极小种群野生植物十万大山苏铁SSR和ISSR反应体系建立及引物筛选

为筛选出适用于极小种群野生植物十万大山苏铁的SSR引物和ISSR引物,建立十万大山苏铁的SSR-PCR和ISSR-PCR反应体系,本研究以十万大山苏铁为试验材料,用改良CTAB法提取其基因组DNA,采用L_(16)(4^(3))正交设计方法,探索2×Taq Mix、引物浓度和模板DNA含量3个指标参数对十万大山苏铁SSR-PCR和ISSR-PCR反应体系的影响。建立了相关优化体系:20μL的SSR-PCR扩增体系中2×Taq Mix10μL、引物0.4μmol/L、模板DNA 25 ng;20μL的ISSR-PCR扩增体系中含2×Taq Mix 10μL、引物0.5μmol/L、模板DNA 60 ng。结果表明,建立的反应体系及筛选出来的15对SSR引物和9条ISSR引物通过了21份十万大山苏铁样品验证,反应体系稳定可靠。

极小种群野生植物十万大山苏铁幼苗的光合生理特性

十万大山苏铁(Cycas shiwandashanica)属于苏铁科(Cycadaceae)苏铁属(Cycas)植物,因其生境破碎,野生资源稀少,被列为极小种群。目前缺乏对其野生资源的群落结构调查与栽培研究。本研究以十万大山苏铁幼苗为研究对象,测定其一年生、二年生幼苗的生长指标,并采用Li-6400便携式光合仪测定一年生幼苗的光合日变化和光合响应曲线。结果表明,十万大山苏铁一年生幼苗与二年生幼苗的苗高、地径和冠幅显著增加,生长良好。十万大山苏铁净光合速率Pn日变化为双峰曲线,两个峰值出现在上午10:30和下午14:30,净光合速率分别为1.73μmol•m^(-2)•s^(-1)和1.76μmol•m^(-2)•s^(-1),没有出现光合午休现象,净光合速率受到气孔因素和非气孔因素限制。十万大山苏铁的光补偿点(LCP)为3.68μmol•m^(-2)•s^(-1)、光饱和点(LSP)为1023.67μmol•m^(-2)•s^(-1),最大光合速率(Pmax)为3.57μmol•m^(-2)•s^(-1),属于中生植物。本研究通过测定十万大山苏铁的生长势和光合特性,首次揭示了该植物的光合生理特性,为十万大山苏铁的保护及引种栽培提供技术支撑和缓解十万大山苏铁的濒危状态提供理论支持,对十万大山苏铁的保护研究具有理论价值和指导意义。