siRNA靶向抑制Tspan-1对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探究siRNA靶向抑制Tspan-1对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法实验组针对Tspan-1基因2个不同位点进行siRNA沉默,分别命名为Tspan-1-siRNA-1、Tspan-1-siRNA-2。采取完全剔除Tspan-1基因的作为阴性对照组,同时选取空白对照组。Wester blot方法检测各组的Tspan-1mRNA和蛋白的表达情况,选取基因沉默效果最强的一组进行结肠癌细胞HCT116细胞的转染,分别对转染前后细胞的增殖能力和侵袭能力进行检测,对siRNA靶向抑制Tspan-1能力进行评价和分析。结果相比于空白对照组,实验组各组细胞mRNA均出现了不同程度的下降,其中Tspan-1-siRNA-1、Tspan-1-siRNA-2,两组分别相比对照组下降61. 2%,57. 2%。随着转染时间的增加,实验组细胞增殖的速度明显放缓,其中第2、3、4、5天吸光度值要明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有显著性(P <0. 05);同时两个对照组之间的吸光度值无显著差异(P> 0. 05);经过转染24 h后,实验组转移到膜上的细胞数要显著少于对照组,而其余两组无显著差异(P> 0. 05)。结论 Tspan-1基因经过siRNA沉默之后,能够有效降低结肠癌HCT116细胞的增殖和侵袭能力,siRNA靶向抑制Tspan-1基因可以作为治疗结直肠癌重要的的分子手段之一。