HPLC法同时测定大籽蒿和细叶亚菊中5种成分

目的建立HPLC法同时测定大籽蒿和细叶亚菊中绿原酸、伞形花内酯、芦丁、异绿原酸A、异绿原酸C的含量,并比较其种间差异。方法两者50%甲醇提取物的分析采用CAPCELL PAK⁃C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈⁃0.2%磷酸水,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温30℃;检测波长290 nm。采用t检验比较2种药材中5种成分的含量差异。结果5种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9995),平均加样回收率96.03%~103􀆰11%,RSD 0.51%~2.26%。大籽蒿和细叶亚菊中绿原酸、伞形花内酯、芦丁、异绿原酸A、异绿原酸C平均含量分别为3.61、0.71、1.46、8.74、1.44 mg/g和2.60、0.26、0.79、6.31、1.22 mg/g。结论该方法准确、可靠,重复性好。大籽蒿与细叶亚菊相比5种化学成分无显著性差异。

新疆地产大籽蒿质量标准研究

目的建立新疆地区大籽蒿的质量标准。方法采用显微法、TLC法进行定性鉴别;根据2020年版《中国药典》相关方法检查其水分、总灰分、醇浸出物含量以及挥发油含量,同时采用盐析辅助法对挥发油的提取方法进行优化;HPLC法测定绿原酸含量。结果显微特征明显,TLC显示清晰斑点,分离度好。初步拟定大籽蒿常规检查项下的限量标准为水分不高于9.00%,总灰分不超过10.00%,稀乙醇浸出物不少于10.00%,挥发油含量不少于0.60%。HPLC法考察结果显示,绿原酸在范围内线性关系良好(r=0.9998),平均加样回收率101.98%,RSD 1.41%;拟定该药材绿原酸含量不少于0.40 mg/g。结论该方法合理可行,可用于新疆地区产大籽蒿药材的质量控制。

盐碱胁迫对碱地肤、地肤种子萌发以及幼苗生长的影响

分别用不同浓度的中性盐（NaCl，Na2SO4），碱性盐（NaHCO3，Na2CO3）处理碱地肤、地肤种子，分析各种盐分对两种植物种子萌发的影响。结果表明：超过一定浓度以后，盐分延缓了碱地肤、地肤种子萌发；碱地肤、地肤种子的发芽率、发芽指数、活力指数也随盐分的增加而降低；幼苗各部位的生长受到影响，其中盐分对胚根的抑制作用最明显．作为典型的盐生植物，碱地肤生长的最适浓度范围是：NaCl：40～80 mmol／L，Na2SO4：20～40 mmol／L，NaHCO3：10 mmol／L，Na2CO3：5 mmol／L；地肤生长的最适浓度为：NaCl：20～60 mmol／L，Na2SO4：20mmol／L，而在碱性盐NaHCO3，Na2CO3存在的条件下，地肤的长势随着盐浓度的增加而明显降低．综上所述：尽管碱地肤、地肤是属于同一科的两种植物，但是它们对于不同的盐碱反应有很大的差异．

大籽蒿化学成分分析及抗癌活性研究

将大籽蒿(Artemisia sieversiana Ehrh.ex Willd.)地上部分乙酸乙酯提取物用硅胶柱层析分离和纯化,通过波谱方法鉴定化合物,用MTT法、单细胞电泳进行体外抗肿瘤活性研究.鉴定出4种化合物:洋艾素;Achillin;5,7,4’-三羟基-3’,5'-二甲氧基黄酮;3,5-二羟基-6,7,3’,4’-四甲氧基黄酮.MTT法结果表明洋艾素和Achillin对人肝癌细胞SMMC-7721的生长有较明显的抑制作用,且具有一定的时间和浓度依赖性。单细胞电泳显示对SMMC-7721细胞的DNA有损伤作用.所以洋艾素和Achillin对SMMC-7721细胞株的抑制活性与其DNA损伤有关.

大籽蒿精油化学成分及其抗菌抗氧化活性

采用水蒸气蒸馏法提取采自西藏地区藏药大籽蒿的精油,通过气相色谱-质谱联用技术分析鉴定其化学成分,采用峰面积归一化法确定各成分的相对含量;并对大籽蒿精油体外抑菌能力和抗氧化能力进行测定。大籽蒿精油中共鉴定48种化合物,占精油总量的95.36%,主要成分为红没药醇、兰香油奥、α-水芹烯、棕榈酸和薰衣草醇等;体外抑菌结果表明,大籽蒿精油对枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌和新型隐球菌具有较强的抑菌效果,而对大肠杆菌具有较弱抑菌效果;体外抗氧化活性结果表明大籽蒿精油对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基和羟自由基具有一定的的清除能力,且清除效果强于VC。

大籽蒿挥发油化学成分的研究

大籽蒿(Artemisia sieversiana Willd.)又名白蒿,为菊科蒿属植物。本文用气相色谱分离,气相色谱/质谱法定性,鉴定了大籽蒿挥发油中的二十三种化学成分。其中1,8—桉叶油素、反—丁香烯、顺—丁香烯和樟脑为主要成分。

超声波辅助提取白蒿总黄酮工艺优化

用超声波辅助技术提取白蒿(Artemisia sieversiana)总黄酮,用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮浓度。通过单因素和正交试验,确定了白蒿总黄酮的最佳提取工艺为乙醇体积分数50%,超声处理时间45 min,超声处理温度50℃,料液比1∶40(g:mL)。在此条件下,总黄酮提取率为2.18%。

盐、碱胁迫对药用植物碱地肤生长及其茎叶离子含量的影响

对碱地肤(Kochia sieversiana)幼苗进行盐胁迫或碱胁迫动态处理,通过动态监测碱地肤的生长及无机离子含量等指标的变化情况,探讨了碱地肤生长及离子积累的动态特点.结果表明:随着盐、碱胁迫的延长,碱地肤含水量、鲜重和干重等生长指标均不同程度地受到影响,且碱胁迫影响更大.盐、碱胁迫均抑制碱地肤的生长,碱胁迫抑制更为严重.碱地肤并非肉质化植物,其在长时间的渗透胁迫和高pH下仍能保持高含水量,此特殊现象可能是决定碱地肤具有高度抗盐碱特性的生理特点之一.随着盐、碱胁迫的延长,碱地肤植株对K^+,Na^+吸收不存在拮抗竞争,且在144h的盐、碱胁迫下仍保持着较低的b_(Na^+)/b_(K^+)比值,这种排Na^+、吸K^+的特殊吸收机制对碱地肤的抗盐、碱性具有重要意义.此外,与盐胁迫相比,碱胁迫下其b_(Na^+)/b_(K^+)比值更低,这可能是碱地肤适应高pH盐碱生境的重要原因之一.

盐碱胁迫下抗碱牧草碱地肤溶质积累、分布特点及有机酸的生理贡献

对碱地肤幼苗进行盐、碱胁迫处理,通过测定各种溶质积累及分布特点,探讨碱地肤适应盐碱生境生理机制的部位差异,明确有机酸对其适应盐碱生境的贡献。结果表明,各种溶质在幼叶、成熟叶、幼茎、老茎及根等不同部位的分布存在明显差异,其中无论胁迫与否,有机酸均主要分布在茎叶之中,特别是在决定光合生产力的成熟叶片中。Na+、K+、Ca2+在不同部位的分布规律基本一致,表明Na+对K+、Ca2+的吸收与转运不存在拮抗竞争作用。实验证明了K+、Ca2+特殊的吸收机制及各溶质的分布特点对碱地肤抗盐碱生理是至关重要的;不论在盐胁迫还是碱胁迫下,有机酸在碱地肤不同部位特别是成熟叶中,均是参与渗透调节、离子平衡及pH调节的主导成分,是决定碱地肤适应盐碱生境的关键物质之一。实验同时也证明了碱地肤的不同部位对盐碱胁迫的适应机制有所不同。

盐碱混合胁迫下抗碱盐生植物碱地肤的生长及其茎叶中溶质积累特点

将中性盐NaCl、Na2SO4和碱性盐NaHCO3、Na2CO3按不同比例混合,模拟出25种盐度、碱度各不相同的复杂盐碱条件,并对抗碱盐生植物碱地肤幼苗进行盐碱混合胁迫处理。测定其茎叶中溶质含量及日相对生长率等9项胁变指标,并分析了有机酸组分。以探讨混合盐碱胁迫下,碱地肤的生长及其茎叶中溶质积累特点。结果表明,适当的中性盐胁迫(80 mmol/L)对其生长有促进作用,而后随着盐度或碱度的增强其日相对生长率逐渐下降。在本实验条件下,碱地肤幼苗可耐受的最高盐碱混合胁迫强度为盐度400 mmol/L、pH值10.70,可见碱地肤是一种高度抗碱的盐生植物。在各种盐碱混合胁迫下,碱地肤茎叶中各种溶质的积累表现出了与众不同的特点。大量积累以Na+、K+为主的无机离子。Na+、K+含量均随盐度增强而上升,而且K+/Na+基本保持不变(约为0.49),表明了碱地肤对K+、Na+吸收可能不存在拮抗作用。盐度是影响Na+、K+含量的主导因素,而碱度的影响较小。大量积累的有机溶质是甜菜碱和有机酸。随着盐度或碱度的增强甜菜碱的含量逐渐上升,最高含量可达干重的6%。盐度对甜菜碱积累的影响大于碱度。在积累的有机酸中,草酸的比例高达90%以上。有机酸含量不仅随盐度增高而上升,而且碱度对其也有明显的提高作用。只有在盐度大于240 mmol/L或pH值超过9.8的高强度的盐碱胁迫下,脯氨酸才有所积累,而且其积累量平均仅为甜菜碱的1/74左右。这一现象表明碱地肤茎叶中脯氨酸的积累可能不是一种单纯的对渗透胁迫的生理响应。

几种杀虫植物对蚜虫的生物活性及与化学杀虫剂混用的联合毒力

通过杀虫植物的筛选测定发现,马齿苋(Portulacaoleracea)、北乌头(Aconitumkusnezoffii)、大籽蒿(Artemisiasieversiana)3种植物的丙酮提取液对禾谷缢管蚜(Rhopalosiphumpadi)、绣线菊蚜(Aphispomi)和菜缢管蚜(Rhopalosiphumpseudobrassicae)具有较高的生物活性。以不同溶液进行提取,马齿苋的水浸液和丙酮浸液活性较高,北乌头的丙酮浸液活性最高。与化学农药混用,3种植物提取液对吡虫啉和氧化乐果均表现明显增效,而与抗蚜威混用则无明显的增效作用。

大籽蒿花中生物碱类化感物质对羊草根茎节器官分化的影响

通过观察大籽蒿花提取物中生物碱物质对羊草根茎节部的影响 ,从细胞水平分析研究了它们之间的化感作用机制。结果表明 ,在有生物碱类物质存在时 ,与对照相比较 ,无论是羊草不定根的形成个数 ,还是从髓射线部位形成的突起物的个数 ,随浓度升高 ,存在一个先增加后降低的趋势。在浓度 1%下 ,影响不大 ;在 5 %和 10 %下 ,有增加的趋势 ;但随着浓度的增加 ,在浓度 2 0 %下 ,有减少的趋势。羊草根茎节部不定芽的形成个数受生物碱类物质的影响很小。

不同大小碱地肤种子的萌发耐盐性比较

分别用不同浓度的中性盐(NaCl)、碱性盐(NaHCO3)处理不同高度碱地肤(株高分别为10,30和50 cm)植株的种子,比较其种子对2种盐分抗逆性差异。结果表明,在无盐胁迫条件下,种子生物学特性决定了发芽情况,植株越高,种子千粒重越大,种子的发芽率、发芽指数和活力指数越高。低浓度的盐碱刺激了碱地肤的发芽,随着盐浓度的增加,碱地肤种子的萌发受到不同程度的抑制,发芽时间延长,其发芽的趋势随着植株高度的增加而递减。在相同Na+(100 mmol/L)条件下,NaCl处理组中碱地肤种子的活力指数、发芽指数高于NaHCO3处理组。试验结果证实,对于不同大小的碱地肤植株,其种子对盐碱的适应能力是不同的。

大籽蒿花粉过敏原的分离、鉴定与纯化

目的:对我国蒿属花粉中常见的大籽蒿花粉进行分离、鉴定与纯化。方法:提取大籽蒿花粉粗浸液,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离蛋白质组分,并用凝胶成像系统测定各组分的相对分子质量(Mr);免疫印迹(Western blot)鉴定花粉主要过敏原;通过DEAE-Cellulose DE-52离子交换层析(Ion exchange chromatography,IEC)对大籽蒿花粉过敏原进行纯化和免疫印迹鉴定。结果:分离后得到20多种蛋白组分,其中分子量(Mr)为62、57、38、29、25、14 kD 6个条带蛋白含量最丰富,其中Mr为62 kD和16 kD的蛋白条带与确诊的蒿属花粉过敏患者血清特异性IgE结合率最高(均>50%),为其主要过敏原,离子交换层析纯化后可得到Mr为62、16 kD的过敏原。结论:大籽蒿花粉的主要过敏原为Mr 62 kD和16 kD的蛋白组分,离子交换层析技术可以对Mr为62 kD、16 kD的主要过敏原成分进行纯化。

盐碱胁迫下碱地肤体内的有机酸积累及其草酸代谢特点

本研究对碱地肤幼苗进行盐胁迫或碱胁迫动态处理,通过分析碱地肤的有机酸含量及草酸代谢相关酶活性等指标,以探讨碱地肤的有机酸积累及草酸代谢调控机制的特点。结果表明,随着碱胁迫时间的延长,碱地肤体内草酸等7种有机酸均有所积累,草酸为主的有机酸的大量积累可能与碱胁迫(高pH)密切相关,它们可能起到离子平衡和pH调节的双重作用。碱地肤积累的草酸并非主要来源于抗坏血酸分解途径。此外,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPcase)参与催化的草酰乙酸裂解途径也不是草酸合成的主要途径。实验确定草酸合成的关键酶是乙醇酸氧化酶(GO)。草酸分解的草酸氧化酶(OxO)活性高低不是内源草酸积累量的关键因子。综上推断,碱地肤体内草酸的大量积累与其OxO分解无关,而是主要取决于其合成的GO关键酶。

藏药大籽蒿提取物体外抗菌活性研究

目的:研究藏药大籽蒿全草和花蕾提取物的体外抗菌活性。方法:以试管稀释法测定提取物对大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和铜绿假单胞菌(ATCC27853)标准菌株的最小抑菌浓度(MIC),同时测定最小杀菌浓度(MBC)。结果:藏药大籽蒿水、乙醇提取物在体外对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抗菌作用,并有一定的杀菌作用;乙醇的热提取物对铜绿假单胞菌也具有明显的抑菌和杀菌活性。结论:藏药大籽蒿对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌标准菌株具有一定抗菌作用,其抗菌活性部位为水提取物和乙醇提取物;同一溶剂的大籽蒿全草与花蕾提取物具有相同的抗菌活性。

碱地肤的生态、生理适应性及其群落特征

本文采用野外调查分析和室内实验相结合的方法，研究了碱地肤（Ｋｏｃｈｉａｓｉｅｖｅｒｓｉａｎａ）的生态、生理适应性及其组成的群落，结果表明：（１）碱地肤有一定的耐碱能力，生态幅度较窄。它与生境的关系及种群的数量调节是其生态适应性的体现。（２）碱地肤对盐碱生境的适应是由于体内具有某些生理调节功能，主要的如呼吸强度随着盐浓度升高而下降，同时ＡＴＰ含量减少；细胞膜透性随着盐浓度增高而加大，脯氨酸的积累增多。（３）碱地肤与不同植物组成多个群落，其生态优势度体现了群落种类组成的变化，反映土壤碱化程度的差异，构成羊草草地退化的一个演替系列。

大籽蒿花粉变应原皮试液诊断大籽蒿花粉过敏的临床评价

目的评价应用蒿属花粉变应原注射液原液1：1000稀释液进行皮内试验诊断蒿属花粉过敏的有效性和安全性。方法回顾性分析2009年2月至7月于北京协和医院变态反应科就诊的1043例患者皮内试验结果，将蒿属花粉变应原注射原液1：1000稀释液皮内试验结果分别与变态反应专科医生临床综合特异性诊断及血清特异性IgE（specificIgE，sIgE）诊断结果进行对比，评价皮内试验诊断蒿属花粉过敏的特异度和敏感度及与变态反应专科医生临床综合特异性诊断和血清sIgE诊断结果的一致性。同时评价蒿属花粉变应原注射原液1：1000稀释液用于皮内试验的安全性。结果以变态反应专科医生临床综合特异性诊断结果作为金标准，将蒿属花粉皮内试验结果≥“＋”作为诊断界值，蒿属花粉变应原注射原液1：1000稀释液皮内试验灵敏度为95．99％，特异度为84．36％，阳性预测值为85．01％，阴性预测值为95．79％，准确度为89．95％，ROC曲线下面积为0．956，95％的可信区间为（0．943—0．970）。当以蒿属花粉皮内试验结果≥“＋＋”为诊断界值时，蒿属花粉皮内试验灵敏度为79．29％，特异度为97．33％，阳性预测值为96．48％，阴性预测值为83．57％，准确度为88．66％。次要评价指标以PhadiaUni-CAP系统血清蒿属花粉变应原sIgE诊断结果作为标准，将蒿属花粉皮内试验结果≥“＋”作为诊断界值时，蒿属花粉变应原注射原液1：1000稀释液皮内试验的灵敏度为95．23％，特异度为45．98％，阳性预测值为88．97％，阴性预测值为67．80％，准确度为86．39％。如以蒿属花粉皮内试验结果≥“＋＋”为诊断界值时，则皮内试验灵敏度78．89％，特异度为96．55％，阳性预测值为99．05％，阴性预测值为50．00％，准确度为82．06％。蒿属花粉血清sIgE阳性组中，血清sIgE水平与蒿属花粉变应原注射原液1：1000稀释液的阳性反应程度的等级相关系数为0．68728。1043例受试者中，与蒿属花粉变应原有关的局部不良反应为7．01％（73／1043）；仅有1例患者出现全身不良反应，该患者同时合并律草花粉、圆柏花粉过敏。结论使用蒿属花粉变应原注射原液1：1000稀释液进行皮内试验，可以有效、安全地诊断蒿属花粉引起的过敏性疾病。

大籽蒿水浸提液对羊草种子萌发的影响

本项研究用大籽蒿不同器官及其不同浓度的水浸提液进行羊草种子萌发实验,测定羊草种子活力指数,比较不同培养方法对羊草种子活力指数的影响,实验结果表明:1)大籽篙不同器官水浸提液对羊草种子萌发和幼苗初期生长有不同程度的影响,作用大小的顺序是:大籽蒿的花>营养体>根>幼苗;2)大籽蒿水浸提液的浓度直接影响着羊草种子活力指数,表现为在低浓度时提高羊草种子活力指数;随着浓度的增加,羊草种子活力指数逐渐降低。在无芒雀麦种子萌发过程中,无论浓度高低都对其有强烈的抑制作用;3)用不同方法进行羊草种子萌发实验表明:在不同条件下,羊草种子活力指数表现差异显著,其中土壤中萌发的羊草种子活力指数极显著的高于水中萌发的;垂直萌发的和培养皿萌发的差异也极显著。

盐碱混合胁迫对碱地肤含水量的影响

本实验以天然抗碱盐植物碱地肤为材料,将NaCl、Na2SO4、NaHCO3和Na2CO3按不同的比例混合,模拟出的胁迫处理覆盖了总盐度80～400 mmol.L-1,pH 6.93～10.68范围内的各种盐碱混合的生态条件,并对碱地肤幼苗进行胁迫处理。通过测定碱地肤幼苗的含水量,并对数据进行统计学分析,进而探讨盐碱混合胁迫对碱地肤生长的影响特点,同时对盐碱混合胁迫的作用因素加以分析。