20μg/mL)andb-glycerol phosphate(2 mM)for 21 days,displayed a 2 fold level of mineralization than cells cultured soley with the positive control,b-glycerophosphate.The obtained results clearly indicate the activity of LE as a bone inducing agent in vitro.Therefore,the shiitake mushroom(L.edodes)deserves attention as a supportive dietary treatment or nutraceutical in the case of diseases accompanied with bone disorder,such as osteoporosis,osteopenia,and late complication of diabetes.

新型相变蓄冷剂对香菇采后品质的影响

【背景】食用菌风味独特,富含蛋白质、维生素以及多种生物活性成分,如多糖、甾醇等。我国是食用菌种植和消费大国,其中香菇是我国种植最多的食用菌。但现有的蓄冷剂相变温度低,容易在香菇贮藏中引起冻害。【目的】本研究基于香菇的冰点,研制适用于香菇冷链保鲜的新型相变蓄冷剂,维持香菇的采后品质。【方法】以相变潜热和相变温度为指标,通过差示扫描量热法(DSC)筛选主要蓄冷成分,并采用硫酸钾、纳米二氧化钛和高吸水性树脂进行复配,优化蓄冷剂配方。根据失重率、色泽、硬度等品质指标,研究蓄冷剂对香菇采后品质的影响。测定谷氨酸代谢和能量代谢的相关酶活性,探究蓄冷剂保持香菇鲜度的相关机制。【结果】DSC筛选的主要蓄冷成分为麦芽糖醇水溶液。复配后获得蓄冷剂的最优配方:麦芽糖醇1.85%,硫酸钾2.35%,纳米二氧化钛0.02%,高吸水性树脂0.80%。基于此配方所制备蓄冷剂的相变潜热为405.26 J·g^(-1),相变温度为-1.8℃。与对照组相比,蓄冷剂提供的低温条件下,香菇的失重率降低51.92%,硬度和亮度分别提高66.67%和41.94%,延长了香菇的货架期;同时,低温条件调控谷氨酸代谢和能量代谢的相关酶活性,香菇的谷氨酸和能荷水平分别提高36.64%和54.76%,保证了香菇的鲜度。【结论】新型相变蓄冷剂处理通过创造低温条件,有效地抑制了贮藏过程中香菇的水分流失,维持了香菇的整体品质。新型相变蓄冷剂延缓香菇衰老作用可能与激活能量代谢相关酶和高水平的能荷有关。此外,充足的能量供应减少了谷氨酸作为碳骨架的消耗,促进了谷氨酸的积累,从而维持了香菇的鲜味特性,这种新型相变蓄冷剂适用于香菇的冷链保鲜。

河南香菇越夏高温气候特征及其与菌棒坏袋率的关系分析

气候变暖背景下,高温胁迫已成为影响河南香菇产业发展的制约因素,研究香菇越夏高温气候特征及其与香菇菌棒坏袋率的关系,可为香菇生产应对气候变化提供技术支撑。基于1991—2022年河南省伏牛山区6个香菇主产地区的气象数据,选取30、33、35、40℃等4个高温界限温度,分析河南香菇主产区的高温变化特征,并结合2022年香菇高温灾害资料,研究香菇越夏期(6—8月)不同高温界限温度下气象因子与菌棒坏袋率的关系,明确香菇遭受高温灾害的主要温度界限指标及气象因子。结果表明,1991—2021年河南香菇越夏期高温热量资源呈显著增加趋势,西峡地区增温尤为明显;越夏期内,7月份33℃以上的日高温最大时长与菌棒坏袋率呈显著正相关,尤其是35℃界限温度下的日高温最大时长与菌棒坏袋率的正相关系数最大。未来应重点关注最高温度在33℃以上的天气,当气温在35℃以上时,应及时采取措施积极防御香菇高温灾害。

菌糠水提液对马铃薯致病疫霉的抑制机理

菌糠是菌菇生产后残留的物质,含有丰富的无机盐和有机质等成分。利用热水浸提法制备香菇菌糠水提液(water extract from spent mushroom substrate,WESMS),通过紫外分光光度计和Zeta电位及粒径仪对其紫外吸收情况、表面电荷和水中分散粒径进行表征,采用平板渗透法及十字交叉测量直径法计算WESMS对致病疫霉的抑制率,利用光学显微镜和扫描电镜观察病原菌细胞形态的损伤程度,并采用琼脂糖凝胶电泳法分析WESMS对致病疫霉DNA的影响。结果表明,WESMS在紫外线A(UVA,315~400 nm)、B(UVB,280~315 nm)和C(UVC,100~280 nm)波段均有吸收,在水中的分散粒径为3649.27 nm。抑菌试验表明,WESMS对病原菌的生长具有抑制作用,随着提取液体积百分浓度的增加,抑制效果更明显,在高体积百分浓度(6.25%WESMS)作用下对病原菌的抑制率近100%。经WESMS处理后病原菌的菌丝更加扭曲、扁平,且褶皱明显增多,表明WESMS可对细胞造成明显破坏;WESMS处理组的DNA条带亮度暗于对照组,损伤程度与WESMS体积百分浓度呈正相关。研究结果为菌糠的资源化利用及其对马铃薯晚疫病的有效防治提供科学依据和技术支撑。

民国时期香菇栽培“沃泔法”新探

关于历史上“沃泔法”在香菇栽培中的运用,学术界的看法不一致。相关史料揭示,民国时期(1912—1949年)多地香菇栽培仍采用了沃泔法,这是对此前沃泔法栽培香菇技术的传承。结合“泔水”在其他作物种植中具有提供养分的作用,可以认为,“沃泔法”是能够促进香菇生长的实践技术经验积累,民国时期香菇栽培过程中不存在米泔浇淋步骤的观点不完全符合事实。

油松容器育苗香菇渣基质粒径配方筛选

为了筛选适合油松Pinus tabulaeformis生长的香菇Lentinula edodes渣不同粒径质量的配方,通过方差分析、多重比较,进行了不同粒径配比的香菇渣对油松生长指标影响的测定。研究结果表明：香菇渣按2-5 mm,0.5-2.0mm,〈0.5 mm等3种粒径等级复配后作为栽培基质,质量比为1∶3∶1的香菇渣基质,油松苗木品质指数最高为0.024,顶芽干质量2.88 mg,地上部分0.103 g和地下部分0.078 g干质量等指标均最高,综合苗木品质指数、顶芽干质量、根系活力、可溶性糖质量分数、蛋白质质量分数各项指标综合评判得分最高。可见2-5 mm,0.5-2.0 mm,〈0.5 mm等3种粒径质量比为1∶3∶1的香菇渣最适合油松容器育苗。

一种简单快速的食用菌病毒dsRNA提取方法

食用菌病毒病一直是食用菌生产的重要问题,明显影响产量和质量。已发现的食用菌病毒很多为dsRNA病毒,因此dsRNA病毒的研究对于食用菌生产非常重要。发展一种简单快速的食用菌病毒dsRNA的提取方法,该法优化了传统提取方法的步骤和对样品数量的要求,可以从0.5～1.0 g的食用菌组织中快速提取dsRNA,提取效率较传统方法高,提取产物可以直接应用于进行dsRNA的检测、分类以及相关基因的克隆。

香菇菌株的脱毒研究

香菇具独特香味且有多种保健功能,是中国栽培的主要食用真菌之一。但近些年在中国部分产区出现的香菇病毒病使香菇的产量和质量受到明显影响。检测结果表明dsRNA在香菇中普遍存在。采用菌丝尖端挑取法对3株带毒香菇进行脱毒,获得1株不含dsRNA条带的无毒菌株和一些含1条11kb的dsRNA条带脱毒不彻底菌株。对脱毒不彻底菌株、无毒菌株以及带毒菌株进行了生物学特性、纤维素酶、木聚糖酶、漆酶和多酚氧化酶活性的测定,结果显示在pH值8时脱毒菌株的生长速度比带毒菌株快,这三类菌株的子实体产量没有显著差别,但脱毒菌株子实体肥厚且抗污染能力强。脱毒菌株的漆酶和多酚氧化酶活性明显高于带毒菌株,而纤维素酶和木聚糖酶则没有显著区别。

香菇单孢杂交及耐高温杂交子的ISSR分析

以香菇菌株L135和P18N44为亲本进行单孢杂交,通过显微镜镜检锁状联合以及与亲本的拮抗试验初步获得123个杂交子。以47℃热激3 h后菌丝在PDA培养基中的恢复生长情况进行初筛,菌丝在木屑培养基中经历33℃高温后的恢复长速进行复筛,共筛选获得耐高温杂交子12个。选用8条引物对12个耐高温杂交子和2个亲本进行了ISSR标记分析,结果表明这12株耐高温杂交子与亲本都存在一定的遗传差异,说明与亲本相比杂交子在基因水平上发生了不同程度的重组,是新的香菇耐高温菌株。

一种含有单链RNA的香菇球状病毒

从生长不正常的香菇(Lentinus edodes(Berk.)Sing)菌株中分离到一种等轴对称含单链RNA的病毒颗粒。病毒颗粒在电镜下直径为33～34nm,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中病毒外壳蛋白分子量为22000道尔顿。病毒核酸径DNase1和SI酶解试验及热变性紫外吸收曲线试验证明为单链RNA,在1.5％的琼脂糖凝胶电泳中,病毒核酸呈现一条带,分子量为2.38×10~6道尔顿。

浙江省代料香菇病虫害调查

1999～2004年的调查结果表明,浙江省香菇生产过程中病原微生物、竞争性杂菌共有84种,分别属于真菌、细菌、粘菌、放线菌和病毒5个门,其中木霉、毛霉、根霉、黄曲霉、酵母菌、链孢霉引起的病害为浙江省香菇的主要病害.香菇害虫分别属于节肢动物门和软体动物门,共92种,其中,平菇厉眼菌蚊和黑粪蚊为浙江省香菇害虫优势种群,真菌瘿蚊为重要害虫.

香菇菌糠不同粒径含量对油松生长的影响

为弄清香菇菌糠不同粒径含量对油松生长的影响,本研究进行了不同粒径含量的香菇菌糠在栽培过程中的物理性状变化及对油松生长指标影响的测定。结果表明:香菇菌糠按≥2-5 mm、≥0.5-2 mm、<0.5 mm三种粒径等级筛分并复配后作为栽培基质,5个处理的物理性质比较稳定,且栽培前后各项物理指标均能满足理想基质的要求;综合油松生物量、生长指标、生理指标等分析,5个处理均好于对照,大中小粒径组分比例为1∶3∶1的香菇菌糠作为基质,油松生长状况最好,壮苗指数为0.166,顶芽干质量为2.88 mg·株-1,除叶绿素无规律外各项生理指标也最高。可见粒径规格≥2-5 mm,≥0.5-2.0 mm,<0.5 mm三种质量比为1∶3∶1的香菇菌糠最适合栽培油松,中小粒径含量越多油松长势也越好。

香菇渣添加污泥对1年生油松苗生长及品质的影响

为了探索香菇渣基质添加污泥对油松苗木生长的影响,以香菇渣和污泥为试验材料,将香菇渣添加不同含量的污泥进行1年生油松苗育苗试验,测定油松苗生长指标。结果表明:香菇渣添加20%污泥的基质最有利于油松苗生长,其侧根数最多为13.36根,高径比最优为3.73,苗木品质指数和品质综合评价值最高,分别为0.168和1.000,顶芽干重最大为13.42mg/株,综合侧根数量、根茎比、苗木品质指数、品质综合评价及顶芽干重等指标分析,20%污泥含量的香菇渣基质最适合栽培油松苗。

适宜于杏鲍菇工厂化栽培的菌渣和基质配方初筛

本研究利用杏鲍菇菌渣和香菇菌渣替代常规配方中的木屑和甘蔗渣工厂化栽培杏鲍菇(Pleurotus eryngii),研究不同配方对其生长特性和经济效益的影响。结果表明,与常规配方相比,杏鲍菇菌渣配方组的经济效益均高于对照组,其中配方SMS4(杏鲍菇菌渣15%、木屑10%、玉米芯40%、麸皮18%、玉米粉7%、豆粕7%、石膏1.5%和石灰1.5%)的栽培效果最佳。说明利用杏鲍菇菌渣进行杏鲍菇的工厂化栽培具有可行性。

段木香菇菌种“沪农1号”的生育特性及栽培要点

以选育高产、优质、适宜于段木栽培的香菇菌种为宗旨,通过引种和多年品比试验,选出了“沪农1号”菌种,该菌种较传统菌种具有更强的合成、分泌多种酚氧化酶和纤维素酶的能力,菌丝定植快、生长迅速、出菇早、产量高,较对照增产42.9%,菇质好,花厚菇率提高25%～50%,出口菇比例超过80%,并能达到当年接种,当年出菇,收回成本,具有较大的社会效益和经济效益。

47个香菇主栽菌株的SCAR标记分子鉴别

利用前期研究开发的10个SCAR分子标记对47个香菇主栽菌株的基因组DNA进行扩增分析。基于SCAR标记在检测菌株中的存在与缺失差异,7个香菇菌株被首先鉴别出来,其余40个菌株被分成11个小组,其中一些形态特征极为相近的菌株,如L241与L241-4、闽丰1号与L12、Cr02与7402等被相互辨别。

香菇C_(91-3)转录本Unigene14872基因Pkinase结构域的克隆表达及其生物信息学分析

旨在克隆香菇C91-3转录本Unigene 14872基因中的Pkinase结构域,并对其进行生物信息学分析。提取香菇C91-3菌丝体中总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得Unigene 14872基因全长。用NCBI对其进行生物信息学分析,预测其具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Pkinase)结构域。设计引物PCR扩增Pkinase结构域,然后克隆至pET32a(+)载体,再热转化至JM109中保存并进行质粒测序。重组质粒pET32a(+)-Pkinase构建成功,并成功诱导表达重组蛋白,初步鉴定该蛋白具有抗肿瘤活性,为进一步研究重组蛋白的活性及作用机制奠定基础。

香菇杂交子及其亲本液体发酵基因差异表达与胞内总糖含量杂种优势的相关性研究

以庆科20、Cr02、武香1号、申香9号4个香菇菌株组配3个杂交组合获得的17个杂交子为试验材料,采用mRNA差异显示技术分析了杂交子和亲本之间液体发酵基因表达差异模式及其与杂交子胞内总糖含量、杂种优势的相关性。结果表明:香菇杂交子与亲本之间基因表达差异模式可分为4种类型:双亲表达共沉默类型(W1)、单亲表达沉默类型(W2)、杂交子特异表达类型(W3)、单亲表达一致类型(W4),4种差异表达类型所占比例分别为5.30%、10.15%、7.88%、12.05%;差异表达模式与杂交子胞内总糖含量相关分析表明,单亲基因表达沉默(W2)与胞内总糖含量呈极显著正相关,杂交子基因特异表达(W3)与胞内总糖含量呈显著负相关,双亲基因表达共沉默(W1)、单亲基因表达一致(W4)与胞内总糖含量相关不显著;差异表达模式与杂交子胞内总糖含量超亲优势相关分析表明,双亲基因表达共沉默(W1)、杂交子基因特异表达(W3)与胞内总糖含量超亲优势呈极显著正相关,单亲基因表达一致(W4)、单亲基因表达沉默(W2)与胞内多糖含量超亲优势呈显著或极显著负相关。

香菇C_(91-3)转录本Unigene 24277基因克隆表达及其生物学活性的研究

通过对香菇C91-3转录本Unigene 24277基因的生物信息学分析,克隆表达含RCC1结构域的Unigene24277基因,并研究其抗肿瘤活性。从香菇C91-3菌丝体中提取总RNA,反转录合成c DNA,并利用Rapid Amplification of c DNA Ends(RACE)技术获得基因全长。NCBI数据库分析提示其含有RCC1结构域。PCR扩增RCC1结构域,将其克隆产物与p ET-32a(+)载体连接,热转化至E.coil Rosetta-gami(DE3)中诱导表达,纯化、复性后,通过MTT法研究其抗肿瘤活性。结果显示原核表达载体构建成功,重组蛋白成功诱导表达,并初步证明了重组蛋白具有抑制肿瘤细胞增殖活性的功能,为后续抗肿瘤机制的探究奠定了基础。

香菇(花菇)菌株比较试验初报

1997年开始搜集了各地 2 0多个中、低温菌株 ,并进行各菌株区域栽培试验 .结果表明 ,980 3菌株具有优质高产、抗逆性强、适应性广和花菇率高等特点 ,可大面积推广 ,替代寿宁县退化的香菇 (花菇 )主栽种